Практические задания по медицинской микробиологии, вирусологии (стр. 7 )

  I.  Изучить факторы патогенности бактерий:

Демонстрация продукции Staphylococcus aureus:

       1.1. гемолизина на кровяном агаре;

       1.2. лецитиназы на желточно-солевом агаре;

       1.3. плазмокоагулазы в цитратной плазме крови.

Зарисовать проявление гемолитической и лецитиназной активности S. аureus на питательных средах.

Рис. 1. Проявление гемолитической  Рис. 2.  Проявление лецитиназной  активности S. аureus на кровяном агаре  активности на желточно - солевом агаре

Зарисовать капсулы Klebsiella pneumoniae, выявленные при микроскопии препарата, приготовленного из чистой культуры клебсиелл и окрашенного по Бурри-Гинсу.

Рис. 3.  Капсулы Klebsiella pneumoniae.  Окраска по Бурри-Гинсу

Учесть и зарисовать результаты определения токсигенности Corynebacteium diphtheriae методом иммунодиффузии в специальной агаровой питательной среде.

Рис. 4. Результаты определения токсигенности  Corynebacteium diphtheriae (метод иммунодиффузии)

  II. Внести в таблицу сведения о свойствах бактериальных токсинов.

Таблица

Сравнительная характеристика экзо - и  эндотоксинов

Характеристика токсина	Тип токсина
экзотоксины	эндотоксины
Химический состав
Чувствительность к температуре
Действие на клетку
Иммуногенность
Превращение в анатоксин

Подпись преподавателя ________________

Занятие  №15

Контрольное занятие №2.

Тема: «Генетика микроорганизмов. Антимикробная терапия. Экология микроорганизмов»

I.  Тестовый контроль знаний.

II. Практический контроль

Определить чувствительность стафилококков к антибиотикам методом стандартных дисков. Установить минимальную ингибирующую концентрацию (мкг/мл) антибиотика в отношении исследуемой культуры Staphylococcus aureus методом серийных разведений в МПБ. Определить ОКБ пробы питьевой воды централизованного водоснабжения методом мембранных фильтров и дать микробиологическую оценку качества исследуемой воды. Определить общее микробное число (КОЕ/мл) питьевой воды централизованного водоснабжения и дать микробиологическую оценку ее качества. Определить общее микробное число воздуха операционной хирургического блока седиментационным методом до проведения операции, и дать микробиологическую оценку чистоты воздуха. Определить фенотипическое проявление факторов патогенности Staphylococcus aureus на специальных средах (кровяной агар, желточно-солевой агар, цитратная плазма крови) и охарактеризовать их. Промикроскопировать препарат из культуры Klebsiella pneumoniae, окрашенный по Бурри-Гинсу, выявить и охарактеризовать фактор патогенности этого микроорганизма.

III. Вопросы для устного опроса

Материальные основы наследственности микроорганизмов. Организация генетического материала у прокариотов, эукариотов, вирусов. Генотип и фенотип. Виды изменчивости. Модификации. Механизм. Фенотипические проявления. Мигрирующие генетические элементы бактерий: транспозоны, is-последовательности, плазмиды. Характеристика. Свойства плазмид. Роль плазмид в детерминировании патогенных признаков и лекарственной устойчивости. Мутации, их классификации. Мутагены физические, химические, биологические. Молекулярный механизм мутаций (делеция, дупликация, инверсия). Репарации и их значение. Роль мутаций в эволюционном процессе. Генетические рекомбинации у бактерий. Трансформация. Трансдукция. Конъюгация. Их роль в эволюции микроорганизмов. Микробиологические основы генетической инженерии и биотехнологии. Конструирование генно-инженерных штаммов с заданными свойствами, их использование в получении вакцин, гормонов и других биологических препаратов. Генотипические методы исследования в диагностике инфекционных болезней и в идентификации микроорганизмов. Молекулярная зондовая гибридизация нуклеиновых кислот. Полимеразная цепная реакция. Антибиотики. История открытия (А. Флеминг). Классификация антибиотиков по происхождению, химическому составу, механизму, спектру и характеру антимикробного действия. Единицы измерения их активности. Лекарственная устойчивость микроорганизмов. Генетические и биохимические механизмы приобретенной резистентности. Методы определения чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Пути преодоления лекарственной устойчивости. Противовирусные химиотерапевтические препараты. Классификация по механизму противовирусного действия. Антифунгальные препараты. Классификация по механизму действия. Санитарная микробиология, ее задачи. Санитарно-показательные микроорганизмы. Критерии достоверности выбора санитарно-показательных микроорганизмов. Микрофлора воды. Эпидемиологическое значение воды как фактора распространения некоторых патогенных микроорганизмов. Микробиологическое исследование воды: микробное число, ОКБ и ТКБ. Микрофлора воздуха. Патогенные микроорганизмы, передающиеся через воздух. Микробиологическое исследование воздуха. Показатели оценки санитарно-гигиенического состояния воздуха в лечебных учреждениях. Микрофлора тела здорового человека. Характеристика основных микробиоценозов организма. Роль микроорганизмов в физиологических процессах и патологии. Гнотобиология. Основные физиологические функции естественной микрофлоры организма человека, участие ее в колонизационной резистентности. Дисбиоз (дисбактериоз) и причины его возникновения. Эубиотики. Пробиотики. Инфекция (инфекционный процесс). Инфекционная болезнь. Основные факторы, обусловливающие возникновение инфекционного процесса. Роль микроорганизмов в инфекционном процессе. Патогенность. Вирулентность, единицы измерения (DLM,  LD50), методы определения. Инфекционная доза (ID). Факторы патогенности, обеспечивающие адгезию, колонизацию, инвазию и агрессивность микроорганизмов. Классификация бактериальных токсинов. Сравнительная характеристика токсинов протеиновой и липополисахаридной природы. Классификация и характеристика бактериальных протеиновых токсинов по механизму действия на эукариотические клетки (мембранотоксины, цитотоксины, функциональные блокаторы). А - и В - субъединицы молекулы токсина,  их функция. Механизмы и пути передачи возбудителей инфекционных болезней от источника (резервуара) инфекции восприимчивому человеку. Микробиологическая и иммунобиологическая характеристика периодов инфекционной болезни. Характеристика особенностей инфекционных болезней: специфичность, контагиозность, цикличность течения, формирование иммунитета. Пути проникновения патогенных микробов в организм человека и их распространение по организму. Динамика развития инфекционной болезни. Пути выведения патогенных микроорганизмов из организма во внешнюю среду. Формы проявления инфекции, их характеристика. Персистенция патогенных микроорганизмов. Микробоносительство. Факторы патогенности вирусов: адгезины, нуклеиновые кислоты, белки, ферменты. Патогенетические особенности вирусных инфекций. Острая и персистирующая инфекции.

Дата__________________

Занятие  №16

Тема:  Введение в иммунологию. Типы иммунитета и формы иммунного реагирования. Понятие об антигенах и антителах.

Вопросы для обсуждения:

Иммунитет. Виды и формы иммунитета Естественный (врожденный) иммунитет. Факторы неспецифической защиты. Характеристика приобретенного (специфического) иммунитета. Факторы специфического иммунитета. Антигены, их свойства. Антигены микроорганизмов. Антигены организма человека. (Изоантигены, аллоантигены). Молекулы МНС - I и МНС - II классов. Иммуноглобулины (антитела). Структура. Классы. Функции иммуноглобулинов. Реакции антиген-антитело, их практическое применение. Реакция агглютинации. Реакция преципитации.

Практические задания:

1. Демонстрация незавершенного фагоцитоза. Промикроскопировать препараты из гнойного отделяемого уретры больного гонореей, окрашенные щелочным метиленовым синим  и по Граму. Препараты зарисовать.

Рис. 1. Фагоцитоз гонококков.  Рис. 2. Фагоцитоз гонококков.  Окраска по Граму.  Окраска  щелочным метиленовым синим.

2.  Нарисовать схему строения бактериальной клетки и указать антигены поверхностных структур клетки (капсульный, фимбриальный, жгутиковый, соматический).

Рис. 3. Схема строения бактериальной клетки.

Нарисовать схему строения молекулы IgG и указать ее структурные элементы: H - и L-полипептидные цепи, Fab - и Fc-фрагменты, антигенсвязывающие центры – паратопы.

Рис. 4. Схема строения молекулы IgG.

  4. Поставить реакцию агглютинации (РА) на стекле исследуемой чистой культуры с диагностическими сальмонеллезными монорецепторными сыворотками, учесть и зарисовать полученные результаты. Определить вид исследуемой культуры с помощью табл. 1.

Антитела к антигенам сальмонелл	О - 9	О - 12	Vi	Hd	Hgm	0,85% NaCl (контроль)

Рис. 5. Результаты постановки РА на стекле.

Выводы: на основании полученных результатов постановки РА на стекле чистой культуры диагностическими сальмонеллезными монорецепторными сыворотками установлено, что исследуемая культура бактерий относится к _________________________________.