Состояние локального иммунитета и фосфорно-кальциевого обмена у детей с кариесом (стр. 2 )

Результаты исследования и их обсуждение

При оценке цитокинового профиля смешанной слюны у детей с кариесом установлено, что в общей группе статистически значимо повышен уровень как провоспалительных (ФНОб, ИЛ-1в), так и противовоспалительных (ИЛ-10, ИЛ-13) цитокинов по сравнению с контролем. Тогда как содержание ИЛ-6, растворимых рецепторов ФНОб II типа, б-субъединицы ИЛ-6 оказалось в пределах нормы. Не было выявлено существенных возрастных и половых различий большинства показателей локального цитокинового профиля. Исключение составили только
ИЛ-6 и ФНОб RII. Содержание ИЛ-6 в слюне было выше у девочек обеих возрастных групп, а значения ФНОб RII было статистически значимо низким у девочек в возрасте 11-14 лет по сравнению с контрольной группой. У детей, нуждающихся в санации полости рта, определено не только увеличение локального уровня ФНОб, ИЛ-1в, ИЛ-10, ИЛ-13, но и повышен уровень растворимого рецептора ИЛ-6 и снижение содержания ФНОб RII. Содержание ИЛ-1в и ИЛ-10 в слюне детей основных подгрупп (санированных и нуждающихся в санации) в среднем мало отличалось, однако, при расчете индивидуальных коэффициентов соотношения этих цитокинов выявлено существенное увеличение ИЛ-1в/ИЛ10 у детей, нуждающихся в лечении кариеса. Это подтверждает мнение большинства исследователей (, 2004; с соавт., 2010) о необходимости определения соотношений уровня цитокинов с разными функциональными свойствами, что позволяет оценить относительный дефицит или гиперпродукцию изучаемых медиаторов. Соответственно, у детей, нуждающихся в санации ротовой полости, в слюне определена относительная гиперпродукция провоспалительного цитокина ИЛ-1в. Патогенетически важным является его способность активировать остеокласты, что способствует усилению проницаемости и резорбции кости (, 2011). В культуре клеток ИЛ-1 увеличивает продукцию ПГЕ2, ИЛ-6 и ИЛ-8 остеобластами и генерацию остеокластов в культуре клеток костного мозга (, 2000).

При анализе локального содержания противовоспалительных цитокинов у детей с разной интенсивностью кариеса выявлены существенные различия (табл.1).

Таблица 1

Показатели цитокинового профиля смешанной слюны у детей с различной интенсивностью кариеса

Исследованные цитокины (М±у, пг/мл)	Группы детей с кариесом
Санированные (n=33)	Нуждающиеся в санации (n=71)
Компенсирован-ный кариес (n=26), р1	Субкомпенсиро-ванный кариес (n=7), р2	Компенсированный кариес (n=29), р3	Субкомпенсиро-ванный кариес (n=42), р4
ФНОб	4,28±1,06	18,64±10,15*	20,64±9,64***	37,12±18,34*** р1-4<0,05
ФНОбRII	110,46±24,50	90,82±21,16	97,64±30,61	70,52±24,15* р1-4<0,05
ИЛ-1в	53,50±9,58***	65,72±11,50*	68,95±12,54**	83,51±17,93**
ИЛ-6	11,26±2,16	13,42±3,54	20,84±6,84	38,18±7,06*** р1-4<0,05 р2-4<0,05
ИЛ-6SR	136,72±26,10	168,40±34,20	132,00±20,32	209,72±21,61*** р1-4<0,05 р3-4<0,01
ИЛ-10	439,31±186,53** р1-2<0,05	166,82±63,33 р2-3<0,001	1011,91±258,85*** р1-3<0,05 р3-4<0,001	288,90±86,35* р1-4<0,05 р2-4<0,05
ИЛ-13	115,34±93,64*	58,11±40,65 р2-3<0,05	276,12±132,74** р1-3<0,05 р3-4<0,05	105,45±54,32* р2-4<0,05

Примечание: статистическая значимость различий с контрольной группой: р<0,05 - *, р<0,01 - **, р<0,001 - ***, р1, р2, р3, р4 – сравниваемые группы

При субкомпенсированном кариесе статистически значимо увеличено содержание в слюне ФНОб (r=0,8; р<0,05) с недостаточностью его растворимого рецептора (r= -0,64; р<0,05) в группе детей, нуждающихся в санации. В этой группе детей также установлено повышение ИЛ-6 (r=0,76; р<0,76) и его растворимого рецептора (r= 0,81; р<0,02). Установлено, что уровень ИЛ-10 в слюне был выше при компенсированном кариесе, как в группе детей с санированной полостью рта, так и в группе, нуждающихся в лечении (r= -0,84; р<0,01). ИЛ-10 способен ингибировать синтез провоспалительных цитокинов и свободных радикалов кислорода и азота, представление антигенов макрофагами и дендритными клетками ( с соавт., 2009). ИЛ-10 ингибирует выброс различных хемокинов нейтрофильными гранулоцитами, синтез ими провоспалительных цитокинов, циклооксигеназы-2 и ПГЕ2 ( с соавт., 2004). Показана так же активация им продукции иммуноглобулинов G4 и А ( с соавт., 2011). Одним из механизмов супрессии клеточного иммунного ответа ИЛ-10 является его участие в генерации регуляторных Т-клеток (Т reg) и поддержании их функций. Для оценки сопряженности прогрессирующего течения кариеса и коэффициента соотношения ИЛ-1в/ИЛ-10 был использован ч2. Проведенный анализ позволил установить, что увеличение коэффициента более 1,6 может служить дополнительным иммунологическим критерием субкомпенсированного кариеса. Полученные данные свидетельствуют о важной защитной роли ИЛ-10 в предупреждении усиления активности кариеса.

При оценке уровня другого противовоспалительного цитокина – ИЛ-13 в слюне детей с кариесом установлено снижение его содержания при субкомпенсированной форме как у детей с санированной полостью рта, так и у нуждающихся в лечении. Это, вероятно, отражает активацию клеточно-опосредованного компонента иммунитета в ротовой полости детей с субкомпенсированным кариесом.

При анализе уровня провоспалительных цитокинов (ИЛ-1в, ФНОб, ИЛ-6) в сыворотке крови детей с кариесом по сравнению с аналогичными показателями у здоровых сверстников, установлено статистически значимое повышение только содержания ИЛ-1в. Оценка содержания растворимых рецепторов ФНОб II типа и ИЛ-6 позволила выявить разнонаправленную динамику: определено снижение (р<0,01) уровня ФНОб RII и, напротив, практически двукратное увеличение уровня растворимых рецепторов ИЛ-6 (р<0,001). Снижение уровня ФНОб RII при нормальных значениях самого цитокина может приводить к усилению биологической активности ФНОб.

Функция же специфической для ИЛ-6 рецепторной субъединицы заключается не в ингибиции ИЛ-6, а, напротив, в его активации. Это явление получило название транссигналинга (, 2001). В связи, с чем увеличение количества растворимого рецептора ИЛ-6 в сыворотке крови свидетельствует об усилении активности ИЛ-6.

В группе детей с компенсированным кариесом, санированной полостью рта, цитокиновый профиль крови был сопоставим с контрольными значениями. За исключением уровней растворимого рецептора ИЛ-6, который был выше значений контрольной группы (р<0,001). При субкомпенсированном кариесе, но санированной полости рта,  уровень цитокинов так же был в пределах нормы. Тогда как уровень исследованных растворимых рецепторов изменялся. Нарастало содержание растворимого рецептора ИЛ-6 и существенно снижалось содержание ФНОб RII. Это, как уже отмечалось выше, отражает усиление провоспалительной активности ФНОб и ИЛ-6, и может способствовать прогрессированию кариеса.

Таким образом, в группе детей, нуждающихся в санации зубов, при компенсированном течении кариеса было выявлено умеренное увеличение ИЛ-1в в крови, снижение растворимого рецептора ФНОб II типа и высокое содержание растворимого рецептора ИЛ-6. Наиболее выраженное нарушение цитокинового профиля крови зарегистрировано у детей с субкомпенсированным кариесом и несанированной полостью рта. Установлена гиперпродукция ФНОб, ИЛ-1в, существенное увеличение растворимого рецептора ИЛ-6 и дефицит растворимого рецептора ФНОб II типа. Корреляционный анализ выявил прямую зависимость интенсивности кариеса с уровнем в сыворотке крови ИЛ-1в (r= 0,44; р<0,05); растворимым рецептором ИЛ-6 (r= 0,63; р<0,05) и обратную – с содержанием растворимого рецептора ФНОб II типа (r= -0,72; р<0,05). 

Полученные данные демонстрируют системность нарушений иммунорегуляции у детей с кариесом. При компенсированном кариесе первоначально возникает перенапряжение регуляторных механизмов с дисбалансом уровня растворимых рецепторов (ФНОб II типа и ИЛ-6), что способствует реализации провоспалительных свойств этих цитокинов. При субкомпенсированном кариесе системные нарушения усугубляются. В крови определяется абсолютное повышение провоспалительных цитокинов на фоне еще более выраженного дисбаланса их растворимых рецепторов.

Нами не найдено работ, в которых исследовался уровень ММР-9 и ее ингибитора при кариесе. Проведенное исследование ММР-9 и ее комплекса с тканевым ингибитором II типа показало, что уровень металлопротеиназы повышен при субкомпенсированном кариесе, особенно у детей, нуждающихся в санации полости рта (рис. 2).

Рис. 2. Локальный уровень ММР-9 и ее комплекса с тканевым ингибитором II типа в зависимости от интенсивности кариеса

При этом активация продукции тканевого ингибитора с образованием комплекса с ММР-9 внутри группы выше (р<0,05-0,001) при компенсированном кариесе. У детей с субкомпенсированным кариесом количество этого комплекса, хотя и превышало значения контроля, относительно снижено. Расчет коэффициента соотношения количества матриксной металлопротеиназы к ее комплексу с тканевым ингибитором зафиксировал максимально высокие (р<0,01) значения у обследованных с активным, несанированным субкомпенсированным кариесом. Установлена прямая корреляция значений этого комплекса и интенсивности при несанированном кариесе (r=0,76; р<0,05), что свидетельствует о значительном повышении продукции ММР-9 по сравнению с уровнем ее тканевого ингибитора. Полученные результаты демонстрируют важную роль нарушений межклеточного матрикса в патогенезе кариеса у детей.