│(условия опыта) │ ├─────────────────────────────┤ │
│ │ │ Время от начала опыта │ │
│ │ ├────┬────┬────┬────┬────┬────┤ │
│ │ │1 ч │6 ч │24 ч│48 ч│72 ч│96 ч│ │
├──────────────────┼───────────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼──────────┤
│Контроль │ 1 │ │ │ │ │ │ │ │
│ │ 2 │ │ │ │ │ │ │ │
│ │ 3 │ │ │ │ │ │ │ │
│ │ 4 │ │ │ │ │ │ │ │
├──────────────────┼───────────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼──────────┤
│ _ │ │ │ │ │ │ │ │ │
│Средняя (Xk) │ │ │ │ │ │ │ │ │
├──────────────────┼───────────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼──────────┤
│Опыт (Ст. вода без│ 1 │ │ │ │ │ │ │ │
│разбавления) │ 2 │ │ │ │ │ │ │ │
│ │ 3 │ │ │ │ │ │ │ │
│ │ 4 │ │ │ │ │ │ │ │
├──────────────────┼───────────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼──────────┤
│ _ │ │ │ │ │ │ │ │ │
│Средняя (Хо) │ │ │ │ │ │ │ │ │
│% от контроля │ │ │ │ │ │ │ │ │
├──────────────────┼───────────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼──────────┤
│Опыт (Ст. вода с│ 1 │ │ │ │ │ │ │ │
│разбавлением в n│ 2 │ │ │ │ │ │ │ │
│раз) │ 3 │ │ │ │ │ │ │ │
│ │ 4 │ │ │ │ │ │ │ │
├──────────────────┼───────────┼────┼────┼────┼────┼────┼────┼──────────┤
│ _ │ │ │ │ │ │ │ │ │
│Средняя (Хо) │ │ │ │ │ │ │ │ │
│% от контроля │ │ │ │ │ │ │ │ │
└──────────────────┴───────────┴────┴────┴────┴────┴────┴────┴──────────┘
Обработка результатов
Смертность рачков в процентах к контролю (А) рассчитывают по формуле [2]:
_ _
(Xk - Хо)
А = ------------- х 100, где
_
Xk
_
Xk - среднее арифметическое количества рачков, выживших в контроле,
_
Хо - среднее арифметическое количества рачков, выживших в опыте.
Биотестирование прекращают, если в любой период времени в опыте гибнет 50% и более особей.
Если А >= 50%, то тестируемая вода (опыт) остротоксична.
Если А < 50%, то тестируемая вода не оказывает острого токсического действия.
Для более точного определения острой токсичности строят график, где по оси абсцисс (ось X) откладывают время в часах, а по оси ординат (ось Y) смертность в процентах к контролю (А). Из графика находят ЛТ50 - время, в течении которого погибает 50% дафний.
2.6. Определение токсичности сточной (природной) воды на
Ceriodaphnia Affinis
Материалы
Пробирки емкостью 20 мл (20-40 штук).
Пипетка на 25 мл 2-го класса точности.
Колба для разбавляющей (контрольной) воды емкостью 1 л.
От 40 до 80 рачков в возрасте 0,1-8 часов. Разница в возрасте рачков не должна превышать 4 часов.
Подготовка опыта
Расставить пробирки по 10 штук в ряду по следующей схеме:
К1 Ст. вода б/р N 1 Ст. вода 1:10 N 1 Ст. вода 1:100 N 1
К2 Ст. вода б/р N 2 Ст. вода 1:10 N 2 Ст. вода 1:100 N 2
К3 Ст. вода б/р N 3 Ст. вода 1:10 N 3 Ст. вода 1:100 N 3
К4 Ст. вода б/р N 4 Ст. вода 1:10 N 4 Ст. вода 1:100 N 4
К5 Ст. вода б/р N 5 Ст. вода 1:10 N 5 Ст. вода 1:100 N 5
К6 Ст. вода б/р N 6 Ст. вода 1:10 N 6 Ст. вода 1:100 N 6
К7 Ст. вода б/р N 7 Ст. вода 1:10 N 7 Ст. вода 1:100 N 7
К8 Ст. вода б/р N 8 Ст. вода 1:10 N 8 Ст. вода 1:100 N 8
К9 Ст. вода б/р N 9 Ст. вода 1:10 N 9 Ст. вода 1:100 N 9
К10 Ст. вода б/р N 10 Ст. вода 1:10 N 10 Ст. вода 1:100 N 10
Разлить по пробиркам контрольную (разбавляющая вода) и сточную воду (Ст. вода) по 15 мл:
К1-К10 - 150 мл разбавляющей воды (РВ).
Ст. вода б/р (без разбавления) - 150 мл (10 * 15 мл).
Ст. вода 1:10 - 25 мл Ст. воды б/р + 225 мл РВ = 250 мл Ст. вода 1:10.
Ст. вода 1:100 - 25 мл Ст. воды 1:10 + 225 мл РВ = 250 мл Ст. вода 1:100.
Пробирки с растворами расставить в люминостате.
Произвести замеры температуры в люминостате (норма 23-27°С), рН растворов (норма 6,5-8,5), концентрация растворенного кислорода (норма перед началом опыта 6 мг/л, в конце опыта - не менее 4 мг/л).
В обязательном порядке скорректировать рН проб до 6,5-8,5 с помощью растворов NaOH или НСl, если они не соответствуют указанным выше нормативам. Насыщенность тестируемых проб кислородом также должна лежать в указанных рамках.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 |
