Новые технологии иммунодиагностики и механизмы иммунных нарушений при урогенитальных инфекциях у женщин репродуктивного возраста (стр. 7 )

Таким образом, фенотипические свойства хламидий оказывают влияние на выраженность патогенетического процесса, клинических проявлений. При этом их воздействие определяется наличием и сочетанием отдельных патогенетических факторов (присутствие плазмиды, функциональное состояние гена IncA, принадлежность штамма хламидий к конкретному генотипу, одновременное инфицирование штаммами хламидий разными генотипами и возможность обменивание между ними генетической информацией с появлением другой разновидности хламидийного штамма).

Выводы:

1.Вторичный иммунодефицит при урогенитальной хламидийной инфекции на организменном уровне проявляется повышенной восприимчивостью к бактериальным (микоплазмы, доминирование двух биоваров уреаплазм) и вирусным агентам (к онкогенным типам вируса папилломы человека, ВПГ), высокой частотой выявления воспалительных процессов гениталий. На местном уровне (слизистые) отмечаются относительно слабо выраженная воспалительная реакция при остром и обострении хронического хламидиоза, угнетение нормофлоры (снижение частоты выявляемости и количественного содержания лактобацилл и бифидобактерий), сниженная реакция на условно-патогенную микрофлору, что в сочетании способствует нарушению колонизационной резистентности слизистых.

2.При остром урогентальном уреаплазмозе вторичный иммунодефицит на организменном уровне проявляется повышенной восприимчивостью к бактериальным (микоплазмы, уреаплазмы - преимущественно одного биовара, хламидии) и вирусным агентам (цитомегаловирусу, вирусам простого герпеса, вирусам папилломы человека), высокой частотой выявления воспалительных процессов гениталий. На местном уровне (слизистые) отмечаются угнетение нормофлоры (снижение количественного содержания лактобацилл и бифидобактерий), повышенная реакция на условно-патогенную микрофлору.

3.Уреаплазменная микст-инфекция сопровождается достоверным изменением микробиоценоза влагалища в зависимости от выраженности инфекционного процесса: снижением уровня протективной микрофлоры - лактобацилл, увеличением содержания условно-патогенных факультативно-анаэробных микроорганизмов в просветной области и облигатно-анаэробных микроорганизмов в пристеночной области влагалища.

4.При оценке микробиотопа влагалища больных уреплазмозом установлена достоверная корреляционная зависимость между изменением показателей микрофлоры влагалища, содержанием в вагинальном отделяемом IgG, IgA, sIgA, IgM и sc и выраженностью клинических проявлений.

5.При хламидийной инфекции установлено, что выявление в соскобном материале из уретры уровня экспрессии генов TLR-2 более 14 ОЕ и TLR-4 более 10 ОЕ, а в соскобном материале из цервикального канала TLR-2 более 19 ОЕ и TLR-4 более 14 ОЕ указывает на острый урогенитальный хламидиоз; выявление в соскобном материале из уретры уровня экспрессии генов TLR-2 не более 5 ОЕ и TLR-4 не более 5 ОЕ, а в соскобном материале из цервикального канала TLR-2 не более 6 ОЕ и TLR-4 не более 9 ОЕ указывает на хронический урогенитальный хламидиоз или начало хронизации инфекционного процесса.

6.Приведён механизм функционирования колонизационной резистентности слизистых: TLR слизистых через цитокиновую систему запускают местную воспалительную реакцию, определяют уровни IgG, sIgA и секреторного компонента (sc) и в купе с микрофлорой биотопа определяют колонизационную резистентность слизистых как части мукозального иммунитета.

8.Разработанные мультиплексные ПЦР-тест-системы для видовой дифференциации штаммов Chl. pneumoniae и Ch. trachomatis, для детекции плазмидных и бесплазмидных штаммов, а также праймеры для ПЦР-генотипирования штаммов Ch. trachomatis позволяют одновременно не только верифицировать возбудителей хламидиозов, но и осуществлять дифференциацию хламидий, оценивать вирулентность штаммов.

9.Установлено, что из 5 генотипов циркулирующих в Московском регионе штаммов Ch. trachomatis (К - 46,2%, G - 23,1%, Е - 19,2%, F - 7,7%, J - 3,8%) у женщин чаще встречаются генотип G (37,5%), генотип E (19%), генотип K (43,5%). При остром хламидиозе генотип G определяется в 22%, генотип E - в 11%, генотип К - в 61% случаев; при хроническом хламидиозе генотип G - в 25%, генотип E - в 37,5%, генотип К - в 12,5% случаев. В ассоциации всегда присутствует генотип К.

Практические рекомендации

1.При диагностике и установлении прогноза течения инфекционных заболеваний гениталий женщин необходимо и целесообразно оценить выраженность дисбиотических нарушений влагалища и цервикального канала как интегрального показателя местной антиинфекционной резистентности применяя предложенную оригинальную новую медицинскую технологию. Последняя позволяет судить о выраженности колонизационной резистентности слизистых как неотъемлемой части мукозального иммунитета.

2.При урогенитальном хламидиозе женщин количественная оценка экспрессии генов TLR-2 и TLR-4 по оригинальному разработанному способу позволяет судить о состоянии врождённого иммунитета и выявлять его нарушения, дополняет и повышает информативность, диагностическую и прогностическую значимость алгоритма верификации хламидийной инфекции.

3.Общепринятый алгоритм верификации возбудителя хламидийной инфекции необходимо расширить за счёт включения предложенных оригинальных мультиплексных ПЦР-тест-систем на одномоментное дифференцирование Chlamydia trachomatis и Chlamydophila pneumoniaе, одномоментное дифференцирование плазмидосодержащих и плазмидонегативных штаммов Chlamydia trachomatis, а также ПЦР-тест-системы с предложенными оригинальными праймерами на генотипы Chlamydia trachomatis и ПЦР-тест-системы для выявления антибиотикорезистетности штаммов хламидий.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

1. , , Несвижский Ю. В., , , - Микроэкология и показатели гуморального иммунитета влагалища женщин с неспецифическими воспалительными заболеваниями гениталий // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.-2005.-№ 3.-С. 65-69.

2. А., , - Микробиология и иммунология дисбиозов респираторного и урогенитального трактов // Аллергология и иммунология.- 2005.- Т. 6, № 3.- С. 354-355.

3. , , А., , , , - Применение Кипферона при лечении уреаплазмоза у женщин // Фарматека.-2006.-. 48-53.

4. А., , , - Чувствительность микрофлоры влагалища к антибиотикам при уреаплазмозе у женщин // Сборник материалов XIII Российского национального конгресса “Человек и лекарство”.-М., 2006.-С. 51.

5. , А., , , , - Иммуноглобулины влагалища при уреаплазмозе у женщин // Сборник материалов XIII Российского национального конгресса “Человек и лекарство”.-М., 2006.-С. 56-57.

6. , , А., , - Лечение уреаплазмоза с применением иммуномодуляторов // Сборник материалов XIII Российского национального конгресса “Человек и лекарство”.-М., 2006.-С. 184-185.

7. , , А., , Афанасьев М. С. Микробиоценоз влагалища – критерий эффективности терапии // Сборник материалов XIII Российского национального конгресса “Человек и лекарство”.-М., 2006.-С. 96.

8. , , А., А., , , , - Микробиологические и иммунологические характеристики дисбиотических нарушений биотопов слизистых оболочек респираторного и урогенитального трактов // Вестник Российской академии медицинских наук.-2006.-№ 1.-С. 3-5.

9. , , , , - Микробиологические и иммунологические критерии оценки эффективности лечения уреаплазмоза женщин // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии.-2007-№ 2.-С. 65-70.

10. , А., , , , - Инфекции в акушерстве и гинекологии. Монография. // М., «МЕДпресс-информ».- 200с.

11. , , , , - Уровни иммуноглобулинового профиля влагалища как прогностический тест при уреаплазмозе у женщин // Сборник материалов XIV Российского национального конгресса «Человек и лекарство».-М., 2007.-С. 45.

12. , , , - Анализ лечения уреаплазмоза с применением иммуномодуляторов в динамике // Сборник материалов XIV Российского национального конгресса «Человек и лекарство».-М., 2007.-С. 74.

13. , , , , - Об эффективности лечения хронического уреаплазмоза у женщин с использованием нового иммунологического препарата Кипферон // Трудный пациент.-2007.-Т. 5, № 1.-С. 28-33.

14. , А., , , , , - Микрофлора биотопов влагалища, ротоглотки и кишечника женщин с угрозой прерывания беременности на ранних сроках // Вестник РАМН.-2008.-№ 2.-С. 6-12.

15. , , Афанасьев М. С., - Уровень экспрессии генов TLR-2 и TLR-4 как прогностический критерий излеченности при урогенитальном хламидиозе // Человек и лекарство: сборник материалов XV Российского национального конгресса.– М., 2008.-С. 387-388.

16. , , Афанасьев М. С., - Лабораторная база диагностики хламидиоза // Человек и лекарство: сборник материалов XV Российского национального конгресса.– М., 2008.-С. 430-431.

17. , , Афанасьев М. С., - Уровни экспрессии генов TLR-2 и TLR-4 как показатели динамики патогенетических изменений при урогенитальном хламидиозе // Идеи Пастера в борьбе с инфекциями. Материалы четвертой международной конференции. – СПб, 2008. – С. 53.

18. , , Афанасьев М. С., - Роль и биологическое значение Толл-подобных рецепторов в антиинфекционной резистентности организма // Вестник РАМН. – 2008. – № 1. – С.45-54.

19. , Афанасьев М. С., , Леваков значимость экспрессии генов TLR-2 и TLR-4 при урогенитальном хламидиозе у женщин // Российский иммунологический журнал. – 2008. – Т. 2, № 2-3. – С. 178.

20. , , , Афанасьев М. С., , - Уровни экспрессии генов TLR-2 и TLR-4 как критерий оценки эффективности алгоритмов терапии при хламидиозе // Современные представления об иммунокоррекции. Материалы Всероссийской научно-практической конференции. – Пенза, 2008. – С.8-10.

21. , , , Афанасьев М. С., , - Связь уровней экспрессии генов TLR-2 и TLR-4 с изменениями микробиоценоза урогенитального тракта при урогенитальном хламидиозе у женщин // Иммунопатология, Аллергология, Инфектология. –2008 – № 2. – С.68-76.

22. , , А., , , Афанасьев М. С., , - Связь уровней экспрессии генов TLR-2 и TLR-4 с изменениями цитокинового профиля урогенитального тракта при урогенитальном хламидиозе у женщин // Естественные науки. – 2008 – № 4 (25). – С.62-73.

23. , , Афанасьев М. С., , Егорова методы лабораторной диагностики хламидиозов // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. – 2008 – № 4. – С.111-117.

24. , А., , , , Новикова в акушерстве и гинекологии. – Монография, 2-е издание. // М., «МЕДпресс-информ».- 200с.

25. , , Афанасьев М. С., - Сравнительная характеристика методов лабораторной диагностики урогенитального хламидиоза у больных в зависимости от остроты клинических проявлений // Человек и лекарство: сборник материалов XVI Росс. Нац. конгресса – М, 6-10 апр. 2009. – С.76.

26. , , , Афанасьев М. С., , - Фенотипическая характеристика штаммов хламидий, выделенных от человека и обезьян культуральным методом // Иммунопатология, Аллергология, Инфектология. –2009 – № 3. – С.44-53.

27. , , , Афанасьев М. С., , - ПЦР-детекция и идентификация возбудителей хламидийных инфекций человека и обезьян // Иммунопатология, Аллергология, Инфектология. –2009 – № 3. – С.54-62.

28. , , , Афанасьев М. С., , Байракова и анализ антибиотикорезистентности штаммов Chlamydia trachomatis, выделенных от человека и обезьян // Иммунопатология, Аллергология, Инфектология. –2009 – № 4. – С.74-81.

29. , , Афанасьев М. С., , , - Сравнительная характеристика методов верификации Chlamydia trachomatis у человека и обезьян // Естественные науки. – 2009 – № 1 (26). –С.65-71.

30. , , Афанасьев М. С. - Уровни экспрессии генов TLR-2 и TLR-4 как способ оценки формы и прогноза течения урогенитальной хламидийной инфекции у женщин // Биологическая безопасность в современном мире. Материалы науч.-практ. конф. 21-22 апреля 2009, ФГУН ГНЦ ПМБ – Оболенск, С.98-100.

31. , А., , Афанасьев М. С., , - Молекулярные механизмы индукции врождённого иммунитета // Вестник РАМН. – 2009 – № 4. – С.42-49.

32. , , Афанасьев М. С., , - Связь уровней МРНК TLR-2 и TLR-4 с изменениями иммуноглобулинового профиля урогенитального тракта при урогенитальном хламидиозе у женщин // Иммунология. – 2009. – Т. 30, № 3. – С.165-170.

33. , , А., , Афанасьев М. С., , - Экспрессия гена TLR-2 как показатель состояния локального иммунитета у женщин с урогенитальной хламидийной инфекцией // Научное обеспечение противоэпидемической защиты населения: сборник материалов юбилейной Всероссийской науч.-практ. конференции – Нижний-Новгород, 2009. – С.172-173.

34. , , А., , , , - Оценка микробиоценоза влагалища при инфекционных и других заболеваниях женской половой сферы. Разрешение на применение новой медицинской технологии. Серия АА. № 000. ФС № 000/187 от 01.01.2001.

35. , , А., , , - Особенности индукции местного иммунного ответа у больных урогенитальным хламидиозом // Российский иммунологический журнал.-2009.-Том 3(12), № 2.-С. 171-176.

36. , , , Афанасьев М. С., , Байракова генотипов и антибиотикорезистентности штамммов Chlamydia trachomatis, выделенных от человека и обезьян // Человек и лекарство: сборник материалов XVII Росс. Нац. Конгресса, М, 12-16 апр.2010. – С.719.

37. , , , , - Сравнительный анализ прямых методов лабораторной диагностики урогенитального хламидиоза // Астраханский медицинский журнал. – 2010 – Т. 5., № 2. – С.80-86.

38. , , А., , , , , - Уровни экспрессии TLR-2 и TLR-4 как прогностический критерий излеченности при хламидиозе // Эпидемиология и инфекционные болезни.-2010.-№ 4.-С. 35-42.

39. Karaulov Alexander, Aleshkin Vladimir, Slobodenyuk Vladimir, Grechishnikova Olga, Afanasyev Stanislav, Lapin Boris, Dzhikidze Eteri, Nesvizhsky Yuriy, Voropayeva Elena, Afanasyev Maxim, Aleshkin Andrei, Metelskaya Valeria, Yegorova Ekaterina, Bayrakova Alexandra. - Identification of Phylogenetic Position in the Chlamydiaceae Family for Chlamydia Strains Released fromMonkeys and Humans with Chlamydial Pathology // Infectious Diseases in Obstetrics and Gynecology. – Volume 2010, Article ID 11 pages.

40. Slobodenuk V. V., Aleshkin V. A., Lapin B. A., Karaulov A. V., Afanasiev S. S., Grechishnikova O. G., Voropaeva E. A., Jikidze E. K, Nesvizskii U. V., Afanasiev M. S., Metelskaia V. A., Birakova A. L., Egorova E. A. - The comparative estimation of diagnostic value of laboratory methods for urogenital chlamydiosis in humans and monkeys // FEMS 2009, 3rd Congress of European Microbiologists. Gothenburg, Sweden, June 28-Juli 2, 2009.

41. , , А., , - Роль врождённого иммунитета и микроорганизмов биотопов слизистых оболочек урогенитального тракта женщин в патогенезе хламидийной инфекции // Сеченовский Вестник.- 2010.-№ 2 (2).-С. 64-69.

42. , , А., , Воропаева резистентность слизистых цервикального канала как неотъемлемая составляющая местного иммунитета // Иммунология.-2011.-Том 32, № 1.-С. 11-15.

43. , , А., , - Микробиотоп влагалища и его патогенетическая роль при уреаплазмозе и хламидиозе // Астраханский медицинский журнал. – 2011 – Т. 6, № 1. – С. 137-142.

44. А., , Нарушение микробиоценозов у детей: многоцентровое исследование. Сообщение II. Микробиоценоз и дисбактериоз влагалища у девочек // Астраханский медицинский журнал. – 2011 – Т. 6, № 1. – С. 222-225.

Патенты РФ на изобретение

45. Пат. № 000 Российская Федерация МПК G 01 N 33/48. - Способ оценки микробиоценоза влагалища / , , , ; заявитель и патентообладатель ГУ МНИИЭМ им. Минздрава РФ.-№ ; заявл. 27.04.2004; зарег. 10.04.2005.

46. Пат. № 000 Российская Федерация. - Способ диагностики хронического урогенитального хламидиоза / , , , , , , ; заявитель и патентообладатель ФГУН МНИИЭМ им. Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. – № ; заявл. 25.06.2007; опубл. 27.06.2008., Бюл. № 18.-3 с.

47. Пат. № 000 Российская Федерация МПК C 12 Q 1/68. Способ прогнозирования манифестной или стертой формы хламидийной инфекции человека или обезьян и набор для его осуществления / , , , , , , ; заявитель и патентообладатель ФГУН МНИИЭМ им. Роспотребнадзора.-№ /13; заявл. 26.12.2008; зарег. во » 10.04.2010.

48. Пат. № 000 Российская Федерация МПК C 12 Q 1/68. Способ диагностики хламидийной инфекции человека или обезьян и набор для его осуществления / , , , , , , ; заявитель и патентообладатель ФГУН МНИИЭМ им. Роспотребнадзора.-№ /13; заявл. 26.12.2008; зарег. во » 10.04.2010.

Список сокращений

ВЗОМТ – воспалительные заболевания органов малого таза

ВИЧ – вирус иммунодефицита человека

ВПГ – вирус простого герпеса

ВПЧ – вирус папилломы человека

ИППП – инфекции, передаваемые половым путем

ИФА – иммуноферментный анализ

КИП – комплексный иммуноглобулиновый препарат

КОЕ – колониеобразующая единица

КР – колонизационная резистентность

КС – антитела - комплементсвязывающие антитела

НГУ – негонококковый уретрит

ПЦР – полимеразная цепная реакция

РСК – реакция связывания комплемента

УЗИ – ультразвуковое исследование

УПМ – условно-патогенная микрофлора

ЦМВ – цитомегаловирус

ЦОЕ – цветообразующая единица

Ig – иммуноглобулин

IgA – иммуноглобулин A

IgG – иммуноглобулин G

IgM – иммуноглобулин M

sc – свободный секреторный компонент

sIgA – секреторный иммуноглобулин А

УГХ – урогенитальный хламидиоз.

ИППП – инфекции, передаваемые половым путём.

УГТ – урогенитальный тракт.

TLR (Toll-like receptor) – Toll-подобные рецепторы.

ЭТ – элементарные тельца.

РТ – ретикулярные тельца.

ПР – промежуточное тельце.

Цк – цервикальный канал.

Ур – уретра.

Вл – влагалище.

ЦC – цервикальный секрет.

IL – интерлейкин.

TNF-α – фактор некроза опухолей альфа.

IFN -α – интерферон альфа.

IFN -γ –интерферон гамма.

GM-CSF – гранулоцит макрофаг колониестимулирующий фактор.

PAMP – консервативные молекулярные структуры.

PRR – образ распознающие рецепторы.

НК – нормальные клетки-киллеры.

DC – дендритные клетки.

CD – клеточные рецепторы.

РИФ – реакция прямой иммунофлуоресценции.

РИД – радиальная иммунодиффузия по Манчини.

Ат – антитела.

DNA – дезоксирибонуклеиновая кислота.

LPS – липополисахарид.

ЛЦР – лигазная цепная реакция.

НИФ – реакция непрямой иммунофлуоресценции.

ПДРФ – полиморфизм длины рестрикционных фрагментов.

ПИФ – реакция прямой иммунофлуоресценции.

РНГА – реакция непрямой гемагглютинации.

RNA – рибонуклеиновая кислота.

rRNA – рибосомальная РНК.

МОМР – (major outer membrane protein) – основной белок наружной мембраны.

ORF – (open reading frame) – открытая рамка считывания.