На правах рукописи
МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ РЕАКЦИИ МАТКИ
НА ЭСТРОГЕНЫ В УСЛОВИЯХ ПОВЫШЕНИЯ АКТИВНОСТИ ИНСУЛИНЗАВИСИМОГО РЕГУЛЯТОРНОГО ПУТИ
03.03.04 - клеточная биология, цитология, гистология
Автореферат
диссертации на соискание ученой степени
кандидата медицинских наук
Казань - 2011
Работа выполнена в ФГОУ ВПО «Чувашский государственный университет имени » Министерства образования и науки Российской Федерации
Научный руководитель: доктор медицинских наук, профессор
Официальные оппоненты: доктор медицинских наук, профессор
доктор медицинских наук, профессор
Ведущая организация: ГОУ ВПО «Российский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию».
Защита диссертации состоится «____» _____________________ 2011 г.
в «___» часов на заседании диссертационного совета Д 208.034.01 при ГОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет» ( Казань, ул. Бутлерова, 49).
С диссертацией можно ознакомиться в научной библиотеке Казанского государственного медицинского университета ( Казань, корпус Б).
Автореферат разослан «____»____________________2011 г.
Ученый секретарь
диссертационного совета,
доктор медицинских наук, профессор
Введение
Актуальность работы
Эстрогеновые гормоны вызывают существенные изменения в морфологическом и функциональном состоянии матки. Одна из главных сторон действия эстрогенов на матку заключается в активировании пролиферации во всех структурах, что достигается путем уменьшения длительности всех периодов клеточного цикла и увеличения доли клеток, проходящих клеточный цикл (, 1983; Maruyama T., Yoshimura Y., 2008). Другая важная сторона, особенно хронического, действия эстрогенов на матку заключается в морфогенетических изменениях (, 2000; , 2008; Gunin A. G. и др., 2001. Horn L. C. и др., 2007).
Совершенно очевидно, что все стороны действия эстрогенов в матке, включая морфогенетические эффекты, должны регулироваться, чтобы сохранялась нормальная структура и не возникала злокачественная трансформация (Akhmedkhanov A. и др., 2001; Gunin A. G. и др., 2005). Направленность эстрогениндуцированных морфологических реакций может изменяться при воздействии эстрогенов совместно с другими гормональными и негормональными факторами (, 1983; , 2007).
Рядом исследований установлено участие инсулинзависимого пути в процессах, сходных с теми, которые индуцируют эстрогены в матке, то есть пролиферация, рост, морфогенез тканей, а также злокачественная трансформация (Mingo-Sion A. M. и др., 2005). Более того, обнаружены взаимосвязи между внутриклеточным путем трансдукции эффектов эстрогенов и инсулинозависимым регуляторным путем в матке и других органах (Richards R. G. и др., 2001; Klotz D. M. и др., 2002; McCampbell A. S. и др., 2006; Eertmans F. и др., 2007; Koricanac G. и др., 2007). Эстрогеновые гормоны оказывают активирующее действие на эффекты инсулиноподобного фактора роста-1 по стимулированию пролиферации эпителиальных клеток и клеток стромы эндометрия (Klotz D. M.,и др., 2000; Inoue A. и др., 2005; Zhu L., Pollard J. W., 2007). Однако, работ, посвященных изучению значения инсулинзависимого пути в реализации морфогенетических эффектов эстрогеновых гормонов в матке нет в мировой литературе. Тем более, внутриклеточные молекулярные механизмы потенциального участия инсулинзависимого регуляторного пути в эстрогензависимых процессах в матке абсолютно неизвестны.
Следовательно, исследование пролиферации и морфологических сдвигов в матке в условиях активирования инсулинзависимого регуляторного пути является актуальной научной задачей в морфологии, имеющей своей целью выяснение не только морфологических характеристик данных процессов, но и установления возможных механизмов действия эстрогенов и инсулинзависимого регуляторного каскада в матке, которые помогут расширить наши представления о возникновении, течении и предупреждении эстроген-зависимых злокачественных опухолей. Следует отметить, что по современным прогнозам заболеваемость и смертность от рака эндометрия будет возрастать (Olsen A. H. и др., 2008; Smith B. D. и др., 2009), что делает настоящее исследование еще более актуальным.
Цель и задачи исследования
Целью настоящей работы явилось изучение морфологии, пролиферативной активности структур матки мышей в условиях введения эстрогеновых гормонов на фоне повышения активности инсулинзависимой регуляторной системы.
В соответствии с целью были определены следующие задачи:
1. Исследовать общее строение матки овариэктомированных мышей при хроническом воздействии эстрогенов на фоне активации инсулинзависимой регуляторной системы путем введения метформина и манинила.
2. Исследовать пролиферативные процессы в матке овариэктомированных мышей при хроническом воздействии эстрогенов на фоне повышенной активности инсулинзависимого регуляторного пути, вызванной введением метформина и манинила.
3. Исследовать плотность рецепторов эстрогенов и прогестерона в матке мышей при хроническом воздействии эстрадиола в условиях повышенной активности инсулинзависимого регуляторного пути, вызванной введением метформина и манинила.
4. Исследовать уровень β-катенина и гликоген синтазы киназы-3β в матке мышей при хроническом воздействии эстрогенов на фоне активации инсулинзависимой регуляторной системы, обусловленной введением метформина и манинила.
Научная новизна
В проведенных исследованиях впервые охарактеризованы изменения пролиферативных процессов и строения матки при хроническом влиянии эстрогенов в условиях повышения активности инсулинзависимой регуляторной системы. В условиях введения эстрадиола на фоне метформина происходит торможение пролиферации, уменьшение развития гиперпластических процессов и повышение уровня эстрогеновых и прогестероновых рецепторов в матке. Под влиянием манинила не наблюдается столь выраженных изменений в пролиферации и развитии гиперплазии в матке по сравнению с эффектом метформина.
Впервые изучено содержание эстрогеновых рецепторов-α, прогестероновых рецепторов, а также уровень β-катенина и гликоген синтазы киназы-3β в матке при совместном хроническом введении эстрогенов и метформина или манинила. При введении эстрадиола на фоне метформина происходит повышение уровня эстрогеновых и прогестероновых рецепторов, β-катенина и гликоген синтазы киназы-3β в матке. Действие манинила проявляется в менее выраженном возрастании плотности эстрогеновых и прогестероновых рецепторов в матке.
Впервые показано различие в действии метформина и манинила - разных групп препаратов, активирующих инсулинзависиый регуляторный путь, на изменение эстроген-индуцированной пролиферации, морфологического строения, изменения уровня эстрогеновых рецепторов-α, прогестероновых рецепторов, β-катенина и гликоген синтазы киназы-3β. Метформин оказывает существенный ингибирующий эффект на пролиферацию и развитие гиперпластических процессов, а манинил не имеет подобного действия.
Научно-практическая ценность
Практическая значимость настоящей работы заключается в использовании полученных данных о влиянии инсулинзависимого регуляторного пути на пролиферацию и морфологические изменения при проведении научных исследований в морфологии, эндокринологии, патологической анатомии, акушерстве и гинекологии, онкологии и при изучении этиологии, патогенеза и лечения различных видов эстрогензависимой патологии, такой как рак тела матки, фибромиоматоз матки и других предраковых процессов женских гениталий. Кроме того, полученные данные будут полезны для изучения патологии женской репродуктивной системы при довольно часто встречающихся состояниях, связанных с нарушениями действия инсулина (сахарный диабет, инсулиновая резистентность, метаболический синдром). Результаты настоящего исследования следует также учитывать в разработке лечения эстроген-индуцированных предраковых процессов, а также онкологических больных с различными гормонально-зависимыми опухолями, у больных сахарным диабетом. Более того, фармакологические препараты метформин и манинил многие годы широко применяются в медицине, поэтому необходимо знать и учитывать при их использовании выявленные в настоящем исследовании эффекты по моделированию действия эстрогенов в матке.
Результаты данной научной работы существенно расширяют теоретические знания о формировании морфологических перестроек, возникающих в матке при изменении действия инсулина, а также возникающих при этом изменений рецепторного аппарата матки.
Другая сторона практического использования полученных результатов - использование данных в программах кафедр гистологии, патологической анатомии, акушерства и гинекологии, физиологии и эндокринологии при обучении студентов медицинских вузов.
Достоверность полученных данных
Достоверность полученных данных достигнута использованием большого объема экспериментальных исследований, современных количественных морфологических методов, статистической обработки научных данных, а также применением детально проработанных экспериментальных моделей.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту:
1. Повышение активности инсулинзависимого регуляторного пути на фоне воздействия эстрогенов тормозит морфологические изменения и пролиферативную активность в покровном эпителии, железах, клетках стромы и гладкомышечных клетках матки.
2. Изменения в морфологии и пролиферации, наблюдаемые в структурах матки мышей при активировании инсулинзависимого регуляторного пути, осуществляются при участии рецепторов эстрогенов-α, рецепторов прогестерона и WNT-зависимого внутриклеточного сигнального каскада.
Личный вклад соискателя
Все приведенные в работе данные получены при личном участии соискателя на всех этапах работы, начиная от составления плана и постановки задач исследования, выбора методов исследования, проведение экспериментов, обработку экспериментальных данных и заканчивая оформлением публикаций. Статистическая обработка, подготовка иллюстративного материала были выполнены лично соискателем. Текст диссертации также написан лично соискателем.
Сведения об апробации результатов диссертации
Результаты исследования по теме диссертации доложены и обсуждены на совместном заседании кафедр гистологии, цитологии и эмбриологии, акушерства и гинекологии Чувашского государственного университета. Результаты работы, отражающие основные положения диссертации, доложены на научных конференциях Чувашского государственного университета, на V Всероссийской конференции с международным участием «Механизмы функционирования висцеральных систем» (Санкт-Петербург, 16-19 октября 2007), а также опубликованы в 4-х статьях в журнале "Проблемы репродукции", входящим в список журналов, рекомендованных ВАК для опубликования результатов диссертационных исследований. Исследования, явившиеся основой диссертации, поддержаны грантом РФФИ ().
Публикации материалов исследования
По материалам диссертации опубликовано 6 печатных работы. Четыре статьи опубликованы в журнале, входящем в перечень ведущих рецензируемых научных журналов и изданий ВАК, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертации на соискание ученой степени кандидата наук. Общий объём публикаций – 1,62 условно-печатных листа, в т. ч. авторский вклад – 0,97 условно-печатных листов.
Внедрение результатов работы
Полученные в работе данные используются при чтении лекций на кафедрах цитологии, эмбриологии и гистологии, акушерства и гинекологии, функциональной и лабораторной диагностики ФГОУ ВПО «Чувашский государственный университет имени ». Кроме того, результаты исследования внедрены в лечебно-диагностический процесс ГУЗ «Президентский перинатальный центр» Министерства Здравоохранения и Социального Развития Чувашской Республики, ГУЗ «Республиканская клиническая больница» Министерства Здравоохранения и Социального Развития Чувашской Республики (г. Чебоксары).
Структура и объем диссертации
Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания клинического материала и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов. Библиографический указатель включает 23 отечественных и 232 зарубежных источников. Работа изложена на 142 страницах машинописного текста, иллюстрирована 32 рисунками.
ОБЪЕКТ и методы исследования
Эксперименты проведены на половозрелых лабораторных мышах CFW. Эксперименты выполнялись через 10 дней после двусторонней овариэктомии. Проведение экспериментов одобрено этическим комитетом Чувашского госуниверситета. В соответствии с целями и задачами настоящего исследования было сформировано 2 экспериментальных направления.
Первое направление посвящено исследованию изменений в матке при действии эстрадиола на фоне активации инсулинозависимого регуляторного пути с применением препарата из группы бигуандиов - метформина: Группа мышей 1.1 (n=24) получала эстрадиола дипропионат и метформин. Группа животных 1.2 (n=23) получала только иньекции эстрадиола дипропионата. Группа 1.3. (n=5) получала иньекции оливкового масла и метформин. Группа мышей 1.4 (n=5) получала только иньекции оливкового масла.
Второе направление имело целью изучить изменения в матке при действии эстрадиола на фоне активирования инсулинозависимого регуляторного пути с применением препарата из группы производных сульфонилмочевины - манинила: Группа мышей 2.1 (n=21) получала эстрадиола дипропионат и манинил. Группа животных 2.2 (n=23) получала иньекции только эстрадиола дипропионата. Группа 2.3 (n=5) получала иньекции оливкового масла и манинил. Группа мышей 2.4 (n=5) получала только иньекции оливкового масла.
Эстрадиола дипропионат (Sigma Chemical Co., США) в виде масляного раствора на оливковом масле вводился подкожно в дозе 4 мкг/100 г 1 раз в неделю. Стерильное оливковое масло вводилось внутримышечно в объеме 0,1 мл. Метформин (Berlin-Chemie, Германия) вводился путем добавления в питьевую воду в концентрации 1000 мг/л. Манинил (Berlin-Chemie, Германия) добавлялся в питьевую воду в концентрации 100 мг/л. Животные 2-й и 4-ой контрольных групп в обоих экспериментальных направлениях получали обычную питьевую воду без дополнительных препаратов. Все воздействия продолжались в течение 30 дней. Через 48 часов после последней инъекции эстрадиола у животных извлекалась матка. Органы тотчас взвешивались и затем срединные отделы рогов матки помещались в модифицированный фиксатор Буэна (Gunin A. и др., 2000). Материал обезвоживался и заливался в парафин обычным способом. Затем изготовлялись поперечные срезы толщиной 5-7 мкм.
Эстроген-индуцированные изменения в матке оценивались по следующим критериям: общая морфологическая картина, митотический индекс, бромодезоксиуридин (BrdU)-индекс, плотность эстрогеновых рецепторов-α и прогестероновых рецепторов, а также содержание β-катенина и гликоген синтазы киназы-3β.
Оценка общего строения матки осуществлялась в препаратах, окрашенных железным гематоксилином по Вейгерту ( 1990). Для оценки морфологических изменений в эндометрии анализировались тип желез и тип железистого эпителия (Gunin А. и др., 2001). Для анализа гистологических изменений в матке использовалась классификация Scully R. E. (1994). Для оценки пролиферативных процессов подсчитывались процент митотически делящихся клеток и процент клеток, положительно окрашенных на BrdU (стрептавидин-биотиновый иммуногистохимический метод). Для выявления митозов срезы окрашивались железным гематоксилином по Вейгерту ( 1990). Эстрогеновые рецепторы-α, прогестероновые рецепторы, β-катенин гликоген синтаза киназа-3β выявлялись с помощью непрямого иммуногистохимического метода. Количественная оценка уровня эстрогеновых рецепторов-α, прогестероновых рецепторов, а также содержание β-катенина и гликоген синтазы киназы-3β осуществлялась путем определения оптической плотности (Gunin A. G. и др., 2002, 2005).
По каждой группе данных рассчитывались средние арифметические значения (M) и их стандартные ошибки (m). Достоверность отличий оценивалась с помощью критериев Стьюдента, Вилкоксона-Манна-Уитни, χ2.
Результаты исследования и их обсуждение
ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗМЕНЕНИЙ В МАТКЕ ПРИ СОВМЕСТНОМ
ВОЗДЕЙСТВИИ ЭСТРАДИОЛА И МЕТФОРМИНА
Воздействие метформина на фоне введения эстрадиола приводило к уменьшению массы матки по сравнению с данными животных, получавших только эстрадиол. Воздействие метформина не приводило к изменению массы матки в группах мышей, получавших инъекции оливкового масла.
В результате совместного действия эстрогенов и метформина (группа 1.1) наблюдалось снижение выявляемости желез с дочерними железами и конгломератов желез по сравнению с контрольной группой, получавшей эстрадиол без метформина (группа 1.2). Количество желез с атипичным многослойным эпителием была значительно меньше, а численность желез с нормальным призматическим эпителием была больше при сочетанном применении эстрадиола и метформина (Рис. 1). В эндометрии животных с введением эстрадиола на фоне метформина комплексная гиперплазия выявляется в 18,5% случаев, а атипическая — в 3,7% случаев. (Рис. 1).
В условиях сочетанного введения эстрадиола и метформина (группа 1.1) митозы также были обнаружены во всех структурах матки. Подсчет митозов показал, что их численность стала меньше в покровном эпителии, эпителии желез, клетках стромы эндометрия и миоцитах миометрия (Рис. 2). Сочетанное введение метформина и эстрадиола (группа 1.1) приводило к значительному уменьшению выявляемости BrdU-положительных клеток во всех структурах матки по сравнению с данными контрольных животных (группа 1.2). (Рис. 2).
При введении эстрадиола на фоне воздействия метформином (группа 1.1) уровень эстрогеновых рецепторов-α в покровном эпителии, эпителии желез, клетках стромы и миометрии были значительно выше по сравнению с группами мышей, получавших только эстрадиол (группа 1.2) (Рис. 3). Степень увеличения содержания эстрогеновых рецепторов под действием метформина в эпителии эндометрия составила 33%, в эпителии желез - 31%, в клетках стромы - 26%, в миоцитах миометрия - 19%. Статистический анализ показывает высокую достоверность влияния метформина на изменение уровня эстрогеновых рецепторов-α (Рис. 3).
Рис. 1. Процентное соотношение типов желез, типов эпителия желез, патоморфологические изменения в матке мышей, получавших эстрадиол и метформин, эстрадиол и манинил, в сравнении с данными контрольных животных, получавших только эстрадиол в течение 1 месяца. Н — нормальные железы; К — кистозно-расширенные железы; Д — железы с дочерними железами; Г — конгломераты желез. 1 — однослойный эпителий; 2 — многорядный эпителий; 3 — атипичный многослойный эпителий. АГ — атипическая гиперплазия; КГ — комплексная гиперплазия; ПГ — простая гиперплазия; П — пролиферативный эндометрий. * p<0,001 — критерий χ2.
У мышей, получавших эстрадиол и метформин (группа 1.1), наблюдалось повышение уровня прогестероновых рецепторов в эпителии эндометрия, эпителии желез, клетках стромы и миоцитах миометрия по сравнению с группой животных, получавших только эстрадиол (группа 1.2). Степень возрастания уровня прогестероновых рецепторов в эпителии эндометрия составила 37%, в эпителии желез - 48%, в клетках стромы - 24% и в миоцитах - 23%. Статистический анализ демонстрирует достоверные отличия в уровне прогестероновых рецепторов между этими группами.
Рис. 2. Количество митозов и бромодезоксиуридин-положительных клеток в структурах матки мышей, получавших эстрадиол и метформин, эстрадиол и манинил, в сравнении с данными контрольных животных, получавших только эстрадиол в течение 1 месяца (М±m). * p<0,05 — t-критерий Стьюдента.
В условиях введения эстрогеновых гормонов метформин приводил к существенному возрастанию содержания β-катенина в покровном эпителии эндометрия и эпителии желез. В эпителии эндометрия увеличение уровня β-катенина составило 38%, а в эпителии желез - 32%. Отличия между группами являлись статистически достоверными (р<0,05) по обеим изученным структурам.
Рис. 3. Содержание эстрогеновых и прогестероновых рецепторов в структурах матки мышей, получавших эстрадиол и метформин, эстрадиол и манинил, в сравнении с данными контрольных животных, получавших только эстрадиол в течение 1 месяца (М±m). * p<0,05 — t-критерий Стьюдента.
Исследование препаратов матки мышей с сочетанным воздействием эстрадиола и метформина (группа 1.1), обработанных иммуногистохимически для выявления гликоген синтазы киназы-3β, выявило более интенсивное окрашивание в эпителии желез и эпителии эндометрия по сравнению с данными животных, получавших эстрадиол без метформина (группа 1.2).
ХАРАКТЕРИСТИКА ИЗМЕНЕНИЙ В МАТКЕ
ПРИ СОВМЕСТНОМ ВОЗДЕЙСТВИИ ЭСТРАДИОЛА И МАНИНИЛА
Воздействие манинила на фоне введения эстрадиола не оказывало влияния на массу матки по сравнению с данными животных, получавших только эстрадиол.
В результате совместного действия эстрогенов и манинила (группа 2.1) в эндометрии наблюдалось большое количество желез с дочерними железами и конгломераты желез (Рис. 1). Многие железы имели многорядный и атипический многослойный эпителий (Рис. 1). Данные подсчетов показывают, что количество атипичных желез и желез с атипичным многослойным эпителием в матке животных с введением эстрадиола и манинила (группа 2.1) существенно не отличалось от группы с введением эстрадиола (группа 2.2) (Рис. 1). В эндометрии животных с введением эстрадиола на фоне манинила комплексная гиперплазия выявляется в 31,8% случаев, а атипическая — в 36,4% случаев.
В условиях сочетанного введения эстрадиола и манинила (группа 1.1) митозы также были обнаружены во всех структурах матки. Однако численность митозов была достоверно (р<0,05) снижена в покровном эпителии и эпителии желез по сравнению с данными контроля (группа 2.2). В клетках стромы и миоцитах миометрия наблюдалось незначительное и недостоверное снижение численности делящихся клеток (Рис. 2). Сочетанное введение эстрадиола и манинила (группа 2.1) практически не изменяло выявляемость BrdU-положительных клеток во всех структурах матки за исключением миоцитов миометрия, где обнаружено достоверное (р<0,05) снижение численности BrdU-позитивных клеток (Рис. 2).
В отличие от метформина, которые существенно угнетал пролиферацию, воздействие манинила на фоне введения эстрогенов (группа 2.1) приводило к незначительному и в ряде случаев недостоверному уменьшению пролиферативной активности в эпителии эндометрия, желез, клетках стромы и миоцитах (Рис. 2).
При введении эстрадиола на фоне воздействия манинила (группа 2.1) уровень эстрогеновых рецепторов-α в покровном эпителии, эпителии желез, клетках стромы и миометрии выше по сравнению с группами мышей, получавших только эстрадиол (группа 2.2) (Рис. 3). Степень увеличения содержания эстрогеновых рецепторов под действием манинила в эпителии эндометрия составила 34%, в эпителии желез - 23%, в клетках стромы - 11%, в миоцитах миометрия 19% (Рис. 3).
У мышей с воздействиями эстрадиола и манинила (группа 2.1) отмечено достоверное (р<0,05) повышение содержания прогестероновых рецепторов в эпителии эндометрия, эпителии желез, клетках стромы и миоцитах миометрия по сравнению с группой животных, получавших только эстрадиол (группа 2.2) (Рис.3). В условиях введения эстрогеновых гормонов и манинила содержание β-катенина и гликоген синтазы киназы-3β в покровном эпителии эндометрия и эпителии желез практически не отличалась от таковой при введении только эстрогенов.
Таким образом, исследование показало, что в условиях активирования инсулинзависимого регуляторного пути при введении метформина происходят существенные изменения в действии эстрогенов на матку. Эти изменения заключаются в торможении пролиферации, уменьшении развития гиперпластических процессов и повышении уровня эстрогеновых и прогестероновых рецепторов, β-катенина и гликоген синтазы киназы-3β в матке. Активирование инсулинзависимого пути путем введения манинила также приводит к изменениям в действии эстрогенов на матку. Однако под влиянием манинила не наблюдается столь выраженных изменений в пролиферации, отсутствуют эффекты по влиянию на морфологию матки и содержание β-катенина и гликоген синтазы киназы-3β. Действие манинила в основном проявляется в возрастании плотности эстрогеновых и прогестероновых рецепторов в матке. Отличия в химической природе и механизмах действия метформина и манинила приводят к неодинаковой активации разных звеньев инсулинзависимого пути, что обуславливает отличия в их действии на эстрогензависимые события в матке. Анализ результатов позволяет сделать заключение о том, что эффекты метформина на эстрогениндуцированные процессы в матке обусловлены его влиянием на механизм действия эстрогенов путем возрастания плотности эстрогеновых рецепторов. Действие манинила на эстрогензависимые процессы в матке также обусловлены воздействием этого препарата на механизм действия эстрогенов путем возрастания уровня рецепторов эстрогенов и путем воздействия на пострецепторный уровень трансдукции сигнала эстрогеновых гормонов. Изменения в морфологии матки, вызываемые эстрогенами и изменяемые активированной работой инсулинзависимого пути, также опосредованы β-катенином и гликоген синтазой киназой-3β.
ВЫВОДЫ
1. В покровном эпителии, эпителии желез, клетках стромы эндометрия и миоцитах миометрия овариэктомированных мышей, которым вводился эстрадиол совместно с метформином в течение месяца, наблюдается угнетение пролиферативной активности, увеличение процента желез с нормальной структурой с нормальным типом эпителия по сравнению с данными животных с введением эстрадиола без метформина.
При введении эстрадиола на фоне манинила в течение 1 месяца наблюдается незначительное снижение пролиферативной активности и отсутствуют изменения в общем строении матки по сравнению с данными мышей, которым вводился эстрадиол без манинила.
2. В эпителии эндометрия, эпителии желез, клетках стромы эндометрия и миоцитах миометрия мышей происходит возрастание экспрессии α-эстрогеновых и прогестероновых рецепторов в условиях сочетанного введения эстрадиола и метформина или манинила.
3. Экспрессия β-катенина и гликоген синтазы киназы-3β существенно возрастала в покровном и железистом эпителии эндометрия мышей, которым вводился эстрадиол и метформин. Экспрессия β-катенина и гликоген синтазы киназы-3β в покровном эпителии и эпителии желез эндометрия не изменялась в условиях сочетанного воздействия эстрадиола и манинила.
4. Отсутствие эффектов метформина и манинила на пролиферацию, экспрессию рецепторов половых гормонов, β-катенина и гликоген синтазы киназы-3β в матке мышей, которым не осуществлялось введения эстрадиола, свидетельствует о том, что действие метформина и манинила на изучаемые параметры осуществляется путем их влияния на механизм действия эстрогеновых гормонов.
5. Эффекты метформина на эстрогениндуцированные процессы в матке обусловлены увеличением содержания эстрогеновых рецепторов. Действие манинила на эстрогензависимые процессы в матке опосредованы возрастанием уровня рецепторов эстрогенов и воздействием на пострецепторный уровень трансдукции сигнала эстрогеновых гормонов. Изменения в строении матки, вызываемые эстрогенами и изменяемые активированием инсулинзависимого пути, также осуществляются с вовлечением β-катенина и гликоген синтазы киназы-3β.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
Результаты работы позволяют рекомендовать включать в группу риска по развитию гиперпластических процессов в эндометрии больных с нарушениями синтеза, секреции и трансдукции сигнала инсулина (сахарный диабет, инсулиновая резистентность, нарушения толерантности к глюкозе). Работа позволяет использовать метформин в комплексном лечении гиперпластических состояний эндометрия.
Список научных работ, опубликованных по теме диссертации
1. Самойлова система в регуляции действия эстрадиола на матку / , , и др. // V Всероссийская конференция с международным участием, посвященная 100-летию со дня рождения академика , «Механизмы функционирования висцеральных систем», Санкт-ПетербургС. 282-283.
2. Матвеева в реализации пролиферативного и морфогенетического действия эстрадиола на матку / , , и др. // Проблемы репродукцииТ. 13 №6.- С. 45-50.
3. Гунин система в реализации пролиферативного и морфогенетического действия эстрадиола на матку / , , // Проблемы репродукцииТ. 14 № 1. - С. 46-51.
4. Емельянов хронического воздействия экзогенных и эндогенных глюкокортикоидов на экспрессию эстрогеновых и прогестероновых рецепторов в матке / , , и др. // Проблемы репродукцииТ 14. №2. - С. 36-39.
5. Гунин эффекты эстрадиола в матке в условиях блокады фосфатидилинозитол-3-киназы / , , и др. // Проблемы репродукцииТ 14. №4. - С. 50-55.
6. Винокур действия инсулинзависимого пути на развитие гиперплазии эндометрия / , // Клиническая и экспериментальная медицина: Сборник научных трудов. – 2010. - С. 31-32.
