Биологическая химия (стр. 3 )

Измерить оптическую плотность опытной и калибровочной проб против контрольной пробы в кювете с толщиной поглощающего слоя 5 мм при длине волны 500 нм (зеленый светофильтр).

Расчет. Содержание холестерина в сыворотке крови рассчитывается по формуле:

С = (Е опытн. пробы : Е калибратора) ∙ 5,17 (ммоль/л),

где

С - концентрация холестерина в исследуемом образце (ммоль/л),

Е опытной пробы - оптическая плотность исследуемого образца,

Е калибратора - оптическая плотность калибратора,

5,17 ммоль/л - содержание общего холестерина в калибраторе.

Нормальные показатели - до 5,17 ммоль/л

Пограничные показатели - 5,17 - 6,5 ммоль/л

Патологические показатели - выше 6,5 ммоль/л

Результаты анализа:

Выводы:

Дата: Подпись преподавателя:

ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ

Контрольная работа. Обмен и функции липидов

Вопросы к контрольной работе

1. Резервные липиды (жиры) и протоплазматические липиды в организме человека. Триацилглицериды (жиры). Жирные кислоты, характерные для ТАГ человека.

2. Растворимость жирных кислот и ТАГ: эмульсии, эмульгаторы.

3. Эссенциальные жирные кислоты как предшественники синтеза эйкозаноидов. Незаменимые факторы питания липидной природы.

4. Основные фосфолипиды тканей человека: глицерофосфолипиды - фосфатидилхолин (лецитин), фосфатидилэтаноламин (кефалин), фосфатидилсерин.

5. Основные гликолипиды тканей человека: гликолипиды, сфингофосфолипиды.

6. Стероиды. Строение и распространение холестерина. Холестерин как предшественник ряда других стероидов.

7. Биологические мембраны. Липидный состав мембран. Белки мембран. Каталитические мембранные рецепторы. Возрастные особенности состава, структуры и функций мембран. Транспорт веществ через мембраны.

8. Состав и строение транспортных липопротеинов крови.

9. Обмен жиров. Пищевые жиры и их переваривание. Всасывание продуктов пищеварения. Нарушение пищеварения и всасывания.

10. Ресинтез триацилглицеринов в стенке кишечника. Образование хиломикронов и транспорт жиров.

11. Биосинтез жиров из углеводов в печени, упаковка в ЛОПП и транспорт. Использование жиров, включенных в транспортные липопротеиды, липопротеин-липазы.

12. Обмен жирных кислот - β-окисление жирных кислот. Карнитинацилтрансфераза и транспорт жирных кислот в митохондрии. Физиологическое значение катаболизма жирных кислот.

13. Биосинтез жирных кислот. Пальмитиновая кислота как основной продукт действия синтетазы жирных кислот. Представление о путях образования жирных кислот с более длинной углеродной цепью и ненасыщенных жирных кислот.

14. Линолевая и линоленовая кислоты - незаменимый пищевой фактор. Биосинтез простагландинов.

15. Кетоновые тела. Биосинтез и использование ацетоуксусной кислоты. Кетоз.

16. Обмен холестерина. Представление о биосинтезе холестерина. Превращение холестерина в желчные кислоты. Выделение желчных кислот и холестерина из организма. Гиперхолестеринемия и ее причины. Механизм образования атеросклеротических бляшек. Гиперхолестеринемия как фактор риска атеросклероза

17. Резервирование и мобилизация жиров в жировой ткани; регуляция мобилизации адреналином: каскадный механизм активации липазы.

18. Физиологическая роль резервирования и мобилизации жиров. Нарушение этих процессов при ожирении.

19. Регуляция и патология жирового обмена. Роль печени в жировом обмене.

УЭМ 6 ОБМЕН БЕЛКОВ

ЛАБОРАТОРНОЕ ЗАНЯТИЕ

Тема: Обмен простых белков. Химический состав желудочного сока

Задания для подготовки к занятию

1.  Напишите формулу пептида Лей-Тир-Три-Лиз-Про-Вал.

2.  Укажите, какие связи в данном пептиде будут расщепляться следующими протеазами (над соответствующей связью поставьте соответствующую букву): А – пепсин; Б – трипсин; В – химотрипсин; Г – карбоксипептидаза; Д – аминопептидаза.

3.  Распределите данные выше ферменты на 2 группы:

эндопептидазы	экзопептидазы

4. Напишите функции соляной кислоты в желудке:

5.  Подберите к каждому из перечисленных ферментов место его синтеза

А. дипептидаза	1. слизистая оболочка желудка
Б. пепсин	2. поджелудочная железа
В. трипсин	3. слизистая оболочка кишечника
Г. карбоксипептидаза
Д. аминопептидаза

6.  Подберите к перечисленным проферментам соответствующие активаторы:

А. химотрипсиноген	1. трипсин
Б. пепсиноген	2. энтеропептидаза
В. трипсиноген	3. соляная кислота
Г. проэластаза	4. пепсин

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 13

Тема: Определение кислотности желудочного сока

Цель: Научиться определять свободную и связанную НСl и общую кислотность желудочного сока (ЖС), изучить значение этих показателей для диагностики различных видов патологии (гипоацидис, гиперацидис, ахлоргидрия, ахилия) возможные при гастритах, раке желудка, злокачественном малокровии.

Принцип метода: В состав ЖС входят: вода, белки, ферменты (гастриксин, пепсин, липаза), соляная кислота, муцин, хлористый натрий, кислые фосфорнокислые соли и другие вещества. Соляная кислота обладает дезинфицирующим действием: в ее присутствии погибает большинство бактерий. При пониженной концентрации или полном отсутствии соляной кислоты в желудке развиваются гнилостные процессы и процессы брожения, и накапливаются органические кислоты: молочная, масляная, уксусная и др.

Опыт 1. Качественный анализ желудочного сока.

1. Определение реакции ЖС. Одним из факторов, определяющих скорость переваривания белков в желудке, является кислотность ЖС. 1 каплю профильтрованного ЖС наносят стеклянной палочкой на синюю лакмусовую бумажку. В присутствии кислореагирующих веществ лакмусовая бумажка приобретает красный цвет. При некоторых заболеваниях в ЖС могут полностью отсутствовать кислореагирующие вещества.

Результат анализа:

Вывод:

2. Проба на свободную соляную кислоту. 1 каплю профильтрованного ЖС наносят на красную бумажку «Конго». В присутствии свободной соляной кислоты бумажка приобретает синий цвет.

Результат анализа:

Вывод:

3. Проба на молочную кислоту. Реакция на молочную кислоту основана на ее способности образовывать с солями железа (III) лактат железа (III), окрашенный в желто-зеленый цвет.

К 20 каплям 1 % раствора фенола добавляют 1-2 капли 1 % раствора хлорного железа. Получается фенолят железа, окрашенный в фиолетовый цвет. В пробирку с реактивом добавляют по каплям ЖС, содержащий молочную кислоту. В присутствии молочной кислоты синяя окраска переходит в желто-зеленую за счет образования молочнокислого железа. При одновременном присутствии соляной кислоты жидкость обесцвечивается.

Результат анализа:

Вывод:

4. Реакция на кровь с бензидином. В пробирку отмеривают 1 мл ЖС, добавляют 4-5 капель 0,2 % спиртового раствора бензидина и 5 капель 1 % раствора пероксида водорода. Если ЖС содержит кровь, то в результате окисления бензидина развивается синее окрашивание.

Результат анализа:

Вывод:

Опыт 2. Количественный анализ желудочного сока.

Определение общей кислотности, общей соляной кислоты, свободной соляной кислоты и связанной кислоты в одной порции ЖС.

Принцип определения кислотности ЖС основан на титровании свободной НСl и кислореагирующих веществ 0,01Н NaOH.

Общая кислотность ЖС выражается количеством мл 0,01Н NaOH, пошедших на титрование 100 мл ЖС в присутствии индикатора – фенолфталеина.

В норме общая кислотность равна 40-60 единицам (Е).

Свободную соляную кислоту принято выражать количеством мл 0,01Н NaOH, пошедших на титрование 100 мл ЖС, в присутствии индикатора метилового желтого.

В норме содержание свободной соляной кислоты равно 20-40 (Е).

В норме содержание связанной соляной кислоты равно 10-20 (Е).

Ход работы: В колбу для титрования вносят пипеткой 0,5 мл исследуемого ЖС. Добавляют 1 каплю раствора метилового желтого и 2 капли раствора фенолфталеина. При наличии в ЖС свободной соляной кислоты он окрашивается в красный цвет с розовым оттенком, при ее отсутствии появляется сразу желтая окраска. Пробу титруют 0,01Н NaOH до появления оранжевой окраски и отмечают количество щелочи в мл, пошедшее на титрование свободной НСl (1пункт титрования). Далее титрование продолжают до появления лимонно-желтой окраски (2 пункт титрования) и снова отмечают количество щелочи в мл, израсходованное сначала титрования до 2 пункта. Затем титрование продолжают до появления розовой окраски (3 пункт титрования). Отмечают количество щелочи, пошедшее на титрование от начала до 3 пункта титрования.

Формулы для расчета:

Количество свободной HCl:

где а – количество 0,01Н NaOH, пошедшего на титрование до 1 пункта; 0,5 – объем исследуемого желудочного сока.

Количество общей HCl:

где в – среднее арифметическое количество щелочи, пошедшее на титрование до 2 и 3 пунктов.

Количество связанной HCl:

HClсвяз. = HClобщ. - HClсвоб.

Общая кислотность (ОК):