Биологическая химия – биохимия полости рта (стр. 6 )

глюкоза + О2 глюконолактон + Н2О2

Образующаяся в ходе данной реакции перекись водорода вызывает окисление субстратов пероксидазы с образованием окрашенного продукта.

Метод сахарной нагрузки: Утром натощак у больного берут кровь из пальца и определяют концентрацию глюкозы крови. После этого дают выпить 50 - 100 г глюкозы в 200 мл теплой кипяченой воды (1 г глюкозы на 1 кг веса) в течение не более 5 минут. Затем повторно исследуют содержание глюкозы в крови, беря из пальца кровь через каждые 30 минут в течение 2-3 часов. Строят график в координатах: время – концентрация глюкозы в сыворотке крови, по виду графика ставят или уточняют диагноз.

Ход работы: В образцах сыворотки (до и после приема глюкозы) определяют концентрацию глюкозы. Для этого в серию пробирок вносят 2 мл рабочего реактива (фосфатный буфер, субстраты пероксидазы + глюкозооксидазы в отношении 40:1). В одну из пробирок вносят 0,05 мл стандартного раствора глюкозы концентрации 10 ммоль/л. В другие - по 0,05 мл сыворотки крови, взятой по методу сахарной нагрузки. Растворы встряхивают и инкубируют при комнатной температуре 20 мин.

После инкубации измеряют оптическую плотность растворов на ФЭК при длине волны 490 нм. Кювета с длиной оптического пути, равной 5 мм. Раствор сравнения - рабочий реактив.

Расчет концентрации глюкозы:

С = 10 ммоль/л

где Е оп - оптическая плотность в образцах сыворотки;

Е ст - оптическая плотность стандартного раствора глюкозы

Результат анализа:

Время, час	0 (натощак)	0,5	1	2	3
Концентрация глюкозы, ммоль/л

График:

Вывод:

Дата: Подпись преподавателя:

ЛАБОРАТОРНОЕ ЗАНЯТИЕ 8

Тема: Обмен кальция и фосфатов

Вопросы для подготовки к занятию:

1. Недостаток витамина D у взрослого человека может вызвать

A.  рахит

B.  остеопороз

C.  ксерофтальмию

D.  макроцитарную анемию

E.  цингу

2. Гормональная форма витамина D

A.  кальциферол

B.  кальцитриол

C.  кальцитонин

D.  кальмодулин

E.  паратгормон

3. Выберите положения, правильно отражающие роль кальцитриола:

A.  Увеличивает скорость всасывания кальция в кишечнике.

B.  Стимулирует реабсорбцию кальция в почках.

C.  Стимулирует мобилизацию кальция из костей.

D.  Стимулирует реабсорбцию натрия в почках.

E.  Является предшественником 7-дегидрохолестерина.

4. Снижение концентрации Са2+ в плазме крови вызывает:

A.  Увеличение секреции паратгормона.

B.  Ингибирование активности парафолликулярных клеток щитовидной железы.

C.  Гидроксилирование метаболитов витамина D3.

D.  Уменьшение экскреции кальция почками.

E.  Повышение скорости растворения кости

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 17

Тема: Количественное определение неорганического фосфора в слюне

Принцип метода: при взаимодействии фосфорных соединений с ванадатом и молибдатом аммония образуется фосфорнованадиевомолибденовая кислота желтого цвета. Содержание неорганического фосфора определяют после депротеинирования.

Ход работы: Готовят три образца согласно табл. 1.

Таблица 1. Приготовление образцов.

Реактив	Образец 1	Образец 2	Образец 3
Опыт	Контроль	Стандарт
Слюна, разбавленная в 4 раза, мл	0,2	-	-
Калибровочный раствор, мл	-	-	0,2
Н2О, мл	0,6	0,8	0,6
ТХУ, мл	0,8	0,8	0,8

Перемешивают и через 5 минут центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 минут. К каждому образцу добавляют рабочий реактив, согласно табл. 2

Таблица 2. Приготовление образцов.

Реактивы	Образец 1	Образец 2	Образец 3
Опыт	Контроль	Стандарт
Надосадочная жидкость, мл	0,8	0,8	0,8
Рабочий реактив, мл	1,0	1,0	1,0

Растворы перемешивают, инкубируют 20 мин при комнатной температуре и измеряют оптическую плотность опытного и стандартного образцов против контроля в кювете с толщиной слоя 0,3см на фотоэлектороколориметре при длине волны 400 нм.

Расчет содержания неорганического фосфора проводят по формуле:

где, С – концентрация фосфора в слюне, ммоль/л;

Еопыт, Естанд. – оптическая плотность опытного и стандартного растворов;

1,5 – концентрация фосфора в стандартном растворе, ммоль/л;

4 – разведение слюны

Нормальная концентрация неорганического фосфора в слюне составляет: 5,46 ± 0,40 ммоль/л.

ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ 7

Контрольная работа 3 Гормональная регуляция обмена веществ

Вопросы к контрольной работе по теме: Гормональная регуляция обмена веществ.

1.  Гормональная регуляция как механизм межклеточной и межорганной координации обмена веществ. Основные механизмы регуляции метаболизма: изменение активности ферментов в клетке, изменение количества ферментов в клетке (индукция или репрессия синтеза), изменение проницаемости клеточных мембран.

2.  Гормоны, общая характеристика, классификация гормонов по химическому строению и биологическим функциям. Механизм действия гормонов белковой природы.

3.  Механизм действия гормонов стероидной природы и тироксина.

4.  Гормоны гипоталамуса. Люлиберин, соматостатин, тиролиберин.

5.  Гормоны гипофиза. Гормоны задней доли гипофиза: вазопрессин, окситоцин.

6.  Строение синтез и метаболизм йодтиронинов.

7.  Влияние йодтиронинов на обмен веществ. Гипо - и гипертиреозы.

8.  Гормоны мозгового слоя надпочечников. Строение, влияние на обмен веществ. Биосинтез катехоламинов.

9.  Гормон роста, строение, функции.

10.  Гормоны околощитовидных желез. Регуляция фосфорно-кальциевого обмена.

11.  Инсулин. Глюкагон. Влияние на обмен веществ.

12.  Стероидные гормоны. Глюкокортикоиды.

13.  Половые гормоны.

14.  Ренин-ангиотензиновая система.

15.  Калликреин-кининовая система.

16.  Гормональная регуляция обмена углеводов, жиров, аминокислот. Нарушения обмена.

ПРАКТИЧЕСКОЕ ЗАНЯТИЕ 8, 9

Защита рефератов

ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА 18

Тема: Решение ситуационных задач

Задача 1. У больного 25 лет утром натощак взята сыворотка крови для анализа. Содержание ТАГ составляло 3 ммоль/л. Содержание холестерола соответствует норме. Сыворотка крови мутная, при хранении в холодильнике на поверхности образуются жирные хлопья. Объясните результаты анализов и возможные причины симптомов, наблюдаемых у больного. Для этого ответьте на вопросы и выполните задания:

а) нарисуйте схемы (липидограммы), отражающие состав липопротеинов сыворотки крови голодного человека и человека, имеющего указанные симптомы заболевания;

б) укажите, нарушения каких молекулярных механизмов может привести к таким изменениям в обмене липидов;

в) сформулируйте рекомендации по питанию данному пациенту.

Задача 2. У женщины 40 лет обнаружены камни в желчном пузыре, которые периодически перекрывали желчный проток и нарушали отток желчи в кишечник. Укажите все возможные последствия нарушения секреции желчи. Для этого:

а) объясните роль желчных кислот в переваривании липидов;

б) укажите функцию желчных кислот в процессе всасывания продуктов переваривания пищевых липидов;

в) укажите, дефицит каких веществ может возникнуть у таких больных, и каковы могут быть последствия и симптомы.

Задача 3. В качестве консервантов косметических средств применяют природные белки: пероксидазу, лактоферин и лизоцим. Объясните механизм их действия в качестве консервантов.

Задача 4. При очередном осмотре стоматолог диагностировал у пациента парадонтоз в начальной стадии. При обследовании в крови больного обнаружена повышенная концентрация кальция, белка остеокальцина, паратгормона; содержание фосфатов ниже нормы. Какому заболеванию могут соответствовать эти данные? Для ответа на вопрос:

a)  опишите действия на ткани-мишени гормона, содержание которого повышено в крови больного;

b)  объясните строение белка остеокальцина и его функцию в костной ткани;

c)  укажите другие маркеры костного метаболизма, содержание которых должно быть повышено в крови и моче больного.

Задача 5. Из слюны животных выделяют ингибиторы протеаз и используют для получения лекарственных препаратов. Они выпускаются фармацевтическими фирмами под названием трасилол, контрикал, гордокс. Опишите функцию этих белков в слюне. Объясните механизм действия этих препаратов при панкреатите и назовите ферменты, которые ингибируются этими препаратами.

Задача 6. Всем известно ощущение оскомины после обильного употребления кислых фруктов. При этом зубы становятся очень чувствительными к горячей и холодной пище. Но это ощущение проходит, если ежедневно чистить зубы зубной пастой, содержащей фтор. Как можно объяснить это явление? Для ответа на вопрос: