Фотометрировать все растворы, начиная с меньшей концентрации. Измерить оптическую плотность растворов относительно воды в диапазоне длин волн 450-750 нм и зафиксировать значение длины волны, при котором наблюдается максимальное светопоглощения всех растворов.
Рассчитать среднее значение максимальной величины светопоглощения. Этот светофильтр использовать для дальнейшей работы.
Распечатать график кривых светопоглощения 
.
4. Измерение оптический плотности стандартных растворов (см. Работа со спектрофотометром, Построение калибровочного графика)
NB! Держать кювету можно только за матовые стороны. Измерения оптической плотности растворов производить только при закрытой крышке кюветного отделения!!!
Измерить оптическую плотность шести стандартных растворов, начиная с раствора имеющего наименьшую концентрацию. Раствор поместить в кювету примерно на 5 мм ниже края кюветы и закрыть крышечкой. Если на внешние стенки кюветы попала жидкость, осторожно удалить ее с помощью фильтровальной бумаги. Заполненную кювету поместить в кюветное отделение так, чтобы луч света проходил сквозь прозрачные стенки кюветы. Зафиксировать кювету и закрыть кюветное отделение.
Распечатать калибровочный график 
5. Определение содержания меди в исследуемом растворе
Получить анализируемый раствор у преподавателя. Определить его светопоглощение А (п.4). По полученному калибровочному графику найти концентрацию меди в исследуемом растворе.
На распечатанном калибровочном графике указать полученное значение.
Результат проверить у преподавателя.
Инструкция по эксплуатации спектрофотометра Helios Gamma (Thermo Scientific)
NB! При включении спектрофотометра кюветное отделение должно быть пустым, крышка кюветного отделения должна быть закрыта!
Включить компьютер. Включить спектрофотометр за 20-30 минут до начала работы. Дождаться инициализации составных частей оборудования. Для переключения работы спектрофотометра на компьютерное управление, на приборе нажать Menu → Remote. После этого с рабочего стола компьютера запустить программу VISIONlite.a) Определение максимального светопоглощения
Из списка методик выбрать Scan и нажать ОК. Открыть необходимый для определения метод, например FeSO4 (File→ Open→_Method). Проверить правильность установленного диапазона длин волн. При необходимости установить диапазон 450-750. Установить определение максимального значения светопоглощения - напротив Maxima должна быть установлена галочка. Для определения базовой линии необходимо установить кювету с дистиллированной водой в кюветное отделение и закрыть крышку. Нажать кнопку Measure Samples (в программе VISIONlite). В поле Operator ввести свое имя и фамилию на латинском и нажать кнопку Measure. После окончания процедуры определения базовой линии снова появится окошко Sample Information. Необходимо извлечь кювету из кюветного отделения, промыть ее и заполнить исследуемым раствором. В появившемся окошке Sample Information (пункт 11) ввести в поле Samples name номер исследуемого раствора, а в Description - описание (например, концентрацию в мл). Галочку напротив Measure blank ставить НЕ надо!!! Затем нажать на Measure. Повторить пункты 12 и 13 со всеми 6 стандартными растворами. Для завершения сканирования растворов после последнего определения во вновь появившемся окошке нажать Close. Поместить бумагу в принтер. Распечатать график кривых светопоглощения с данными, нажав на кнопку Print. Для выхода и смены приложения нажать File → Change Application.b) Построение калибровочного графика
19. Из списка методик выбрать Quant и нажать ОК.
20. Сохранить метод под своим именем на латинском File → Save Method.
21. Нажать на Go To Calibration Mode.
22. В поле Curve type выбрать Linear though Zero.
23. В поле Measurements wavelength установить длину волны, при которой происходит максимальное светопоглощение (см. пункт «Определение максимального светопоглощения»).
24. Установить размерность мг/мл (г/л).
25. Заполнить таблицу стандартных данных, т. е ввести концентрации растворов.
26. Установить кювету с веществом, относительно которого программа будет строить калибровочный график, в кюветное отделение и закрыть крышкой.
27. Нажать Measure Standart.
28. В появившимся окне Calibration (в поле Operator должно быть введено имя и фамилия на латинском) нажать на Measure.
29. После окончания процедуры измерения оптической плотности холостой пробы снова появится окно Calibration.
30. Извлечь кювету из кюветного отделения, промыть и заполнить следующим стандартным раствором.
31. В появившемся окне п. 29 ничего не менять, галочку напротив Measure blank НЕ СТАВИТЬ, нажать на Measure.
32. Повторить пункты 30 и 31со всеми 6 стандартными растворами.
33. Поместить в принтер бумагу и распечатать калибровочный график, нажав на Print.
34. Для того, чтобы измерить оптическу плотность исследуемого раствора, полученного у преподавателя, необходимо нажать на Go to Samples Mode, в появившемся сообщениие выбрать Save with calibration.
35. Поместить кювету с исследуемым раствором в кюветное отделение, измерить его оптическую плотность, нажав на Measure Samples. В появивщемся окне заполнить все пустые поля. Затем нажать на Measure. Сделать 3 замера.
36. Для выхода зайти в меню File → Exit.
37. На спектрофотометре нажать на кнопку HOME, после чего на его экране появятся показания оптической плотности и длины волны. Затем прибор можно выключить, нажав для этого кнопку вкл/выкл на задней панели спектрофотометра.
Лабораторная работа 10
Тема: Спектрофотометрия.
Цель работы: Определение содержания железа в растворе. с помощью спектрофотометра
Посуда и приборы:
- Спектрофотометр Helios Gamma Кювета (стеклянная - G), 10 мм Мерная колба, 100 мл (10 шт) Мерная колба, 1000 мл (1шт) Чашка Петри, 45 мл Аналитические весы, с точностью взвешивания до 0,0001 Воронка, 90 мм, 45 мм Пипетка, 10мл Компьютер с программным обеспечением к спектрофотометру Helios Gamma - VISIONlite Принтер Бумага для печати.
Реактивы:
- Железо - аммонийные квасцы, NH4Fe(SO4)2·12H2O Концентрированная азотная кислота, HNO3 Роданид аммония, NH4CNS, 20% раствор
Ход работы:
Приготовление исходного раствора для построения калибровочного графикаПриготовить 1 л раствора железо-аммонийных квасцов (из расчета 0,1 г железа в 1 л раствора).
Для этого необходимо взять точную навеску 0,8640 г железо-аммонийных квасцов NH4Fe(SO4)2·12H2O и количественно перенести в мерную колбу на 1 л. Растворить навеску в небольшом количестве дистиллированной воды, подкислить 25 мл концентрированной азотной кислоты, довести водой до метки, тщательно перемешать. Полученный раствор (исходный) использовать для приготовления серии стандартных растворов.
Приготовление серии стандартных растворовИз исходного раствора приготовить серию стандартных растворов в 10 колбах на 100 мл. Для этого в мерные колбы (заранее пронумированные от 1 до 10) вместимостью 100 мл с помощью пипетки внести от 1 до 10 мл исходного раствора. В каждую мерную колбу добавить по 5 мл 20%-ного раствора роданида аммония. Растворы довести водой до метки, тщательно перемешать.
3. Выбор светофильтра (см. Определение максимального светопоглощения).
Фотометрировать все растворы, начиная с раствора меньшей концентрации. Измерить оптическую плотность растворов относительно воды в диапазоне длин волн 450-750 нм и зафиксировать значение длины волны, при котором наблюдается максимальное светопоглощение всех растворов. Рассчитать среднее значение максимальной величины светопоглощения. Внести это значение в компьютер. Этот светофильтр использовать для дальнейшей работы.
Распечатать график кривых светопоглощения A=f(λ).
4. Измерение оптической плотности стандартных растворов ( см. Работы со спектрофотометром. Построение калибровочного графика.)
NB! Кювету можно держать только за матовые стороны. Измерение оптической плотности растворов производить только при закрытой крышке кюветного отделения!!!
Измерить оптическую плотность шести стандартных растворов, начиная с раствора, имеющего наименьшую концентрацию. Раствор поместить в кювету примерно на 5 мм ниже края кюветы и закрыть крышечкой. Если на внешние стенки кюветы попала жидкость, осторожно удалить ее с помощью фильтровальной бумаги. Заполненную кювету поместить в кюветное отделение так, чтобы луч света проходил сквозь прозрачные стенки кюветы. Зафиксировать кювету и закрыть кюветное отделение.
Распечатать калибровочный график A=f(C).
Определение содержания железа в исследуемом раствореПолучить анализируемый раствор у преподавателя. Определить его светопоглощение А. (п.4) По полученному калибровочному графику найти концентрацию меди в исследуемом растворе.
На распечатанном калибровочном графике указать полученное значение.
Результат проверить у преподавателя.
Инструкция по эксплуатации спектрофотометра Helios Gamma (Thermo Scientific)
NB! При включении спектрофотометра кюветное отделение должно быть пустым, крышка кюветного отделения должна быть закрыта!
1. Включить компьютер.
2. Включить спектрофотометр за 20-30 минут до начала работы. Дождаться инициализации составных частей оборудования.
Для переключения работы спектрофотометра на компьютерное управление, на приборе нажать Menu → Remote. После этого с рабочего стола компьютера запустить программу VISIONlite.b) Определение максимального светопоглощения
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 |
Основные порталы (построено редакторами)