b) Построение калибровочного графика
19. Из списка методик выбрать Quant и нажать ОК.
20. Сохранить метод под своим именем на латинском File → Save Method.
21. Нажать на Go To Calibration Mode.
22. В поле Curve type выбрать Linear though Zero.
23. В поле Measurements wavelength установить длину волны, при которой происходит максимальное светопоглощение (см. пункт «Определение максимального светопоглощения»).
24. Установить размерность мг/мл (г/л).
25. Заполнить таблицу стандартных данных, т. е ввести концентрации растворов.
26. Установить кювету с веществом, относительно которого программа будет строить калибровочный график, в кюветное отделение и закрыть крышкой.
27. Нажать Measure Standart.
28. В появившимся окне Calibration (в поле Operator должно быть введено имя и фамилия на латинском) нажать на Measure.
29. После окончания процедуры измерения оптической плотности холостой пробы снова появится окно Calibration.
30. Извлечь кювету из кюветного отделения, промыть и заполнить следующим стандартным раствором.
31. В появившемся окне п. 29 ничего не менять, галочку напротив Measure blank НЕ СТАВИТЬ, нажать на Measure.
32. Повторить пункты 30 и 31со всеми 6 стандартными растворами.
33. Поместить в принтер бумагу и распечатать калибровочный график, нажав на Print.
34. Для того, чтобы измерить оптическу плотность исследуемого раствора, полученного у преподавателя, необходимо нажать на Go to Samples Mode, в появившемся сообщениие выбрать Save with calibration.
35. Поместить кювету с исследуемым раствором в кюветное отделение, измерить его оптическую плотность, нажав на Measure Samples. В появивщемся окне заполнить все пустые поля. Затем нажать на Measure. Сделать 3 замера.
36. Для выхода зайти в меню File → Exit.
37. На спектрофотометре нажать на кнопку HOME, после чего на его экране появятся показания оптической плотности и длины волны. Затем прибор можно выключить, нажав для этого кнопку вкл/выкл на задней панели спектрофотометра.
Лабораторная работа 11
Тема: Спектрофотометрия.
Цель работы: Определение содержания никеля в растворе с помощью спектрофотометра.
Посуда и приборы:
- Спектрофотометр Helios Gamma Кювета (стеклянная - G), 10 мм Мерная колба, 50 мл (6шт) Мерная колба, 1000 мл (1шт) Мерная колба, 500 мл (1шт) Чашка Петри, 45 мл Аналитические весы, с точностью взвешивания до 0,0001 Воронка, 90мм, 45 мм Пипетка, 10мл Компьютер с программным обеспечением к спектрофотометру Helios Gamma- VISIONlite Принтер Бумага для печати
Реактивы:
- Сульфат никеля семиводный, NiSO47H2O Йод, J2 , 0,05M раствор Диметилглиоксим, (CH3C=NOH)2, 0,05M спиртовой раствор Гидроксид натрия, NaOH, 0,1М раствор Серная кислота, H2SO4, концентрированная (ρ = 1835 кг/м3)
Ход работы:
Приготовление исходного раствора для построения калибровочного графикаПриготовить 1 л раствора сульфата никеля (из расчета 0,1 г никеля в 1 л раствора). Для этого взять точную навеску 0,4784 г семиводного кристаллогидрата сульфата никеля NiSO4·7H2O квалификации х. ч. с известным содержанием никеля и количественно перенести в мерную колбу на 1000 мл.
Растворить навеску в небольшом количестве дистиллированной воды, подкислить 2 мл концентрированной серной кислоты, довести водой до метки, тщательно перемешать. Полученный раствор перед употреблением разбавить в 10 раз. Для этого в мерную колбу на 500 мл с небольшим количеством воды перенести аликвоту 50 мл приготовленного ранее раствора, довести объем раствора до метки, тщательно перемешать. Приготовленный таким образом раствор сульфата никеля будет содержать 0,01 г/л никеля. Этот раствор нужно использовать для приготовления серии стандартных растворов (исходный раствор).
Из исходного раствора приготовить серию стандартных растворов в 6 колбах по 50 мл. Для этого в мерные колбы (заранее пронумированные от 1 до 6) вместимостью 50 мл внести 2,5; 3,5; 5; 6; 7,5 и 9 мл исходного раствора. В каждую мерную колбу добавить по 0,5 мл раствора йода, 0,5 мл раствора диметилглиоксима и 2,5 мл раствора гидроксида натрия. Растворы довести водой до метки, тщательно перемешать.
Выбор светофильтра (см. Работа со спектрофотометром, Определение максимального светопоглощения).Фотометрировать все растворы, начиная с меньшей концентрации. Измерить оптическую плотность растворов относительно воды (растворитель) в диапазоне длин волн 450-750 нм и зафиксировать значение длины волны λmax, при котором наблюдается максимальное светопоглощение всех растворов. Рассчитать среднее значение максимальной величины светопоглощения. Этот светофильтр использовать для дальнейшей работы.
Распечатать график кривых светопоглощения A=f(λ), из которых находят λmax.
Измерение оптической плотности стандартных растворов ( см. Работы со спектрофотометром. Построение калибровочного графика).NB! Кювету можно держать только за матовые стороны. Измерение оптической плотности растворов производить только при закрытой крышке кюветного отделения!!!
Измерить оптическую плотность шести стандартных растворов, начиная с раствора, имеющего наименьшую концентрацию, при λmax. Для этого раствор поместить в кювету примерно на 5 мм ниже края кюветы и закрыть крышечкой. Если на внешние стенки кюветы попала жидкость, осторожно удалить ее с помощью фильтровальной бумаги. Заполненную кювету поместить в кюветное отделение так, чтобы луч света проходил сквозь прозрачные стенки кюветы. Зафиксировать кювету и закрыть кюветное отделение.
Распечатать калибровочный график A=f(C).
NB! Калибровочный график представляет собой прямую линию. Все полученные точки должны находиться на этой прямой. В случае большого разброса значений, калибровочный график необходимо переделать.
Определение содержания никеля в исследуемом раствореПолучить анализируемый раствор у преподавателя. Определить его светопоглощение А. (п.4) По полученному калибровочному графику найти концентрацию меди в исследуемом растворе.
На распечатанном калибровочном графике указать полученное значение.
Результат проверить у преподавателя.
Инструкция по эксплуатации спектрофотометра Helios Gamma (Thermo Scientific)
NB! При включении спектрофотометра кюветное отделение должно быть пустым, крышка кюветного отделения должна быть закрыта!
1. Включить компьютер.
2. Включить спектрофотометр за 20-30 минут до начала работы. Дождаться инициализации составных частей оборудования.
3. Для переключения работы спектрофотометра на компьютерное управление, на приборе нажать Menu → Remote. После этого с рабочего стола компьютера запустить программу VISIONlite.
c) Определение максимального светопоглощения
Из списка методик выбрать Scan и нажать ОК. Открыть необходимый для определения метод, например NiSO4 (File→ Open→_Method). Проверить правильность установленного диапазона длин волн. При необходимости установить диапазон 450-750. Установить определение максимального значения светопоглощения - напротив Maxima должна быть установлена галочка. Для определения базовой линии необходимо установить кювету с дистиллированной водой в кюветное отделение и закрыть крышку. Нажать кнопку Measure Samples (в программе VISIONlite). В поле Operator ввести свое имя и фамилию на латинском и нажать кнопку Measure. После окончания процедуры определения базовой линии снова появится окошко Sample Information. Необходимо извлечь кювету из кюветного отделения, промыть ее и заполнить исследуемым раствором. В появившемся окошке Sample Information (пункт 11) ввести в поле Samples name номер исследуемого раствора, а в Description - описание (например, концентрацию в мл). Галочку напротив Measure blank ставить НЕ надо!!! Затем нажать на Measure. Повторить пункты 12 и 13 со всеми 6 стандартными растворами. Для завершения сканирования растворов после последнего определения во вновь появившемся окошке нажать Close. Поместить бумагу в принтер. Распечатать график кривых светопоглощения с данными, нажав на кнопку Print. Для выхода и смены приложения нажать File → Change Application.b) Построение калибровочного графика
19. Из списка методик выбрать Quant и нажать ОК.
20. Сохранить метод под своим именем на латинском File → Save Method.
21. Нажать на Go To Calibration Mode.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 |
Основные порталы (построено редакторами)