Методы анализа, необходимые для проверки состава косметической продукции (II) (стр. 5 )

6.7. Приготовить контрольную пробу путем повторения операций 6.5 и 6.6 ,без добавления реагента N-1-нафтил (4.6).

6.8. Измерить (5.7) оптическую плотность при 538 nm полученного раствора, согласно пункту 6.6, данного раздела, используя контрольную пробу (6.7) для сравнения.

6.9. Рассчитать из калибровочного графика (6.10) содержание нитрита натрия в микрограммах на 100 мл раствора (m1 микрограммы), что соответствует оптической плотности, измеренной в соответствии с пунктом 6.8.

6.10. Используя 10 µg на 1 мл раствора нитрита натрия (4.2) получить калибровочный график для концентрации 0, 20, 40, 60, 80 и 100µg нитрита натрия на 100 мл.

7. РАСЧЕТ

Содержание нитрита натрия в образце рассчитать в процентах к массе с помощью следующей формулы:

,

где:

m - масса исследуемого образца, в граммах (6.1);

m1 - содержание нитрита натрия, определенного в пункте 6.9, в микрограммах;

V - количество миллилитров фильтрата, используемого для измерения (6.5).

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ (1)

Для содержимого нитрита натрия примерно в 0,2% m/m, разница между результатами двух параллельных определений, проведенных на одной и той же пробе, не должна превышать абсолютное значение в 0,005%.

IV. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ СВОБОДНОГО ФОРМАЛЬДЕГИДА

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Настоящий метод применяется для идентификации и определения свободного формальдегида. Метод применим ко всем косметическим продуктам:

1.1. Идентификация

1.2. Колориметрическое определение с помощью пентана-2,4-диона.

Настоящий метод применяется, когда формальдегид используется один или в сочетании с другими консервантами, которые не являются донорами формальдегида. В других случаях и если результат превышает предельно допустимую концентрацию, необходимо использовать для подтверждения следующий метод.

1.3.  Определение в присутствии доноров формальдегида

В изложенном выше методе (1.2) во время образования производных формальдегида, доноры формальдегида делятся и приводят к результатам, которые слишком высоки (комбинированный и полимеризованный формальдегид). Необходимо отделить свободный формальдегид, с помощью жидкостной хроматографии.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание свободного формальдегида в пробе, определяемой в соответствии с настоящим методом, выражается в процентах массы.

3. ИДЕНТИФИКАЦИЯ

3.1. ПРИНЦИП

В среде серной кислоты формальдегид изменяет цвет реагента Шиффа в розовый или лиловый.

3.2. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.2.1. Фуксин.

3.2.2. Сульфит натрия гидратированный с 7- молекулами воды H2O.

3.2.3. Концентрированная соляная кислота ( d =1,19 ).

3.2.4. Серная кислота, около 1 М.

3.2.5. Реагент Шиффа:

Взвесить в колбе 100 мг фуксина (3.2.1) и растворить в 75 мл воды при 80°С. После охлаждения добавить 2,5 г сульфита натрия (3.2.2). Довести до объема 100 мл.

Использовать в течение двух недель.

3.3. ПРОЦЕДУРА

3.3.1. В химический стакан объемом в10 мл взвесить 2 г образца.

3.3.2. Добавить две капли серной кислоты (3.2.4) и 2 мл реактива Шиффа (3.2.5). При использовании, реагент должен быть абсолютно бесцветным.

Раствор взболтать и выдерживать в течение пяти минут.

3.3.3. Если в течение пяти минут раствор становится розовым или лиловым, тогда содержание формальдегида превышает 0,01% и должно быть определено в соответствии со свободным или комбинированным методом, указанном в пункте 4 и, при необходимости, в соответствии с процедурой 1, описанной пунктом 5 настоящей главы.

4. ОБЩИЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ МЕТОДОМ КОЛОРИМЕТРИИ С ПЕНТАН-2,4-ДИОНОМ

4.1. Принцип

Формальдегид реагирует с пентан-2,4-дионом в присутствии ацетата аммония с образованием 3,5-диацетил-1,4-дигидролутидина. Последнее вещество экстрагируют с помощью 1-бутанола и измеряют абсорбцию экстракта при 410 nm.

4.2. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты, а вода должна быть деминерализованная.

4.2.1. Ацетат аммония безводный.

4.2.2. Концентрированная уксусная кислота d420 = 1,05.

4.2.3. Пентан-2,4-дион свеже дистиллированный при пониженном давлении 25 mm ртутного столба 25° не должен поглощать при 410 nm.

4.2.4. 1-Бутанол.

4.2.5. Соляная кислота, 0,1 М.

4.2.6. Соляная кислота, приблизительно 0,1 М.

4.2.7. Гидроксид натрия 1 М.

4.2.8. Крахмал, свежеприготовленный раствор согласно Европейской Фармакопеи (1 г / 50 мл воды), второе издание, 1980, части I-VII-1-1.

4.2.9. Формальдегид 37 - 40% м/д.

4.2.10. Стандартный раствор йода, 0,05 М.

4.2.11. Стандартный раствор тиосульфата натрия, 0,1 М.

4.2.12. Реагент пентан-2,4-дион.

В мерной колбе объемом в 1000 мл растворить:

- 150 г ацетата аммония (4.2.1).

- 2 мл пентан-2,4-диона (4.2.3).

- 3 мл уксусной кислоты (4.2.2).

Добавить воду до отметки (рН около 6,4).

Этот реагент должен быть свежеприготовленным.

4.2.13. Реагент (4.2.12) без пентан-2,4-диона.

4.2.14. Формальдегид стандарт, основной раствор:

В мерную колбу перенести 5 г формальдегида (4.2.9) и добавить воды до отметки в 1 000 мл.

Концентрация раствора определяется следующим образом:

Удалить 10,00 мл; добавить 25,00 мл стандартного раствора йода (4.2.10) и 10,00 мл гидроксида натрия (4.2.7). Дайть постоять 5 минут. Подкислить 11,00 мл HCl (4.2.5) и определить избыток йода стандартным раствором тиосульфата натрия (4.2.11), используя как индикатор раствор крахмала (4.2.8).

1 мл йода 0,05 М (4.2.10) эквивалентен 1,5 мг формальдегида.

4.2.15. Формальдегид стандарт, разбавленный раствор

Разбавить последовательно водой основной раствор формальдегида до 1/20 и, соответственно, 1/100.

1 мл этого раствора содержит около 1 µg формальдегида.

Рассчитать точное содержание.

4.3. Оборудование

4.3.1. Стандартное лабораторное оборудование.

4.3.2. Фаза - разделительный фильтр, Whatman 1 PS (или эквивалент) .

4.3.3. Центрифуга.

4.3.4. Водяная баня, отрегулированная при 60°С.

4.3.5. Спектрофотометр.

4.3.6. Стеклянные кюветы с оптической длиной 1 см.

4.4. Процедура

4.4.1. Раствор образца

В 100 мл колбе, взвесить с точностью до 0,001 г количество (в граммах) испытуемой пробы, соответствующего количества формальдегида, около 150 µg.

Довести до метки 100 мл воды и перемешать (раствор S).

[Проверить рН, который должен быть приближен к 6; если нет, разбавить раствором соляной кислоты (4.2.6)].

В колбу Эрленмейера 50 мл поместить:

- 10,00 мл раствора S;

- 5,00 мл реагента, пентан-2,4-диона (4.2.12);

- деминерализованную воду до конечного объема 30 мл.

4.4.2. Эталонный раствор

Возможные, помехи из-за фонового цвета в тестируемй пробе устраняют за счет использования этого контрольного раствора:

В колбу Эрленмейера 50 мл поместить:

- 10,00 мл раствора S;

- 5,00 мл реагента (4.2.13);

- деминерализованную воду до конечного объема 30 мл.

4.4.3. Контрольный тест

В колбу Эрленмейера 50 мл поместить:

- 5,00 мл реагента пентан-2,4-диона (4.2.12);

- деминерализованную воду до конечного объема 30 мл.

4.4.4. Определение

4.4.4.1. Смеси, указанные в пунктах 4.4.1, 4.4.2 и 4.4.3 встряхнуть и погрузить в водяную баню при 60° С, ровно на 10 минут. Растворам дать остыть в течение двух минут в водяной бане со льдом.

4.4.4.2. Перенести в делительные воронки на 50 мл, содержащие 10,0 мл 1-бутанола (4.2.4). Каждую колбу промыть 3-5 мл воды. Смесь энергично встряхивать ровно 30 секунд и оставить для разделения.

4.4.4.3. Профильтровать фазу 1-бутанол через фильтр для разделения фаз (4.3.2). Также можно использовать центрифугирование (3000 gn, в течение пяти минут).

4.4.4.4. Измерить оптическую плотность А1 экстракта раствора при 410 nm, представленного пунктом 4.4.1, в сравнении с экстрактом контрольного раствора из пункта 4.4.2 настоящей главы.

4.4.4.5. Аналогично измерить абсорбент А2 экстракта раствора этанола, указанного в пункте 4.4.3 настоящей главы, в сравнении с 1-бутанолом.

Все операции должны проводиться в течение 25 минут с момента помещения колб Эрленмейера на водяную баню при 60°С.

4.4.5. Калибровочная кривая

4.4.5.1. В колбу Эрленмейера на 50 мл заливают:

-  5,0 мл, разбавленного стандартного раствора (4.2.15);

-  5,0 мл реагента пентан-2,4-диона (4.2.12);

-  деминерализованную воду до конечного объема в 30 мл.

4.4.5.2. Продолжить, согласно действиям, описанным в пункте 4.4.4, настоящей главы и измерить оптическую плотность в сравнении с 1-бутанолом (4.2.4).

4.4.5.3. Процедуру повторить с 10, 15, 20 и 25 мл разбавленного стандартного раствора.

4.4.5.4. Чтобы получить нулевое значение необходимо действовать согласно пункту 4.4.4.5.

4.4.5.5. Калибровочную кривую вывести после вычитания нулевого значения каждого из оптических плотностей, полученных в пунктах 4.4.5.1 и 4.4.5.3.  Закон Beer действует до максимального значения формальдегида в 30 µl.

4.5. Расчет

4.5.1. Вычесть А2  из А1 и выделить на калибровочной кривой (4.4.5.5), количество С формальдегида в микрограммах в испытуемом растворе (4.4.1).

4.5.2. Содержание формальдегида в пробе рассчитать в процентах массы (% m/m), согласно следующей формуле:

 

где:

m - масса части пробы, указанной в пункте 4.4.1.

4.6. Воспроизводимость (1)

При содержании формальдегида в 0,2%, разница между результатами двух параллельных определений, проведенных с той же пробой, не должна превышать 0,005% в колориметрическом методе с пентан-2,4-дионом.

Например, если определение свободного формальдегида приводит к большим результатам, чем максимальная концентрация, установленная Директивой 76/768 / ЕЕС: