Методы анализа, необходимые для проверки состава косметической продукции (II) (стр. 7 )

4.9. Силилирующие агенты:

4.9.1. N, O-д (триметилсилил) трифторацетамид (BSTFA).

4.9.2. Гексаметилдисилазан (HMDS).

4.9.3. Триметилхлорсилан (TMCS).

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Стандартное лабораторное оборудование для тонкослойной хроматографии и газовой хроматографии.

5.2.Лабораторные изделия из стекла.

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Приготовление пробы

6.1.1. В химическом стакане на 150 мл взвесить с точностью пробу продукта (m, граммы), который содержит примерно от 20 до 50 мг резорцина.

6.1.2. Подкислить соляной кислотой (4.1) пока смесь не станет кислотой (необходимо примерно от 2 до 4 мл), добавить 10 мл (40 мг ДНT) внутреннего стандартного раствора (4.7) и перемешать. Перенести с этанолом (4.3) в мерную колбу на 100 мл, довести до метки этанолом и перемешать.

6.1.3. Нанести 250 µl раствора (6.1.2) на дезактивированную пластинку, покрытую диоксидом кремния (4.4), в виде непрерывной линии длиной примерно 8 см. Линия должна быть максимально тонкой.

6.1.4. Нанести 250 µl стандартной смеси (4.8) на ту же пластинку и таким же образом (6.1.3).

6.1.5. В двух точках на исходной линии закапать по 5 µl каждого из растворов, указанных в пунктах 4.6 и 4.7 настоящей главы, для локализации после проявления пластинки.

6.1.6. Пластинку проявить в ненасыщенной ванне, заполненной проявляющим растворителем, указанным в пункте 4.5, пока фронт растворителя не достигнет 12 см от линии старта; как правило, это занимает примерно 45 минут. Пластинку просушить на воздухе и локализовать зону резорцина ДНТ коротковолновыми ультрафиолетовыми лучами (254 nm). Оба ингредиента имеют примерно одинаковые значения Rf. Отметить полосы карандашом на расстоянии 2 мм от внешнего темного края полос. Эти зоны удалить, а адсорбент каждой полосы собрать в бутылку на 10 мл.

6.1.7. Экстрагировать адсорбент, содержащий пробу и стандартную смесь, следующим образом:

Добавить 2 мл метанола (4.2) и экстрагировать в течение одного часа при непрерывном перемешивании. Смесь профильтровать и повторить экстракцию еще 2 мл метанола в течение 15 минут.

6.1.8. Полученные экстракты объединить и выпарить растворитель путем просушки в течение ночи в вакуумном эксикаторе, заполненном соответствующим осушителем. Не нагревать.

6.1.9.Осадок (пункт 6.1.8) силилировать, согласно пунктам 6.1.9.1 или 6.1.9.2, настоящей главы.

6.1.9.1. Микрошприцом добавить в смесь 200 µl BSTFA (4.9.1) и выдерживать в закрытом сосуде в течение 12 часов при комнатной температуре.

6.1.9.2. Микрошприцом добавить 200 µl HMDS (4.9.2) и 100 µl TMCS (4.9.3), смесь нагревать в закрытом сосуде в течение 30 минут при 60°С и охладить.

6.2. Газовая хроматография

6.2.1. Условия для хроматографирования

Колонка должна иметь разрешение R, равное или больше 1,5:

,

где:

r1 и r2	-	время удержания двух пиков, в минутах;
w1 и w2	-	ширина тех же пиков на половине высоты, в мм;
d '	-	скорость вращения бумаги, мм в минуту.

Адекватными для газовой хроматографии и колонки являются следующие условия:

Колонка:	материал:	нержавеющая сталь
длина:	200 см
внутренний диаметр:	~ 3 мм
наполнитель:	10% OV-17 на Chromosorb WAW, ячейки 100 - 200
Пламенно-ионизационный детектор
Температуры:
колонка	185°С (изотермическая)
детектор	250°С
инжектор	250°С
газ-носитель:	азот
расход:	45 мм/мин

Для настройки потоков водорода и воздуха следовать инструкциям производителя.

6.2.2. В газовый хроматограф впрыснуть от 1 до 3 µl растворов, полученных в соответствии с пунктом 6.1.9 настоящей главы. Осуществить по пять впрысков для каждого раствора (6.1.9), измерить площади пиков, рассчитать их среднее значение и соотношение между площадями пиков: S - площадь пика резорцина/площадь пика ДНT.

7. РАСЧЕТ

Концентрация резорцина в пробе, выраженная в % массы (% m/m), рассчитывается по следующей формуле:

%( резорцина)=

где:

М - масса исследуемой пробы, в граммах (6.1.1);

Sпробы - среднее соотношение площадей пиков, согласно пункту 6.2.2; настоящей главы, для пробы;

Sстандартная смесь - среднее соотношение площадей пиков, согласно пункту 6.2.2 настоящей главы, для стандартной смеси.

8. ПОВТОРЯЕМОСТЬ(1)

Для содержания резорцина примерно в 0,5% разница между результатами двух параллельных определений, проведенных на одной и той же пробе, не должна превышать абсолютную величину в 0,025%.

VI. ОПРЕДЕЛЕНИЕ МЕТАНОЛА ПО ОТНОШЕНИЮ К ЭТАНОЛУ ИЛИ 2-ПРОПАНОЛУ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Настоящий метод описывает анализ путем газовой хроматографии метанола во всех видах косметических продуктов (в том числе в виде аэрозолей).

Могут быть определены относительные пределы от 0 до 10%.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание метанола, определенное в соответствии с настоящим методом, выражается в процентах к массе метанола по отношению к этанолу или 2-пропанолу.

3. ПРИНЦИП

Определение осуществлять путем газовой хроматографии.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Метанол

4.2. Абсолютный этанол

4.3. 2-пропанол

4.4. Хлороформ, свободный от спиртов путем промывки водой

5. ОБОРУДОВАНИЕ

5.1. Газовый хроматограф:

- с детектором катарометра для аэрозольных проб,

- с пламенно-ионизационным детектором для не аэрозольных проб.

5.2. Мерные колбы на 100 мл

5.3. Пипетки на 2 мл, 20 мл, от 0 до 1 мл

5.4. Микрошприцы от 0 до 100 µl и от 0 до 5 µl

(только для аэрозольных проб), специальные газонепроницаемые шприцы с запорным клапаном (см. процедуру отбора проб на рис. 5) (1).

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. Приготовление пробы

6.1.1. Отбор проб аэрозольных продуктов произвести в соответствии с главой II Приложения №1 к настоящему Регламенту и исследовать с помощью газовой хроматографии при условиях 1, описанных пунктом 6.2.1 настоящей главы.

6.1.2. Отбор проб не аэрозольных продуктов произвести в соответствии с вышеуказанной главой II, разбавить водой до концентрации 1-2% этанола или 2-пропанола, а затем исследовать с помощью газовой хроматографии при условиях, описанных пунктом 6.2. 2 настоящей главы.

6.2. Газовая хроматография

6.2.1.Для аэрозольных проб использовать детектор ( катарометр ).

6.2.1.1. Колонку наполнить 10% Hallcomid M18 на Chromosorb WAW с 100 - 200 ячеек.

6.2.1.2. Колонка должна обеспечить разрешение R, равное или больше 1,5:

,

где:

r1 и r2 - время удержания двух пиков, в минутах;

w1 и w2 - ширина тех же пиков на половине высоты, в мм;

d '- скорость вращения бумаги, мм в минуту.

6.2.1.3.  Условия, позволяющие достигнуть это разрешение:

Колонка:	материал:	нержавеющая сталь
длина:	3,5 м
диаметр:	3 мм
ток шунта катарометра:	150 мА
Газ-носитель:	гелий
Давление:	2,5 бар
расход:	45 мм/ мин
Температура:
Инжектор:	150°С
Детектор:	150°С
Нагреватель колонки	65°С

Измерение площадей пиков можно улучшить путем электронной интеграции.

6.2.2. Для не аэрозольных образцов:

6.2.2.1. Колонку наполнить Chromosorb 105 или Porapak QS и использовать пламенно-ионизационный детектор.

6.2.2.2. Колонка должна обеспечить разрешение R, равное или больше 1,5:

,

где:

r1 и r2	-	время удержания двух пиков, в минутах;
w1 и w2	-	ширина тех же пиков на половине высоты, в мм;
d '	-	скорость вращения бумаги, мм в минуту.

6.2.2.3. Условия, позволяющие достигнуть это разрешение:

Колонка:	материал:	нержавеющая сталь
длина:	2 м
диаметр:	3 мм
Чувствительность электрометра:	8 × 10 -10А
Газы:
носитель:	азот
давление:	2,1 бар
расход:	40 мм/мин
Вспомогательный газ:	водород
давление:	1,5 бар
расход:	20 мм/мин
Температуры:
инжектор:	150 ° С
детектор:	230 ° С
нагреватель колонки	120°С до 130°С

7. Стандартный график