Механизмы антиандрогенной активности комбинированного препарата дроспиренон/этинилэстрадиол (стр. 2 )

За последние 5-7 лет появились серии публикаций, описывающих быстрые экстрагеномные мембранотропные эффекты стероидов [Mendoza, 2003; Michel, 2004; Rana, 2005]. К ним можно отнести влияние прогестерона и тестостерона на уровень кальция, активность тирозинкиназы, фосфолипазы С в гаметах, негеномный эффект альдостерона на трансмембранный транспорт натрия в эпителиальных клетках почечных канальцев, ранние эффекты витамина Д3 на уровень кальция и цАМФ в клетках костной ткани. Получены также сведения об участии мембранных рецепторов эстрогенов и гестагенов в регуляции активности мембраносвязанных ферментов аденилатциклазы, протеинкиназы С, 5'-нуклеотидазы в норме и при опухолевом росте. Тем не менее, при исследовании механизмов фармакологического действия андрогенов и соединений, обладающих антиандрогенной активностью, сведения о существовании негеномных эффектов половых стероидов на клетки-мишени до последнего времени не учитывались.

Цель исследования: выяснениеопределение фармако-биохимических особенностей антиандрогенного действия клинической эффективности комбинированного препарата дроспиренон/этинилэстрадиол при лечении угревой болезни у женщин и выявление биохимических механизмов особенностей реализации его антиандрогенного действия. комбинированного препарата дроспиренон/этинилэстрадиол у женщин с гиперандрогенией.

Задачи исследования:

1.  Разработка тест-системы для оценки антиандрогенной активности половых стероидов с использованием лимфоцитов периферической крови.

2.  Исследование эффективности применения комбинированного препарата дроспиренон/этинилэстрадиола при терапии угревой болезни у женщин.

3.  Исследование влияния комбинированного препарата дроспиренон/этинилэстрадиола на показатели гормонального обмена (базальная концентрация гонадотропинов ФСГ и ЛГ, уровень тестостерона, содержание глобулина, связывающего половые стероиды) в крови женщин с явлениями гиперандрогении.

4.  Определение относительного сродства дроспиренона в сравнении с другими гестагенами (прогестерон, ципротерона ацетат) к рецепторам андрогенов в лимфоцитах периферической крови женщин с симптомами гиперандрогении.

5.  Сравнительная оценка влияния гестагенов и соединений, обладающих доказанной гестагенной активность, на содержание вторичных мессенджеров (ионов Ca2+ и цАМФ) в лимфоцитах периферической крови женщин с явлениями андрогенизации.

Разработка экспериментальной модели оценки антиандрогенной активности фармакологических препаратов.

Научная новизна. На модели лимфоцитовах периферической крови женщин с гиперандрогенией впервые показановыявлено, что клинически значимый антиандрогенный эффект комбинации дропспиренон/этинилэстрадиол может быть обусловлен как геномными (ингибирование связывания тестостерона с цитозольными рецепторами), так и негеномными механизмами (блокированием дроспиреноном в терапевтической области концентраций Са-каналов плазматических мембран клеток-мишеней и противодействие индуцированному арахидоновой кислотой (АА) входу Ca2+ извне в клетки). В то же время гестаген практически не влияет на стимулированный АА выход Ca2+ из внутриклеточных депо. Не выявлено достоверного влияния гормона на митоген-индуцированное изменение внутриклеточного содержания цАМФ.

что дроспиренон наряду с классическим геномным действием, оказывает прямые эффекты на клетки-мишени, опосредованные изменением ионной проницаемости плазматической мембраны.

Впервые установлено, что в зависимости от степени выраженности сродства к внутриклеточным рецепторам андрогенов в лимфоцитах изученные соединения располагаются в ряду: ципротерона ацетат > дроспиренон > прогестерон > АБМП.

Выявленная закономерность отражает вероятность развития геномного действия стероидов. Впервые показано, что негеномное действие дроспиренона в терапевтической области концентраций определяется блокадой Са-каналов плазматических мембран лимфоцитов.

Впервые выявлено, что тестостерон (Т) и его высокомолекулярная форма (тестостерон, ковалентно иммобилизованный на БСА) индуцируют подъем внутриклеточного уровня кальция. Эффект дигидротестостерона (ДТ) существенно уступает действию тестостерона. Гестагены дроспиренон и, в меньшей степени АБМП, препятствуют индуцированному тестостероном входу Ca2+ извне в клетки. Антагонист внутриклеточных рецепторов андрогенов препарат ципротерона ацетат не влияет на тестостерон-индуцированные изменения кальция.

Практическая значимость работы. Установлена выраженная клиническая эффективность препарата дроспиренон/этинилэстрадиола у женщин с угревой болезнью и выявленыПредложено экспериментальное обоснование особенности его реализации клинически значимого антиандрогенного эффекта препарата дроспиренон/этинилэстрадиола у женщин с симптомами гиперандрогении.

Предложена экспериментальная тест-система для скрининга и изучения молекулярных механизмов экстрагеномного мембранотропного действия андрогенов и новых соединений, обладающих антиандрогенной активностью.

Расшифровка молекулярных и клеточных механизмов антиандрогенного действия современного комбинированного препарата дроспиренон/этинилэстрадиол будет способствовать рациональному применению существующих средств, а также поиску и созданию новых высокоэффективных и безопасных гормональных препаратов.

Основные положения, выносимые на защиту.

·  Установлена выраженная антиандрогенная активность препарата дроспиренон/этинилэстрадиол у женщин с угревой болезнью.

·  При изучении биохимических механизмов реализации антиандрогенного действия данной комбинации выявлена важная роль гестагенного компонента – дроспиренона, который по конкурентному механизму ингибирует специфическое связывание андрогенов с их цитозольными рецепторами, регулирующими активность генов и определяющих андрогенный фенотип.

·  По своим признакам влияние дроспиренона на [Са2+]цит относится к специфическим мембранотропным эффектам стероидов. Признаками негеномного действия дроспиренона являются: быстрое развитие в пределах 10 мин; микромолярный диапазон эффективных концентраций; обратимость; отменяются антагонистами стероидов мембранного типа действия и не чувствительны к антагонистам внутриклеточных рецепторов стероидов.