Внедрение. в практику: Ррезультаты настоящего исследования используются в научной и учебной работе кафедры молекулярной фармакологии и радиобиологии РГМУ г. Москвы., кафедры гинекологии Саратовского Саратовской медицинскойго академииинститута (?), в работе гинекологического отделения ММУ Городской клинической больницы г. Саратова.
Апробация диссертации. Основные положения диссертации доложены на XII Межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы диагностики, лечения и реабилитации больных», октябрь 2006 г., Пенза;состоялась на совместной научной конференции кафедры молекулярной фармакологии и радиобиологии РГМУ и ПНИЛ молекулярной фармакологии РГМУ от _____________2007 года. Диссертация рекомендована к защите.
Публикации и сообщения по теме диссертации. По теме диссертации опубликовано 5 6 работ, в том числе 3 работы в журналах, рекомендованных «Перечнем» ВАК Рособрнадзора РФ. Основные положения диссертации доложены на XII Межрегиональной научно-практической конференции «Актуальные вопросы диагностики, лечения и реабилитации больных», октябрь 2006 г., Пенза.
Объем и структура диссертации: диссертация изложена на ____ страницах машинописи, иллюстрирована ____ рисунками, содержит ___ таблиц, состоит из введения, 3 основных глав, выводов, практических рекомендаций. Библиографический указатель включает ___ отечественных и ____ зарубежных источника.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Протокол исследования в соответствии с правилами GCP был рассмотрен и одобрен этическим комитетом РГМУ (протокол №61 от 11.0505.06).
В исследование было включено 46 женщин в возрасте от 18 до 35 лет (средний возраст 23 года), нуждающиеся в контрацепции и также страдающие различными клиническими формами угревой болезни; имеющие подписанное информированное согласие на участие в исследовании. Продолжительность болезни составила от 7 месяцев до 12 лет, при средней продолжительности - 6 лет и 7 месяцев.
Критериями исключения являлись: беременность; венозный или артериальный тромбоз в анамнезе; сахарный диабет I или II типа; артериальная гипертония (САД>140 мм рт. ст., ДАД>90 мм рт. ст); ожирение (ИМТ>39 кг/м2); заболевания печени, в т. ч. нарушения желчевыделительной функции, инфекционный гепатит; вагинальные кровотечения невыясненной этиологии; кормление грудью (до момента отнятия или на протяжении 6 мес после рождения); рак молочной железы или половых органов; отказ пациента подписать информированное согласие.
Исследование включало несколько этапов (таблица 1). Пациенты осматривались гинекологом в начале исследования, через 3 месяца и в конце исследования для оценки эффективности и безопасности терапии и забора крови.
Во время каждого визита оценивалось состояние кожи лица по количеству и выраженности таких морфологических элементов угревой болезни, как комедоны, пятна, папулы и пустулы. В зависимости от степени выраженности клинических проявлений и тяжести течения дерматоза все больные были разделены на три группы: легкая, средняя и тяжелая формы течения дерматоза. Степень выраженности угревой сыпи (градации) определяется по методу Кука на основании шкалы от 0 до 8 (табл. 2). Градации 1 – 2 – 3 по шкале Кука соответствует легкой степени течения заболевания, градации 4 – 5 – средней степени течения, градации и > 6 – тяжелое течение дерматоза.
Таблица 1. Дизайн исследования
-1 нед | старт | 3 мес | 6 мес | |
Информированное согласие | + | |||
Критерии включения/невключения | + | |||
Анамнез | + | |||
Осмотр гинеколога | + | + | + | + |
Физикальный осмотр | + | + | + | + |
Оценка топографии угревой сыпи и лицевых кожных симптомов* | + | + | + | |
Оценка функциональной активности лимфоцитов | + | + | ||
Определение концентрации ФСГ, ЛГ, ГСПС в крови | + | + |
* динамику изменения выраженности угревой сыпи у пациентов на фоне фармакотерапии оценивали с 2 месячным интервалом
Во время каждого визита оценивалось состояние кожи лица по количеству и выраженности таких морфологических элементов угревой болезни, как комедоны, пятна, папулы и пустулы. В зависимости от степени выраженности клинических проявлений и тяжести течения дерматоза все больные были разделены на три группы: легкая, средняя и тяжелая формы течения дерматоза. Степень выраженности угревой сыпи (градации) определяется по методу Кука на основании шкалы от 0 до 8 (табл. 2). Градации 1 – 2 – 3 по шкале Кука соответствует легкой степени течения заболевания, градации 4 – 5 – средней степени течения, градации и > 6 – тяжелое течение дерматоза.
Комбинированный препарат дроспиренон/этинилэстрадиол назначали всем пациенткам с первого дня менструального цикла по 1 таблетки в течение 21 дня. После 7-дневного перерыва назначают следующий курс. Длительность терапии составила 6 циклов (около 6 месяцев).
Терапевтическая эффективность применяемого лечения по окончанию исследования оценивалось как клиническое выздоровление (полное разрешение элементов угревой сыпи), значительное улучшение (разрешение элементов сыпи более чем на 75% от исходного уровня), улучшение (регресс элементов сыпи менее чем на 50%) и «без эффекта» (без существенной клинической динамики).
Таблица 2. Шкала оценки симптомов выраженности угревой сыпи (шкала Кука)
Градация | Описание |
0 | Кожа не безупречно чистая, может присутствовать небольшое количество маленьких комедонов или папул, но это заметно только при осмотре с близкого расстояния |
2 | Приблизительно на 1/4 поверхности лица имеются небольшие папулы (6 - 12 штук), или комедоны (может быть небольшое количество больших комедонов или 20 - 30 маленьких закрытых комедонов) |
4 | Приблизительно на 1/2 поверхности лица имеются небольшие папулы и большие или небольшие комедоны. Имеется небольшое количество пустул или больших выступающих комедонов (если имеются поражения большого размера, заболевание может быть классифицировано как "шкала 4", даже если поражено менее 1/2 площади лица) |
6 | Приблизительно на 3/4 поверхности лица имеются папулы и/или большие открытые комедоны (возможна меньшая площадь поражения лица, если воспалительные элементы большого размера). Обычно имеются множественные пустулы, некоторые из них могут быть большими |
8 | Поражена практически вся площадь лица. Визуально выделяются большие выступающие пустулы. Поражения обычно соответствуют воспалению высокой степени, могут присутствовать и другие типы угревой сыпи (такие как сonglobata, включая синусовые и кистозные типы) |
Примечание. Шкала от 0 до 8 является линейной, т. е. различие между градацией 0 и 2 должно быть тем же самым, что и между градацией 2 и 4, 4 и 6 и т. д. Градации 1, 3, 5, 7 могут быть применены для промежуточных случаев. |
Терапевтическая эффективность применяемого лечения по окончанию исследования оценивалось как клиническое выздоровление (полное разрешение элементов угревой сыпи), значительное улучшение (разрешение элементов сыпи более чем на 75% от исходного уровня), улучшение (регресс элементов сыпи менее чем на 50%) и «без эффекта» (без существенной клинической динамики).
Методы исследования
Концентрацию гормонов в сыворотке крови и андрогенов в моче определяли радиоиммунологическим методом с использованием стандартных наборов реактивов фирм: "Immunotech" (Чехия) — определение ЛГ, ФСГ; ГП "ХОП ИБОХ" (Беларусь) — определение тестостерона; "BCM Diagnostics" (США) — определение ГСПС.
Выделение лимфоцитов периферической крови человека. Кровь (15 мл) отбирали из локтевой вены в пластиковую пробирку, содержащую 3 мл антикоагулянта (25 г двухводного цитрата Na). Взятую кровь (5 мл) наслаивали с помощью пастеровской пипетки на градиент изопак-фиколл (3 мл). Центрифугировали при 1500g в течение 15 минут при комнатной температуре. Отсасывали прозрачный слой среды, расположенный над градиентом. Этот слой содержит мононуклеарные лейкоциты (МНЛ), их ресуспендировали в среде Хенкса и отмывали центрифугированием. Суспензия мононуклеаров периферической крови, выделенных описанным способом, содержит 90% лимфоцитов и 10% моноцитов. Среди МПЛ большинство составляют Т-лимфоциты - примерно 70%. Затем клетки помещали в 10 мл HEPES-буфера следующего состава (мМ): 145 NaCl, 5 KCl, 1 Na2HPO4, 1 CaCl2, 0.5 MgSO4, 5 глюкоза, 10 NaHEPES, pH 7.4 при 37 oС.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7 8 |
