Методы анализа необходимые для проверки состава косметической продукции (III) (стр. 2 )

Раствор B

В 100 мл мерной колбе взвесить  35г натриевого тартрата калия (4.6). Растворить в 50 мл воды. Добавить 20 мл раствора гидроксида натрия (4.4). Довести до метки водой и перемешать. Непосредственно перед использованием, в 100 мл мерную колбу добавить  пипеткой 10 мл раствора А и 10 мл раствора В, довести до метки 100 мл и перемешать.

4.17. Элюирующие растворители для тонкослойной хроматографии

I:	бутан-1-ол (4.11)/уксусная кислота (4.12) / вода (80:20:20; v/v/v);
II:	хлороформ (4.13)/уксусная кислота (4.12) (95: 5; v/v).

4.18. 2,6-дихлор-4-(хлоромино) циклогексил-2,5-dienol, 1% (m/v) раствор в этаноле (4.10).

4.19. Карбонат натрия, 1% раствор в воде (m/v).

4.20. Этанол (4.10), 30% раствор в воде (v/v).

4.21. Динатрия дигидрофосфат этилендиаминтетрауксусной кислоты, 5% раствор в воде (m/v).

4.22. Буферный раствор, рН 7

В мерной колбе объемом один литр взвесить 27 г безводного калия дигидрофосфата  70 г тригидрата дигидрофосфата калия (однозамещенного). Довести до метки водой.

4.23. Пластины для тонкослойной хроматографии

Готовые пластины  толщиной 0,25 мм (например,  Merck Kieselgel 60 или эквивалент). Перед использованием пластины опрыскать 10 мл реагента (4.21) и сушить при 80°С

5. АППАРАТУРА

5.1. 100 мл круглодонная колба с матовым стеклом.

5.2. Мерные колбы.

5.3. Пипетки градуированные, 10 и 5 мл.

5.4. Пипетки, 20, 15, 10 и 5 мл.

5.5. Делительные воронки, 100, 50 и 25 мл.

5.6. Гофрированная фильтровальная бумага, диаметр 90 мм.

5.7. Роторный испаритель.

5.8. Нагревание с обратным холодильником со шлифом.

5.9. Спектрофотометр.

5.10. Оптические кюветы, длина пути 10 мм.

5:11. Мешалка.

5.12. Размеры стеклянной колонки для хроматографии: длина 160 мм и диаметр  8 мм, сужение в нижней части, заполненное пробкой из стекловаты и верхний адаптер для приложения давления.

6.  ПРОЦЕДУРА

6.1. Идентификация

6.1.1. Жидкие пробы

6.1.1.1. Довести рН испытуемой пробы до 7,5 и 10 µl и нанести на стартовую линию предварительно подготовленной пластинки (4.23).

6.1.1.2. Пипеткой нанести по 10 и 30 µl стандартного раствора (4.15.2) на две точки исходной линии, после чего пластинку развивать в одном из двух элюентов (4.17).

6.1.1.3. Когда фронт растворителя достигнет высоты верхнего края на 150 mm, извлечь пластинку и сушить при 110°С (более 15 мин). В УФ-свете (366 nm) пятнa хинолин-8-ола светятся желтым цветом.

6.1.1.4. Пластинку опрыскать раствором карбоната натрия (4.19). Сушить и  опрыскать раствором 2,6-дихлор-4- (хлоримино) циклогексил-2,5-dienol (4.18). Хинолин-8-ол становится видимым в виде синего пятна.

6.1.2. Твердые пробы или кремы

6.1.2.1. 1г пробы диспергировать в 5 мл буферного раствора (4.22). Затем  перевести  с 10 мл хлороформа (4.3) в делительную воронку и встряхнуть. После отделения слоя водный слой экстрагировать еще два раза с 10 мл хлороформа (4.3). Экстракты комбинированного и фильтрованного хлороформа. Выпарить почти досуха в 100 мл круглодонной колбе (5.1) на роторном испариОсадок растворить в 2 мл хлороформа (4.3) и полученный раствор нанести на тонкослойную пластину силикагеля по 10 и 30 µl (4.23), в соответствии с методом, описанным пунктом 6.1.1.1 настоящей главы.

6.1.2.2. Нанести на пластину 10 и 30 µl стандартного раствора (4.15.2) и продолжить, как описано в пунктах 6.1.1.2 - 6.1.1.4 настоящей главы.

6.2. Определение

6.2.1. Жидкие пробы

6.2.1.1. В круглодонной колбе на 100 мл взвесить 5 г пробы. Добавить 1 мл раствора серной кислоты (4.8), и выпарить смесь почти досуха при пониженном давлении и температуре 50°С

6.2.1.2. Этот остаток растворить в 20 мл теплой воды. Раствор перенести в мерную  колбу на 100 мл. Промыть три раза с 20 мл воды. Довести до  100 мл водой и перемешать.

6.2.1.3.Добавить  пипеткой 5 мл данного раствора в делительную воронку на 50 мл (5.5). Добавить 10 мл раствора Фелинга (4.16). Экстрагировать комплекс хинолин-8-ол-Сupru[оксин меди (ISO)], полученный частями по 8 мл хлороформа (4.3).

6.2.1.4. Отфильтрованные фазы хлороформа объединить в мерной колбе на 25 мл (5.2). Довести до метки хлороформом(4.3) и перемешать. Измерить оптическую плотность желтого раствора  в сравнении с хлороформом при длине волны 410 nm.

6.2.2. Твердые пробы или кремы

6.2.2.1. В 100 мл круглодонной колбе (5.1) взвесить 0,500г пробы. Добавить 30 мл бензола (4.2) и 20 мл соляной кислоты (4.7). Содержимое колбы кипятить до рефлюкса, перемешивая в течение 30 мин.

6.2.2.2. Содержимое колбы перенести в 100 мл делительную воронку (5.5). Промыть HCl 5мл  раствора соляной кислоты (4.7). Водную фазу перенести в круглодонную колбу (5.1), фазу бензола промыть 5 мл  соляной кислоты (4.7).

6.2.2.3. В случае эмульсий, которые затрудняют продолжение анализа, добавить 0,500г пробы, смешанной с 2 г Celite 545 (4.14), для получения свободно текучего порошка. Смесь перенести небольшими порциями в стеклянную  хроматографическую колонку (5.12).

После каждого добавления утрамбовать содержимое колонки. Сразу после ввода смеси в колонку элюирование проводят с соляной кислотой (4.13) так, чтобы 10 мл элюата было получено примерно через 10 минут (при необходимости, данная смесь может быть элюирована в атмосфере азота под небольшим давлением). Во время элюации необходимо обеспечить постоянное наличие поверх колонки некоторого количества соляной кислоты. Первые 10 мл элюата подвергнуть дальнейшей обработке, как описано в пункте 6.2.2.4 настоящей главы.

6.2.2.4. Собранные водные фазы (6.2.2.2) или элюат (6.2.2.3) испарять почти досуха на роторном испарителе при пониженном давлении.

6.2.2.5. Остаток растворить в 6 мл раствора гидроксида натрия (4.9). Добавить 20 мл раствора Фелинга (4.16) и содержимое колбы перенести в 50 мл делительную воронку (5.5). Колбу промыть 8 мл хлороформа (4.3). Встряхнуть и профильтровать слой хлороформа в мерной колбе на  50 мл  (5.2).

6.2.2.6. Повторить экстрагирование три раза с 8 мл хлороформа (4.3). Слой хлороформа профильтровать и собрать в колбу на 50 мл. Довести до  метки  хлороформом (4.3) и перемешать. Провести измерение оптической плотности желтого раствора при длине волны 410 nm  в сравнение с  хлороформом (4.3).

7. СТАНДАРТНАЯ КРИВАЯ

В четыре 100 мл круглодонные колбы (5.1), каждая из которых содержит 3 мл 30% водного раствора этанола (4.20), добавить по 5, 10, 15 и 20 мл  стандартного раствора (4.15.1), что соответствует 5, 10, 15 и 20 мг хинолин-8-ола. Анализ провести в соответствии с описанием в пункте 6.2.1 настоящей главы.

8. РАСЧЕТ

8.1. Жидкие пробы

Содержание 8-хинолин-ола (в % m/m ),

где:

a	-	количество в миллиграммах 8-хинолин-ола на стандартной кривой (7);
m	-	масса (в миллиграммах) испытуемой пробы (6.2.1.1).

8.2. Твердые пробы или кремы

Содержание 8-хинолин-ол (в % m/m),

где:

a	-	количество в миллиграммах 8-хинолин-ола на стандартной кривой (7);
m	-	масса (в миллиграммах) испытуемого образца (6.2.1.1).

9. ПОВТОРЯЕМОСТЬ (№)

При содержании около 0,3% 8-хинолинола разность между результатами двух измерений, выполненных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютного значения 0,02 %.

III. ОПРЕДЕЛЕНИЕ АММИАКА

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод описывает определение свободного аммиака в косметических продуктах.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание аммиака в пробе, определенное в соответствии с этим методом, выражено в процентах массы аммиака.

3. ПРИНЦИП

Раствор хлорида бария добавить к части испытуемого косметического средства, растворенного в водной среде метанола. Любой осадок, который может образоваться, следует профильтровать или центрифугировать. С помощью этой процедуры, в ходе перегонки с паром, можно избежать потери аммиака из некоторых аммониевых солей, таких как карбонат и бикарбонат, гидрокарбонат и соли жирных кислот, за исключением ацетата аммония.

Аммиак из фильтрата или надосадочной жидкости перегнать с водяным паром и определить потенциометрическим титрованием или другим путем.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1. Метанол.

4.2. Барий хлорид дигидрат, 25% (m/v) раствор.

4.3. Орто-борная кислота, 4% (m/v) раствор.

4.4. Серная кислота, 0,25 М стандартный раствор.

4.5. Пеногаситель жидкости.

4.6. Гидроксид натрия, 0,5 М стандартный раствор.

4.7. Индикатор, если необходимо,  смешать 5 мл 0,1% (m/v) раствора  метил красного в этаноле с 2 мл 0,1% (m/v) водного раствора метиленовой синьки.

5. АППАРАТУРА

5.1. Стандартное лабораторное оборудование.

5.2. Центрифуга с пробирками на 100 мл.

5.3. Аппарат для паровой дистилляции.

5.4. Потенциометр.

5.5. Индикаторный стеклянный электрод и электрод сравнения хлорида ртути (каломельный).

6.  ПРОЦЕДУРА

6.1. В 100 мл колбе взвесить массу (m) пробы, соответствующей как максимум 150 mg  аммиака.

6.2. Добавить 10 мл воды, 10 мл метанола (4.1) и 10 мл раствора хлорида бария (4.2). Довести до 100 мл метанолом (4.1).

6.3. Смешать и оставить на ночь в холодильнике (5 ° С).

6.4. Профильтровать или центрифугировать еще холодный раствор в закрытой пробирке в течение 10 минут, чтобы получить прозрачный фильтрат или надосадочную жидкость.

6.5. В паровой перегонный аппарат (5.3) добавить пипеткой 40 мл  прозрачного раствора, а затем 0,5 мл пеногасителя жидкости (4.5).

6.6. Дистиллировать и собирать 200 мл дистиллята в 250 мл стакане, содержащем 10 мл стандартного раствора серной кислоты (4.4) и 0,1 мл индикатора (4.7).