Методы анализа необходимые для проверки состава косметической продукции (III) (стр. 5 )

Ждать 10 минут, затем центрифугировать не менее 15 минут при  4000 г.

  Жидкость супернатант, которая может содержать нерастворимый жир (в случае кремовых изделий), удаляется. Эти жиры не следует путать с тиолами, которые осаждаются в компактную массу на дне пробирки. Убедитесь, что осаждение не происходит при  добавлении нескольких капель  ди(ацетата)кадмия (5.2.2.4) в надосадочную жидкость.

Если раньше идентификация не выявила образования других компонентов, кроме тиолов, их идентифицируют йодометрическим методом, содержание  в поверхностном слое тиолов не должно превышать от 6 до 8% от первоначальной суммы.

В центрифужную пробирку, содержащую осадок, ввести 10 мл метанола (5.2.2.3) и мелкодисперсируют осадок мешалкой. Центрифугировать снова в течение минимум 15 минут на 4000 г. Слить надосадочную жидкость и проверить на отсутствие тиолов.

Осадок промыть второй раз тем же способом.

В ту же центрифужную пробирку добавить:

-	2 мл метилового октаноата (5.2.2.5);

-	5 мл соляной кислоты в метаноле (5.2.2.7).

Полностью растворить тиолы, может остаться немного нерастворимых веществ  из наполнителя. Этот раствор  пометить "S".

С частью этого раствора проверить йодометрически, если полученное  содержание тиолов составляет по меньшей мере 90%, согласно пункту 5.1 настоящей главы.

5.2.5. Метилирование

Метилирование осуществить либо на месте (5.2.5.1), или с предварительно приготовленным раствором диазометана (5.2.5.2).

5.2.5.1.Метилирование на месте

В  аппарат  для метилирования (5.2.3.2), содержащий 1 мл эфира (5.2.2.11), внести  50 µl раствора "S" и метилировать примерно 300 мг 1-метил-3-нитро - 1-нитрозогуанидина (5.2.2.8). Через 15 минут (эфирный раствор должен быть желтым, что указывает на наличие избытка диазометана) раствор пробы перенести в 2 мл флакон с воздухонепроницаемой пробкой. Оставить  на ночь в холодильнике.  Метилировать  две пробы одновременно.

5.2.5.2. Метилирование с предварительно приготовленным раствором диазометана

В 5 мл колбу с пробкой поместить 1 мл раствора диазометана (5.2.2.12), а затем добавить 50 µl раствора "S". Оставить на ночь в холодильнике.

5.2.6. Приготовление стандарта

Приготовить стандартный раствор меркаптоуксусной кислоты (5.2.2.1) с известной концентрацией,  содержащей около 60 мг чистой меркаптоуксусной кислоты (5.2.2.1) в 2 мл.

Этот раствор пометить как «Е».

Осадить, проверить и метилировать, как описано в пунктах 5.2.4 и 5.2.5 настоящей главы.

5.2.7.Условия газовой хроматографии 

5.2.7.1. Колонка

Тип: из нержавеющей стали;

длина: 2 м;

диаметр: 3 мм

5.2.7.2. Наполнение

2% децилфталат сhromosorb, WAW 80 до 100 ячеек.

5.2.7.3. Детектор

Пламенная ионизация. Соответствующая настройка чувствительности для электрометра детектора пламенной ионизации равна:  8 Ч 10 -10 А.

5.2.7.4. Используемые газы

газ-носитель: азот;

давление: 2,2 бар.

скорость потока: 35 мл / мин.

Вспомогательный газ: водород;

давление: 1,8 бар.

скорость потока: 15 мл / мин.

Детектор мощности, как указано производителем устройства.

5.2.7.5. Температурные условия

Инжектор : 200 ° С.

Детектор: 200 ° С.

Колонка: 90 ° С.

5.2.7.6. Диаграмма скорости записи

5 mm / мин.

5.2.7.7. Количество впрыскиваний

3 µl. Произвести 5 впрыскиваний.

5.2.7.8. Хроматографические условия приведены в руководстве. Они позволяют получить разрешение "R" ≥ 1,5, где:

где:

r2 и rl	-время удерживания (в минутах);
W 1и W2	-ширина пика на половине высоты (в миллиметрах);
d '	-скорость (в миллиметрах в минуту).

Рекомендуется, чтобы процесс хроматографии  был прекращен при регулировании температуры от 90 до 150 ° С при 10 ° С в минуту, чтобы исключить возможность влияния лабильных веществ на последующие измерения.

5.2.8. Расчет

5.2.8.1. Коэффициент пропорциональности для меркаптоуксусной кислоты

Данный коэффициент рассчитывается в отношении метил октаноата  на основе стандартной смеси.

Если "t" представляет меркаптоуксусную кислоту,

где:

к t - коэффициент его отклика;

m't - его масса (в миллиграммах) в смеси;

S't  - площадь его пика.

Если "c" метилоктаноат,

где:

m'с - его масса (в миллиграммах) в смеси;

S'с - площадь его пика,

тогда:

Этот коэффициент варьируется в зависимости от используемой аппаратуры.

5.2.8.2. Концентрация меркаптоуксусной кислоты в пробе

Если "t" представляет меркаптоуксусную кислоту,

где:

к t	-	коэффициент его отклика;
S t	-	его площадь пика.

Если "c" метилоктаноат;

где:

mc	-	его масса (в миллиграммах) в смеси;
S с	-	площадь его пика,
М	-	масса (в миллиграммах) в начальной части пробы,

тогда % (m/m), меркаптоуксусной кислоты в пробе:

6. ПОВТОРЯЕМОСТЬ (1)

При содержании меркаптоуксусной кислоты 8% (m/m) разница между результатами двух параллельных определений, проведенных с одной и той же пробой, не должна превышать абсолютного значения 0,8% (m/m).

       VI. ИДЕНТИФИКАЦИЯ И ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГЕКСАХЛОРОФЕНА

А. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод подходит для всех косметических продуктов.

2. ПРИНЦИП

Содержащийся в пробе гексахлорофен  экстрагируется этилацетатом и определяется с помощью тонкослойной хроматографии.

3. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

3.1. Серная кислота, 4 М раствор.

3.2. Целит AW.

3.3. Этилацетат.

3.4. Подвижная фаза: бензол, содержащий 1% (v/v) ледяной уксусной кислоты.

3.5. Реагент для окрашивания I:

Раствор родамина B: 100 мг родамина B растворить в смеси 150 мл диэтилового эфира, 70 мл абсолютного этанола и 16 мл воды.

3.6. Реагент для окрашивания II:

Раствор 2,6-дибром-4- (хлорамин) циклогексил-2,5-dienol: 400 мг 2,6-дибром-4- (хлорамин) циклогексил-2,5-dienol растворить в 100 мл метанола

(ежедневно готовить свежим).

Раствор карбоната натрия: 10г карбоната натрия растворить в 100 мл деминерализованной воды.

3.7. Стандартный раствор:

Гексахлорофен, 0,05% (m/v)  в этилацетате.

4. АППАРАТУРА

4.1. 254 nm УФ пластинки на силикагеле, 200 Ч 200 мм (или эквивалент).

4.2. Стандартное оборудование для тонкослойной хроматографии.

4.3. Терморегулирующая баня на 26 ° С для хроматографической камеры.

5. ПОДГОТОВКА ТЕСТИРУЕМОЙ ПРОБЫ

5,1. Хорошо перемешать 1 г гомогенизированной пробы с 1 г целита AW (3.2) и 1 мл серной кислоты (3.1).

5.2. Сушить два часа при 100 ° С

5.3. Высушенный остаток охладить и измельчить в мелкий порошок.

5.4. Экстрагировать дважды по 10 мл этилацетата (3.3) после каждой экстракции  центрифугировать  и этилацетатные слои объединить.

5.5. Испарять при 60 ° С.

5.6. Осадок растворить в 2 мл этилацетата (3.3).

6. ПРОЦЕДУРА

6.1. На пластину ТСХ (4.1) нанести 2 µl раствора тестируемой пробы (5.6) и 2 µl стандартного раствора (3.7).

6.2. Камеру (4.3) насыщать подвижной фазой (3.4).

6.3. Поставить пластину  в камеру  и  элюировать  до 150 mm.

6.4.Вынуть пластину и сушить в вентилируемой печи при температуре около 105єС

6.5. Окрашивание

Пятна гексахлорофена на пластине ТСХ проявляются как указано в пунктах 6.5.1 или 6.5.2 настоящей главы.

6.5.1. Опрыскать равномерно пластину визуализируемым  агентом I (3.5). Через 30 минут, пластину  рассмотреть при УФ-свете в 254 nm.

6.5.2. Пластину равномерно опрыскать раствором реагента II (3,6) 2,6-дибром-4- (хлоримино) циклогексил-2,5-диенол. Затем пластину опрыскать раствором карбоната натрия (3.6). Проанализировать пластину при дневном свете через 10 минут после сушки  при комнатной температуре.

7. ИНТЕРПРЕТАЦИЯ

7.1. Обнаружение реагентом I (3.5):

Гексахлорофен определяется  голубоватыми пятнами на желто-оранжевом флуоресцентном фоне и имеет Rf-значение приблизительно 0,5.

7.2. Обнаружение реагентом II (3.6):

Гексахлорофен определяется небесно-голубыми бирюзовыми пятнами на белом фоне и имеет Rf-значение приблизительно 0,5.

В. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

1. ПРЕДМЕТ И ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

Этот метод применяется для всех косметических продуктов.

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание гексахлорофена в пробе, определенное этим способом, выражается в процентах массы гексахлорофена.

3. ПРИНЦИП

Гексахлорофен определяется после превращения в метиловое производное, газовой хроматографией с детектором электронного захвата.

4. РЕАГЕНТЫ

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.