Методы анализа необходимые для проверки состава косметической продукции (III) (стр. 4 )

2. ОПРЕДЕЛЕНИЕ

Содержание меркаптоуксусной кислоты в пробе, определяемой в соответствии с этим способом, выражено в процентах  массы меркаптоуксусной кислоты.

3. ПРИНЦИП

Меркаптоуксусная кислота идентифицируется путем анализа тонкослойной хроматографии и определяется йодометрией или газовой хроматографией.

4. ИДЕНТИФИКАЦИЯ

4.1. Идентификация  капельным титом

4.1.1. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

4.1.1.1. Индикаторная бумага с  диацетатом свинца.

4.1.1.2. Раствор соляной кислоты (один объем концентрированной соляной кислоты плюс один  объем воды).

4.1.2. ПРОЦЕДУРА

4.1.2.1. Идентификация меркаптоуксусной кислоты по цветной реакции с ди ацетатом свинца

Одну каплю пробы нанести на бумагу с диацетатом свинца (4.1.1.1). Если появляется интенсивный желтый цвет, то  возможно  наличие меркаптоуксусной кислоты.

Чувствительность: 0,5%.

4.1.2.2. Характеристика неорганических сульфидов с образованием сероводорода при подкислении

В пробирку внести несколько миллиграммов пробы для анализа. Добавить 2 мл дистиллированной воды и 1 мл соляной кислоты (4.1.1.2). Освобождается сульфид, узнаваемый по запаху, а на бумаге с диацетатом свинца (4.1.1.1) образовывается  сульфид  свинца в виде осадка черного цвета.

Чувствительность: 50 ppm.

4.1.2.3. Характеристика сульфитов посредством образования диоксида серы при подкислении

Процедура протекает, в соответствии с пунктом 4.1.2.2. Довести до кипения. Диоксид серы можно распознать по запаху и его восстановительным свойствам, например, по отношению к ионам перманганата.

4.2. Идентификация с помощью тонкослойной хроматографии

4.2.1. Реагенты

Все реагенты, за исключением тех, для которых  указано иное, должны быть аналитической чистоты.

4.2.1.1. Меркаптоуксусная кислота (тиогликолевая кислота), минимум 98% чистоты, определяется йодометрически.

4.2.1.2. 2,2'-дитиодиацетат (уксусной) кислоты, минимум 99% чистоты определяется  йодометрическим методом.

4.2.1.3. 2-меркаптопропионовая кислота (тиомолочная кислота), минимум 95% чистоты, определяется йодометрией.

4.2.1.4. 3-меркаптопропионовая кислота, минимум 98% чистоты, определяется йодометрией.

4.2.1.5. 3-меркаптопропил-1,2-диол(1-тиоглицерин), минимум 98% чистоты, определяется йодометрией.

4.2.1.6. Готовые тонкослойные пластины на силикагеле  толщиной 0,25 мм.

4.2.1.7. Тонкослойные пластины с  оксидом алюминия, Меrck F254 Е или эквивалент.

4.2.1.8. Соляная кислота, концентрированная d204 = 1,19 г / мл.

4.2.1.9. Этилацетат.

4.2.1.10. Хлороформ.

4.2.1.11. Диизопропиловый эфир.

4.2.1.12. Четыреххлористый углерод.

4.2.1.13. Ледяная уксусная кислота.

4.2.1.14. Йодид калия, 1% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.15. Четыреххлористая платина, 0,1% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.16. Подвижные фазы

4.2.1.16.1. Этилацетат (4.2.1.9), хлороформ (4.2.1.10), диизопропиловый эфир (4.2.1.11), уксусная кислота (4.2.1.13) (20: 20: 10: 10 объемов).

4.2.1.16.2. Хлороформ (4.2.1.10),  уксусная кислота (4.2.1.13) (90:20 объемов).

4.2.1.17. Реагенты для обнаружения

4.2.1.17.1. Непосредственно перед использованием смешать равные объемы раствора (4.2.1.14) и растворе (4.2.1.15).

4.2.1.17.2. Раствор брома, 5% (m/v):

5 г брома растворить в 100 мл четыреххлористого углерода (4.2.1.12).

4.2.1.17.3. Раствор флуоресцеина, 0,1% (m/v):

100 мл флуоресцеина растворить в 100 мл этанола.

4.2.1.17.4. Гексааммония гептамолибдат, 10% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.18. Стандартные растворы

4.2.1.18.1. Меркаптоуксусная кислота (4.2.1.1), 0,4% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.18.2. 2,2'-дитиоди(уксусная кислота) (4.2.1.2), 0,4% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.18.3. 2-меркаптопропионовая кислота (4.2.1.3), 0,4% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.18.4. 3-меркаптопропионовая кислота (4.2.1.4), 0,4% (m/v) раствор в воде.

4.2.1.18.5. 3-меркаптопропил-1,2-диол (4.2.1.5), 0,4% (m/v) раствор в воде.

4.2.2. Оборудование

Стандартное оборудование для тонкослойной хроматографии.

4.2.3. Процедура

4.2.3.1. Обработка проб

Подкислить до рН 1  добавлением нескольких капель соляной кислоты (4.2.1.8) и при необходимости, профильтровать.

некоторых случаях желательно разбавить пробу. Для этого, перед разбавлением, подкислить хлористоводородной кислотой.

4.2.3.2. Хроматография

Нанести на пластинку 1 µl раствора пробы (4.2.3.1) и по 1 µl каждого из пяти стандартных растворов (4.2.1.18). Тщательно проcушить в легком потоке азот  элюировать пластину растворителями  (4.2.1.16.1 или 4.2.1.16.2). Просушить пластину как можно быстрее, чтобы минимизировать окисление тиолов.

4.2.3.3. Обнаружение

Опрыскать пластину одним из трех реагентов (4.2.1.17.1, 4.2.1.17.3 или 4.2.1.17.4). Если пластину опрыскать реагентом (4.2.1.17.3), затем ее  необходимо обрабатывать парами  брома (например, в емкости с небольшим стаканом реагента (4.2.1.17.2) до тех пор, пока появятся пятна. Обнаружение посредством распыления реагента  (4.2.1.17.4) будет удовлетворительным только если время высыхания слоя пленки составит не более 30 минут.

4.2.3.4. ИНТЕРПРЕТАЦИЯ

Сравнивать Rf значения и цвет стандартных растворов со значениями пробы. Средние Rf значения, представленные ниже для информации, имеют смысл  только  для сравнения.  Они зависят от:

-	- степени активации тонкого слоя на момент хроматографии;

-	- температуры хроматографического термостата.

Примеры R f  значений, полученных на слое силикагеля

	Растворители элюирования
4.2.1.16.1	4.2.1.16.2
Меркаптоуксусная кислота	0,25	0,80
2-меркаптопропионовая кислота	0,40	0,95
2,2-дитиоди(уксусная) кислота,	0,00	0,35
3-меркаптопропионовая кислота	0,45	0,95
3-меркаптопропил-1,2-диол	0,45	0,35

5. ОПРЕДЕЛЕНИЕ (№)

Определение всегда должно начинаться с йодометрической процедуры.

5.1. Йодометрия

5.1.1. Принцип

Определение выполняется путем окисления группы "-SH"  йодом в кислой среде в соответствии с уравнением:

2 HOOC - CH2SH + I2 → (HOOC - CH2 - S)2 + 2I– + 2H+

5.1.2. Реагенты

Йод, 0,05 М стандартный раствор.

5.1.3. Оборудование

Стандартное лабораторное оборудование.

5.1.4. Процедура

В 150 мл конической колбе с притертой пробкой, содержащей 50 мл дистиллированной воды, взвесить точно от 0,5 до 1 г образца. Добавить 5 мл соляной кислоты (4.1.1.2) (рН раствора  около 0) и титровать раствором йода (5.1.2) до желтого цвета в присутствии индикатора крахмала.

5.1.5. Расчет

Содержание меркаптоуксусной кислоты рассчитывается по формуле:

,

где:

m	-	масса (в граммах) пробы,
n	-	объем раствора йода (5.1.2).

5.1.6. Примечание

Если результат рассчитан для меркаптоуксусной кислоты с содержанием 0,1% или ниже минимальной концентрации, проведение дальнейших определений не является необходимым. Если результат равен или больше, чем минимально допустимая концентрация, и определение показало наличие нескольких восстановителей, необходимо провести определение газовой хроматографией.

5.2. Газовая хроматография

5.2.1. Принцип

Меркаптоуксусную кислоту отделить от наполнителя путем осаждения диацетатом кадмия. После метилирования с диазометаном, полученное на месте или заранее в растворе диэтилового эфира метил производное меркаптоуксусной кислоты измеряют газожидкостной хроматографией, используя в качестве внутреннего стандарта метиловый октаноат.

5.2.2. Реагенты

Все реагенты должны быть аналитической чистоты.

5.2.2.1. Меркаптоуксусная кислота, 98%.

5.2.2.2. Соляная кислота, d204 = 1,19 г / мл.

5.2.2.3. Метанол.

5.2.2.4. Кадмий ди(ацетат) дигидрат, 10% (m/v) раствор в воде.

5.2.2.5. Метил октаноат, 2% (m/v) раствор в метаноле.

5.2.2.6. Ацетатный буфер  (рН 5)

Ацетат натрия тригидрат, 77 г.

Ледяная уксусная кислота, 27,5 г.

Деминерализованная вода, для получения конечного объема в один литр.

5.2.2.7. Соляная кислота, 3 М раствор в метаноле (5.2.2.3), свежеприготовленный.

5.2.2.8. 1-метил-3-нитро-1-нитрозогуанидин.

5.2.2.9. Гидроксид натрия, 5 М раствор.

5.2.2.10. Йод, 0,05 М стандартный раствор.

5.2.2.11. Диэтиловый эфир.

5.2.2.12. Раствор диазометана, полученный из N-метил-N-nitrosotoluen-4-сульфонамида [Физер, реагенты для органического синтеза (Wiley), 1967]

Полученный раствор содержит около 1,5 г диазометана в 100 мл диэтилового эфира. Диазометан очень токсичный и неустойчивый газ, поэтому все эксперименты должны быть выполнены под вытяжным шкафом, избегая использования оборудования из стекла с притертой пробкой (для этого существуют специальные наборы).

5.2.3. Оборудование

5.2.3.1. Стандартное лабораторное оборудование.

5.2.3.2. Оборудование для подготовки диазометана  метилированием на месте (см Фалес, NM, Jaouni, TM и Babashak, JF, Аnalyt. Chem 1973, 45, 2302).

5.2.3.3. Аппаратура для заблаговременной подготовки диазометана (Fieser).

5.2.4. Подготовка пробы

В центрифужной пробирке на 50 мл взвесить достаточное количество пробы, чтобы получить намеченное количество от 50 до 70 мг меркаптоуксусной кислоты. Подкислить несколькими каплями соляной кислоты (5.2.2.2) с получением рН около 3.

Добавить 5 мл деминерализованной воды и 10 мл ацетатного буферного раствора (5.2.2.6).

Использовать индикаторную бумагу, подтверждающую значение рН (должно быть 5). Затем добавить 5 мл  ди(ацетата)  кадмия(5.2.2.4).