Микроэкологические нарушения у матери и ребенка: диагностика, прогностическое значение (стр. 2 )

·  Впервые показана связь между состоянием кишечного микробиоценоза матери с общим содержанием SIgA в грудном молоке. Матери с дефицитом индигенных бактерий (бифидобактерий, лактобактерий) в кишечнике имеют достоверно более низкое содержание SIgA в грудном молоке, чем женщины с нормальным составом кишечной микрофлоры.

·  В работе впервые получены данные о содержании в грудном молоке SIgA к антигенам различных УПМ и эндотоксину и дана оценка их влияния на состав КМФ ребенка. Доказано, что антмикробные SIgA грудного молока не выполняют функцию «иммунного исключения» по отношению условно-патогенным и синбиотическими микроорганизмам. Антиэндотоксиновые антитела грудного молока «регулируют» популяционный уровень эшерихиозной флоры, а антистрептококковые SIgA– кишечных энтерококков у ребенка.

·  Впервые дана оценка информативности метода определения эндотоксина по формированию фракталов в моче для экспресс-диагностики бактериурии, обусловленной грамотрицательной микрофлорой, являющейся критерием декомпенсированных форм дисбактериоза кишечника. Выявлено, что при концентрации обнаруживаемого в моче эндотоксина ≥1/140 тест имеет высокую чувствительность (81,8%) и специфичность (98,2%).

Практическая значимость

Разработаны региональные нормативные показатели состава кишечной микрофлоры для детей в возрасте до 1 года и от 1 до 2 лет жизни, позволяющие оптимизировать диагностику дисбиотических нарушений в данной возрастной группе.

Данные о видовом составе, антибиотикорезистентности и антагонистической активности кишечных лактобацилл позволят оптимизировать пробиотическую коррекцию нарушений лактофлоры и подобрать «щадящий» режим антибактериальной терапии инфекционных заболеваний у детей грудного возраста. Клинические изоляты лактобацилл, имеющие высокую антагонистическую активность в отношении отдельных видов УПМ, являются кандидатными для создания новых пробиотических препаратов.

Результаты исследований состава КМФ у детей при различном способе родоразрешения и данные о более высоком риске развития отдельных заболеваний детского возраста у детей, рожденных путем кесарева сечения, являются обоснованием проведения у них коррегирующей пробиотической терапии с момента рождения.

Данные о влиянии микрофлоры матери на состав формирующегося кишечного микробиоценоза ребенка, а также на общий уровень SIgA грудного молока, свидетельствуют о необходимости исследования состава микробиоценозов матери и коррекции, выявляемых у неё микроэкологических нарушений, в случаях развития у ребенка клинически выраженных форм дисбактериоза кишечника.

Высокая информативность полуколичественного экспресс-метода выявления эндотоксина (ЛПС грамотрицательных бактерий) в моче определяет перспективность его использования для обследования больных с декомпенсированным дисбактериозом кишечника и инфекцией мочевых путей.

Положения, выносимые на защиту

1.  Развитие кишечной микробиоты у здорового ребенка в постнеонатальном периоде происходит в 3 этапа: «младенческий» (от 1 месяца до 1 года), «переходный» (от 1 года до 2 лет) и этап «взрослой микробиоты» (старше 2 лет), для каждого из которых характерен определённый состав кишечной микрофлоры. Колонизация условно-патогенными микроорганизмами кишечника детей грудного возраста является естественным и биологически целесообразным явлением в формирования кишечной микробиоты человека.

2.  Для каждого ребенка грудного возраста характерен индивидуальный профиль качественного и количественного состава кишечной микробиоты. Характер колонизации толстой кишки, длительность постнеонатального развития кишечной микрофлоры и клинические проявления дисбактериоза кишечника у детей зависят от способа родов.

3.  Микрофлора матери оказывает существенное влияние на процесс постнеонатального развития кишечной микробиоты ребенка. Различные варианты нарушения состава микробиоценозов матери в период грудного вскармливания имеют разное прогностическое значение для состава кишечной микрофлоры ребенка. Имеется связь между состоянием кишечного микробиоценоза матери и общим содержанием SIgA в грудном молоке.

4.  Метод определения эндотоксина по формированию фракталов с использованием ЛАЛ-реагента является высокоинформативным для экспресс-диагностики Гр-бактериурии

Личное участие диссертанта в получении научных результатов, изложенных в работе

Личное участие автора выразилось в предложении основной идеи исследования, выработке методологии и методов его выполнения. Автором непосредственно проводился отбор пациентов для включения в исследование и разработка программы обследования. Автор принимал непосредственное участие в процессе клинических и лабораторных исследований, а также произвел статистическую обработку и анализ всего клинического материала.

В работу вошли результаты исследований, проведенных совместно с , , ПЦР идентификация представителей рода Lactobacillus была проведена совместно с н. с. (лаборатория генетики вирулентности бактерий НИИЭМ им. (Москва)).

Апробация работы

Материалы диссертации обсуждены и доложены на Всероссийской конференции «Новые технологии в терапии и профилактике инфекционных заболеваний у детей» (Санкт-Петербург, 2000); Юбилейной научно-практической конференции, посвященной 70-летию кафедры детских инфекционных болезней КГМУ (Казань, 2002 г.); Городской научно-практической конференции «Диагностика и лечение кишечных инфекций и дисбактериозов у детей» (Казань, 2003); I, II, III, IV, V, VII межрегиональной научно-практической конференции «Педиатрия и детская хирургия в Приволжском федеральном округе», (Казань, 2004, 2005, 2006, 2007, 2008, 2010); Юбилейной научно-практической конференции, посвященной памяти заведующих кафедрой инфекционных болезней КГМУ (Казань, 2007); VIII конгрессе детских инфекционистов России «Актуальные вопросы инфекционной патологии и вакцинопрофилактики у детей» (Москва, 2009); II Ежегодном Всероссийском конгрессе по инфекционным болезням (Москва 2009), XII международном конгрессе по антимикробной терапии МАКМАХ/ESCMID (Москва, 2010), III Ежегодном Всероссийском конгрессе по инфекционным болезням (Москва, 2011). Всего по материалам диссертации сделано 13 докладов, в том числе: 1 – международного и 11 – федерального уровня.

Внедрение результатов диссертационной работы в практику

Результаты исследования внедрены в практическую работу Республиканской инфекционной клинической больницы, Республиканской детской клинической больницы, детских поликлиник и больниц г. Казани. Теоретические положения и практические рекомендации включены в учебный процесс на кафедре детских инфекций, кафедре пропедевтики детских болезней и факультетской педиатрии с курсом детских болезней лечебного факультета, кафедре госпитальной педиатрии с курсами поликлинической педиатрии и последипломного образования Казанского государственного медицинского университета по теме: «Кишечная микрофлора и её роль в физиологии и патологии ребенка».

В 2004 году в составе научной группы выигран Грант фонда Научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ АН РТ и проведены научные исследования по теме «Стафилококковая инфекция у детей раннего возраста, прогнозирование тяжести и исходов» (Госконтракт № 03-3.5-181/2004). В 2006 в составе научной группы выигран Грант фонда Научно-исследовательских и опытно-конструкторских работ АН РТ и проведены научные исследования по теме: «Этапы формирования кишечного микробиоценоза у детей раннего возраста и влияние микрофлоры матери на него в период грудного вскармливания» (Госконтракт № 03-3.2-35/2006г.).

По материалам исследования изданы 3 учебно-методических пособия и написано 1 информационное письмо:

1.  Николаева микробиоценоз у детей в норме и при патологии: Методическое пособие для слушателей послевузовского и дополнительного профессионального образования / , // – Казань: КГМУ, 2010. – 35 с.

2.  Николаева дисбактериоза кишечника у детей: Методическое пособие для слушателей послевузовского и дополнительного профессионального образования / , // – Казань: КГМУ, 2010. – 23 с.

3.  Сафина -диагностика грамотрицательной бактериурии Методические рекомендации для врачей – лаборантов / , , // – 2010 г. – 23 с.

4.  Информационное письмо Министерства здравоохранения Республики Татарстан от 01.01.2001 № 09-01/2217 «О диагностике дисбактериоза кишечника у детей»

Публикации

По результатам исследования опубликовано 51 научная работа, в том числе 11 - в журналах, рекомендованных экспертным советом ВАК по медицине для опубликования результатов исследований по докторским диссертациям.

Структура и объем диссертации

Диссертационная работа изложена на 257 страницах машинописного текста и включает введение, аналитический обзор литературы, характеристику материалов и методов исследования, 6 глав, содержащие изложение собственного материала, заключение, выводы, практические рекомендации, список литературы. Текст иллюстрирован 94 таблицами, 2 рисунками и 7 графиками. Список литературы включает 417 источников (отечественных 104, зарубежных 313).

СОДЕРЖАНИЕ РАБОТЫ

Материалы и методы исследований. Работа выполнена на базе кафедры детских инфекций ГОУ ВПО "Казанский государственный медицинский университет", ГУ НИИ микробиологии и эпидемиологии им. РАМН, ЦНИЛ Казанской государственной медицинской академии, Республиканской инфекционной клинической больницы, детской поликлиники № 3 г. Казани, Детской республиканской клинической больницы, Республиканской клинической больницы. Исследования проводились с 2004 г. по 2010 г. Всего обследованы 502 ребенка в возрасте от 1 месяца до 3 лет и 815 матерей (таблица 1). Число мальчиков составило %), девочек – 260 человек (52%).

Общие критерии включения в исследования детей:

·  гестационный срок при рождении 38-41 неделя,

·  масса гр.,