Клинико-экспериментальное обоснование использования методов экстракорпоральной гемокоррекции в сочетании с традиционной терапией при хирургическом сепсисе у собак (стр. 3 )

2.2 Результаты исследований

2.2.1 Особенности подготовки и проведения экстракорпоральной гемокоррекции у собак

Исследования проведены на 10 беспордных собаках живой массой 10,4± 2,60 кг, в возрасте 2-6 лет.

В процессе эксперимента процедуры гемосорбции у собак (n=5) и плазмафереза (n=5) проводили через один венозный доступ, при этом пунктировали подкожную вену предплечья, устанавливали браунюлю 18-20G. При проведении гемосорбции нами использовался гемосорбент марки СКН-1к-100, перфузию крови через колонку осуществляли при помощи перфузионного насоса ГЕМОС в объёме не менее 2-3 ОЦК.

Для проведения мембранного плазмафереза мы использовали плазмафильтры типа «РОСА» с элиминацией 1/3 ОЦП и последующим восполнением дефицита ОЦП кристаллоидными и коллоидными растворами и в объеме эксфузиии с элиминацией 50% ОЦП, с восполнением донорской плазмой. Перед проведением гемосорбции и плазмафереза проводили стабилизацию гемодинамических показателей, адекватную гемодилюцию и гепаринизацию пациентов.

В процессе проведенных исследованиий нами установлено, что сеансы гемосорбции и плазмафереза у собак, проводимые через один венозный доступ с установкой браунюли 18-20G в подкожную вену предплечья с использованием гемосорбента СКН-1к-100 для гемосорбции и плазмафильтров «РОСА» для плазмафереза, не вызывают каких-либо гемодинамических расстройств. Полученные в ходе проведенной работы результаты могут явиться основанием для широкого внедрения в практику ветеринарных клиник устройств для экстракорпоральной детоксикации организма животных. Курс лечения при абдоминальном сепсисе у собак включал от 2 до 5 процедур с интервалом 1-2 дня. По показаниям, кроме донорской плазмы, в количестве 30-40% объема удаляемой плазмы, переливали синтетические коллоиды (рефортан, волювен, стабизол и др.), а также изотонические кристаллоиды.

2.2.2 Разработка и совершенствование методов лечения экспериментального абдоминального сепсиса у собак с использованием методов экстракорпоральной гемокоррекции

Исследования проведены на 25 собаках 1-5-летнего возраста с экспериментальным генерализованным гнойным перитонитом и сепсисом.

Экспериментальным животным согласно схемы опытов через 24 часа после воспроизведения перитонита было произведено радикальное хирургическое вмешательство, заключавшееся в устранении причины (лапаротомия, ушивание перфоративной раны кишечника, аспирация содержимого брюшной полости).

У собак первой опытной группы оперативное лечение экспериментального перфоративного перитонита и сепсиса осуществляли на фоне выполнения надплевральной новокаиновой блокады по методу , в послеоперационном периоде проводилось консервативное лечение (инфузии подогретых коллоидных и кристаллоидных растворов, максицеф 50 мг/кг внутривенно, стимуляция диуреза лазиксом 2-8 мг/кг).

Собакам второй, третей и четвертой опытных групп в течение первых суток в состав комплексной терапии вводили гемосорбцию или плазмаферез. Критериями улучшения являлись стабилизация общего состояния, нормализация температуры тела и картины крови, а именно снижение уровней прокальцитонина, фактора некоза опухоли и С-реактивного белка.

Животнымвторой опытной группы (n = 5) проводилась гемосорбция. При этом использовался углеродный гемосорбент марки СКН-1к-100, через сорбционную колонку пропускали по 2-3 ОЦК. Собакам третьей опытной группы (n = 5) был проведен мембранный плазмаферез с использованием плазмафильтров типа «РОСА» (по 3-5 сеансов) с элиминацией 1/3 ОЦП и восполнением коллоидными растворами. Собакам четвертой опытной группы (n = 5) был так же проведён мембранный плазмаферез с использованием плазмафильтров типа «РОСА» ( по 3-5 сеансов) с элиминацией 50% ОЦП и восполнением дефицита ОЦП донорской плазмой и введением антибактериального препарата в вену возврата.

2.2.3 Течение абдоминального сепсиса у собак контрольной группы

По результатам наблюдения за собаками контрольной группы после операции по ушиванию раны кишечника, а так же по результатам инструментальных и лабораторных исследований устанавливался диагноз – разлитой экссудативный перитонит и сепсис. При поведении оперативного приема у собак контрольной группы отмечалось зияние искусственно созданного перфорационного отверстия, края его сильно гиперемированы и отечны. Сосуды серозной оболочки органов брюшной полости и её стенок кровенаполнены, в брюшной полости имелось незначительное количество серозно-фибринозного или гнойного экссудата. На серозной оболочке кишки и на брыжейке отмечались как наложения фибрина, так и кровоизлияния. Микроскопически в области перфорации стенки кишки выявлялась её диффузная лейкоцитарная инфильтрация с явлениями кариорексиса в клетках и примесью кишечной микрофлоры, проникающей до слизистой оболочки.

Вокруг повреждения кишечной стенки отмечались множественные кровоизлияния, выпот фибрина, наличие очагов некроза. Во всех случаях развитие заболевания сопровождалось увеличением мезентериальных лимфатических узлов. Патоморфологические изменения в сосудах брыжейки кишечника характеризовались их кровенаполнением, краевым стоянием лейкоцитов, диффузной полиморфноклеточной инфильтрацией соединительнотканной основы брыжейки с явлением кариорексиса в клетках. В увеличенных мезентериальных лимфатических узлах происходит развитие фолликулярной гиперплазии с серозным отёком тканей.

Внутренние полые органы брюшной полости находились в состоянии пареза, для которого характерны дряблость и растянутость стенок, ослабление моторной деятельности.

В последующие дни состояние у 2 собак становилось тяжелым, отмечалась лихорадка (41,4 С), отказ от корма, жажда, рвота и собаки пали на 5 и 7 сутки. У трех собак с 10-х суток общее состояние, температура тела, частота пульса и дыхания возвращались в полосу нормальных значений. Болезненность и напряженность брюшной стенки постепенно уменьшались. Постепенно нормализовались гематологические показатели и к 21-м суткам наблюдения они соответствовали физиологическим величинам.

В периферической крови больных животных отмечали выраженный лейкоцитоз (27,92±1,38х109/л) при относительной лимфопении (16,8±2,10%), отмечалось увеличение процента палочкоядерных нейтрофилов с 8,0±0,90% до 40,4±1,80%. Проведенными биохимическими исследованиями установлено, что снижение уровня общего белка до 53,4±2,10 г/л, повышение активности АЛТ (до 59,2±0,72 ммоль л/ч) и АСТ до 71,4±0,32 ммоль л/ч), повышениеобщего билирубина (до 19,7±0,96 мкмоль/л), мочевины (до 14,9±2,04 ммоль/л) и креатинина (до 172,2±3,8 мкмоль/л) отмечалось только на третьи сутки эксперимента, тогда как достоверное увеличение прокальцитонина (до 29,6±0,89 нг\мл), С-реактивного белка (до 270,2±2,7 мг/л) и фактора некроза опухоли (до 19,35±1,31 пг/л) мы регистрировали уже в первые сутки после ушивания раны кишечника.

Высокий уровень летальности при абдоминальном сепсисе у собак (40% в контрольной группе) обусловлен комплексом патологических изменений, которые происходят в организме в результате стресса, болевой реакции, нарушения микроциркуляции в тканях, массивного выхода в кровоток различных токсинов, в том числе продуктов распада поврежденных тканей и развития эндогенной интоксикации (ЭИ). Маркерами ранней диагностики сепсиса, а так же маркерами тяжести эндогенной интоксикации нами были приняты такие показатели как уровень прокальцитонина (ПКТ), С - реактивного белка (СРБ) и фактор некроза опухолей (ФНО). В норме концентрация ПКТ в плазме составляет менее 0,1 нг/мл. При локальных бактериальных инфекциях без системных проявлений уровень ПКТ возрастает незначительно (0,3 – 1,5 нг/мл). Уровни ПКТ выше 10 нг/мл наблюдается почти исключительно у пациентов с тяжелым сепсисом или септическим шоком, что мы отмечали у собак контрольной группы. Уже к первым суткам наблюдения уровень прокальцитонина составлял 29,7±0,89 нг/мл.

С-реактивный белок (СРБ) относят к основным белкам острой фазы воспаленияи его концентрация быстро изменяется при усилении или при уменьшении тяжести воспаления. Максимальное повышение показателя у собак контрольной гуппы до 270,2±2,72 и 420,5±1,83 мг/л мы отмечали на первые и третьи сутки после моделирования перфоративного перитонита.

Фактор некроза опухоли (ФНО) открыт в 1975 г. и назван так по своему основному биологическому эффекту - способности оказывать цитотоксическое действие на опухолевую клетку в условиях invivo. В сыворотке крови здоровых животных ФНО практически не определяется. Его уровень возрастает при инфицировании, поступлении в организм бактериальных эндотоксинов. Пик показателя у собак контрольной группы зафиксирован нами на 3-и сутки эксперимента и составил 20,2±0,91 пг/л.

Клиническое выздоровление собак контрольной группы наступало к 20,6±1,45 суткам наблюдения.

Полученные результаты исследований свидетельствуют о многообразии факторов развития сложной цепи патологических явлений в организме собак при абдоминальном сепсисе и сильнейшей эндогенной интоксикации уже в первые сутки заболевания, что обуславливает низкую выживаемость животных и необходимость использования в качестве маркеров ранней диагностики сеписа таких, как прокальцитонин, С-реактивный белок и фактор некроза опухолей, а так же являются основанием для разработки эффективных терапевтических мероприятий, направленных на купирование воспалительного процесса, профилактику развития септического шока и ПОН.

2.2.4 Течение абдоминального сепсиса у собак на фоне выполнения надплевральной новокаиновой блокады

Клинико-гематологические наблюдения за 5 собаками, у которых ушивание раны кишечника проводили на фоне надплевральной новокаиновой блокады чревных нервов и пограничных симпатических стволов по методу , свидетельствуют о том, что после ушивания раны кишечника, санации брюшной полости, общее состояние у 4 собак нормализовалось. Перед выполнением оперативного вмешательства по ушиванию перфоративной раны кишки в периферической крови больных животных отмечали выраженный лейкоцитоз (31,6±2,92х109/л) при относительной лимфопении (18,9±1,12%), существенное увеличение процента эозинофилов и клеток моноцитарного ряда, что характерно для стресса и острого воспалительного процесса.

Проведенными биохимическими исследованиями установлено, что уровень общего белка в течение всего эксперимента изменялся незначительно. Пиковые значения АСТ (70,9±1,12 ммоль л/ч), АЛТ (69,8±2,14ммоль л/ч), мочевины (14,0±0,34ммоль/л) и креатинина (170,2±1,45мкмоль/л) отмечены на третьи сутки, тогда как уровни прокальцитонина (17,6±1,05нг/мл), С-реактивного протеина (342,2±2,94мг/л) и фактора некроза опухоли (21,6±0,92 пг/л) нами регистрировались уже в первые сутки после операции.