Research report (стр. 3 )

Table 1

Basic data for each patient, recorded during the study

№	History of the disease and physical examination, including height and weight
1. A standardized questionnaire _ patient complaints GSRS	questionnaire to conduct surveys to identify the patient's complaints on major organ systems, quality of life of patients with gastrointestinal
2. The visual analog scale (VAS)	pain intensity assessment / abdominal discomfort
Study of psycho-emotional sphere	Definition of levels of depression, personal and reactive anxiety, asthenia
Quality of Life Questionnaire SF-36	Determination of the physical and psychological components of health
The vital signs	systolic and diastolic blood pressure, heart rate
6. Electrogastrogram	undertake certain electrical activity of the stomach, duodenum, small intestine and colon; total electric power gastrointestinal tract and its departments, the coefficient of rhythmicity of each department.
Генетический анализ	Проводится оценка полиморфизма гена транспортера серотонина
Клинический анализ крови	Основные показатели клинического анализа крови.
Анализ мочи (диагностические тест - полоски)	Удельный вес, рН, глюкоза, белок, кетоны, нитриты, билирубин, уробилиноген, кровь, лейкоциты
Биохимический анализ крови	Общий белок крови, мочевина, креатинин, K, Mg, Na, Ca, Fe, P, холестерин, глюкоза, АЛТ, АСТ, билирубин
Анализ кала	Копрограмма
Тест на беременность	Для женщин, потенциально способных к деторождению, отрицательный результат теста на беременность по определению ХГЧ в моче должен быть подтверждён не менее чем за 24 ч до применения первой дозы
Анализ кала на дисбиоз	Проводится исследование для определения уровня основных представителей микрофлоры (10 семейств)  методом определения «ПЦР в реальном времени»

Таблица 2

График клинических и лабораторных обследований пациентов

Визит Дни / Недели	Скриниг -7/-1	В1 0/0	В2 21/3	В3 35/5
Интервал (дни)	0	0	±2	±2
Стандартизированный расспрос	Х	Х	Х
Оценка психоэмоцильнального статуса	Х	Х	Х
Оценка качества жизни	Х	Х	Х
Оценка по шкале ВАШ	Х	Х	Х
Оценка физикальных данных	Х	Х	Х
Биохимический анализ крови	Х	Х
Анализ мочи	Х	Х
Тест на беременность*	Х	Х
Электрогастроэнтерография	Х	Х
Генетический анализ крови (полиморфизм гена серотонина)	Х
Определение уровня серотонина в плазме крови	Х	Х
Анализ кала на дисбиоз методом ПЦР	Х	Х
Выдача препарата	Х
Оценка нежелательных явлений**	Х	Х	Х

* для женщин детородного возраста ** Карта регистрации нежелательных явлений

Расспрос пациентов был стандартизирован. В расспросе уделяли большое внимание характеру гастроэнтерологических жалоб, частоте и качеству стула. Унифицированная карта расспроса пациентов приведена в Приложении 1, опросник GSRS представлен в Приложении 2.

Оценка выраженности болевого синдрома с помощью визуально-аналоговой шкалы

Выраженность болевого синдрома и/или дискомфорта в животе у пациентов оценивалась с помощью ВАШ, на которой пациенты на 10-сантиметровой линии отмечали поперечной чертой выраженность болей и/или дискомфорта в животе.

Клинический анализ крови проводился с определением гемоглобина, содержания эритроцитов, лейкоцитов, лейкоцитарной формулы, тромбоцитов, цветового показателя. Исследование выполнялось по общепринятым методикам. Нормативные данные для клинического анализа крови представлены в Приложении 3.

Биохимические показатели крови оценивали на приборе «Спектрум» фирмы «Abbot» и аппарате «Technicon». Содержание глюкозы крови оценивали с помощью глюкозооксидазного метода по окислению фенолфталеина. Референтные значения для биохимических показателей крови представлены в Приложении 4.

Анализ мочи выполнялся с помощью диагностической тест – полоски Combur 10 test UX фирмы Roche Diagnostics GmbH.

Исследование кала: субъективная оценка пациентами формы стула по Бристольской шкале форм стула (Приложение 5) и анализ копрограммы (нормальные значения копрограммы представлены в Приложении 6).

Генетический анализ – оценка полиморфизма гена серотонина SLC6A4

Определение полиморфизма гена транспортера серотонина SLC6A4 осуществлялось в образцах ДНК выделенных из лейкоцитов крови с помощью наборов «ГС-Генетика» («ДНК-технология»). ПЦР осуществляли с помощью двухпраймерной системы (праймеры синтезированы в НПФ «Бигль»). Использовались праймеры:

Прямой  5’-GGCGTTGCCGCTCTGAATGC -3’

Обратный  5’-GAGGGACTGAGCTGGACAACCAC -3’

Реакционная смесь для ПЦР состояла из следующих компонентов: деионизированная вода 5,2 мкл, буфер 10-кратный («СибЭнзим») 1,0 мкл, dNTP (5 мМ) 1,0 мкл, праймеры по 4 пМ, Taq-полимераза («СибЭнзим») 1 ед.

Для амплификации специфических фрагментов в реакционную смесь добавляли ≈100 нг (2-3 мкл) ДНК и использовали следующий температурный режим ПЦР на термоциклере:

95 – 5 мин	1 цикл
94 – 30 сек	40 циклов
56 – 30 сек
72 – 45 сек
72 – 5 мин	1 цикл

Наличие полиморфизма, обусловливающего выпадение 44 п. о., визуализируется в проходящем ультрафиолетовом свете как фрагменты ПЦР разной длины: 529 («l» аллель) и 485 («s» аллель) п. о.

По полиморфизму 5-HTTLPR гена SLC6A4 определяли следующие генотипы: гомозиготный генотип по нормальному аллелю (wild type), гомозиготный генотип (mutant type) и гетерозиготный генотип.

Исследование моторно-эвакуаторной функции желудочно-кишечного тракта методом электрогастроэнтерографии с помощью прибора «Гастроэнтеромонитор ГЭМ-01 ("Гастроскан-ГЭМ")». Периферическая компьютерная ЭГЭГ является методом оценки электрической активности различных отделов ЖКТ. Периферическая ЭГЭГ не инвазивна, не имеет противопоказаний и хорошо переносится всеми больными.

На основании данных, полученных при проведении ЭГЭГ, оцениваются следующие показатели:

суммарный уровень электрической активности ЖКТ; уровень электрической активности по каждому из обследуемых отделов ЖКТ;

Стандартное исследование проводилось натощак. После курса терапии исследование повторялось, и оценивалась динамика базальных показателей электрической активности ЖКТ.

Для оценки моторной активности ЖКТ после пищевой нагрузки рассчитывался специальный коэффициент, равный отношению постпрандиальной суммарной МЭА к тощаковой суммарной МЭА ЖКТ (постпрандиальный коэффициент – ППК).

Оценка качественного и количественного состава микрофлоры кишечника. Исследование проводилось с использованием метода ПЦР – real-time «КОЛОНОФЛОР-16» (Приложение 7).

Оценка качества жизни пациента выполнена с помощью опросника SF-36 (Приложение 8). Количественная оценка проводилась по следующим показателям:

Физическое функционирование, отражающее степень, в которой физическое состояние ограничивает выполнение физических нагрузок (самообслуживание, ходьба, подъем по лестнице, переноска тяжестей и т. п.). Низкие показатели по этой шкале свидетельствуют о том, что физическая активность пациента значительно ограничивается состоянием его здоровья.

Ролевое функционирование, обусловленное физическим состоянием – влияние физического состояния на повседневную ролевую деятельность (работу, выполнение повседневных обязанностей). Низкие показатели по этой шкале свидетельствуют о том, что повседневная деятельность значительно ограничена физическим состоянием пациента.

Интенсивность боли и ее влияние на способность заниматься повседневной деятельностью, включая работу по дому и вне дома. Низкие показатели по этой шкале свидетельствуют о том, что боль значительно ограничивает активность пациента.

Общее состояние здоровья - оценка больным своего состояния здоровья в настоящий момент и перспектив лечения. Чем ниже бала по этой шкале, тем ниже оценка состояния здоровья.

Жизненная активность подразумевает ощущение себя полным сил и энергии или, напротив, обессиленным. Низкие баллы свидетельствуют об утомлении пациента, снижении жизненной активности.

Социальное функционирование определяется степенью, в которой физическое или эмоциональное состояние ограничивает социальную активность (общение). Низкие баллы свидетельствуют о значительном ограничении социальных контактов, снижении уровня общения в связи с ухудшением физического и эмоционального состояния.