Методическое пособие к лабораторно - практическим занятиям (стр. 14 )

В12 (фолиево) - дефицитные анемии обусловлены недостатком специфических факторов кроветворения: витамина В12 и фолиевой кислоты, необходимых для нормального нормоблстического эритропоэза. При недостатке этих факторов нарушается синтез ДНК и РНК в ядре эритробластов, задерживается деление клеток и созревание эритроцитов. Возникает патологический, близкий к эмбриональному мегалобластический тип кроветворения. В периферической крови появляются крупные мегалоцты (гигантские клетки), сильно насыщенные гемоглобином, и более молодые формы - мегалобласты, содержащие ядро. Эти клетки менее устойчивы, чем нормальные эритроциты, и легко подвергаются гемолизу, что усугубляет анемию.

Мегалобластические анемии относятся к анемиям гипехромным с цветным показателем выше единицы (1,3-1,5). Гиперхромия возникает вследствие того, что гемоглобинизация мегалобластов идет значительно быстрее, чем созревание ядра. Общее содержание гемоглобина в крови падает, так как значительно снижается количество эритроцитов. Помимо мегалоцтов и мегалобластов, в крови обнаруживаются различные дегенеративные формы эритроцитов: пойкилоциты, эритроциты с тельцами Жолли, кольцами Кебота и базофильной зернистостью. Отмечается лейкопения и тромбоцитопения.

Основными причинами мегалобластических анемий являются нарушение всасывания и усвоения или повышенное расходование витамина В12 и фолиевой кислоты, реже - недостаточное их поступление с пищей

Витамин В12 и фолиевая кислота плохо усваиваются при различных поражениях тонкого кишечника (пеллагра, резекция тонкой кишки, ин­вазия широкого лентеца).

Гипопластические или апластические анемии возникают в результате токсического действия патогенных факторов на костномозговое кроветворение. Основными причинами гипо - и апластических анемий являются:

1) токсическое действие химических веществ (бензол, соединения свинца, цитостатические препараты: миелосан, эмбихин и др.); 2) действие ионизирующей радиации; 3) длительное применение некоторых лекарственных препаратов (сульфаниламиды, амидопирин, хлормицетин); 4) истощающие инфекции с поражением костного мозга (туберкулезная интоксикация, сепсис); 5) лейкозы, метастазы злокачественных опухолей в костный мозг.

Анемии наблюдаются при недостаточной продукции эритропоэтинов (заболевания почек) или гормонов гипофиза (АКТГ, СТГ) и надпочечников (глюкокортикоиды), которые косвенно участвуют в эритропоэзе, регулируя синтез белков и митотическую активность клеток.

При белковом голодании, авитаминозе С, недостатке витаминов группы В развитие анемии связано с нарушением обменных процессов в кроветворной ткани.

ЗАНЯТИЕ 5. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ АНЕМИЯ

Цель занятия: Изучить различные типа анемий у сельскохозяйственных животных (гиперхромные, гипохромные, токсические).

Задание 1. Вызвать экспериментальную анемию у подопытного животного.

Методика: Для выполнения этого задания необходимо у подопытного животного провести исследование пульса, температуры тела, подсчитать количество дыхательных движений, осмотреть видимые слизистые.

Затем из ушной вены взять кровь и определить количество гемоглобина, эритроцитов, сделать мазки крови.

После этого вызвать у подопытного животного экспериментальную анемию путем введения под кожу 4% раствора солянокислого Фенилгидразина или 2% раствора пирогаллола из расчета 2 мл на 1 кг веса животного. Через 5-7 дней животное исследуется повторно. Задание 2. Приготовление и окраска мазков крови.

Мазок крови делается шлифованным предметным или покровным стеклом на обезжиренном предметном стекле. Предметное стекло удобно держать в левой руке большим и указательным пальцами за короткое ребра, покровное или шлифованное предметное - удерживают за края посередине правой рукой. Далее поверхность одной грани предметного стекла находятся в соприкосновении с каплей крови, покровное же стекло ставится вертикально на конец предметного стекла рядом с каплей и наклоняется до соприкосновения с ней, причем капля должна растекаться в углу (угол наклона покровного стекла должен быть равен примерно 45 град.), образованном 2-мя стеклами. Выждав, когда капля растечет, ведут косоудерживаемым покровным стеклом по предметному, причем капля должна тя­нуться за покровным стеклом, и размазывать таким образом тонкий слой. Мазок должен быть тонким, равномерным, короче и уже предметного стекла. Приготовив мазок, дают ему высохнуть. Затем фикси­руют спирт - эфиром 10-20 минут. Красят по Романовскому - Гимза 15-20 минут. (Краска: на 1 мл дистиллированной воды 1-2 капли основной краски.

Окрашенный мазок обмывают струей воды и высушивают на воздухе. Просмотр мазка ведется под микроскопом с иммерсионной системой.

Задание 3. Изучение мазков крови до и после опыта. Определение типа анемии.

Оформление протокола опыта: Кратко записывают принципы определения показателей. Полученные данные заносят в таблицу. Объясняют механизм изменений картины крови при анемии. Делают выводы.

5. 2 ИЗМЕНЕНИЕ КОЛИЧЕСТВЕННОГО И КАЧЕСТВЕННОГО СОСТАВА ЛЕЙКОЦИТОВ

Функции клеток белой крови разнообразны. Они защищают организм от бактерий путем фагоцитоза. Нейтрофилы выделяют бактерицидные вещества. Эозинофилы обладают антитоксической функцией. Лимфоциты метаплазируют в клетки вырабатываю­щие антитела. Эти лимфоциты называют в настоящее время В-лимфоцитами. Лейкоциты стимулируют процессы регенерации тканей, участвуют в межуточном обмене. Функция лейкоцитов становится недостаточной при уменьшении их количества или при поступлении в кровь незрелых и дегенеративных форм лейкоцитов. Недостаточность защитной функции лейкоцитов выражается в резком снижении сопротивляемости организма инфекциям.

В крови здоровых взрослых людей в условиях покоя натощак количество лейкоцитов составляет в среднем от 5000 до 8000 в 1 мм3 крови.

Увеличение числа лейкоцитов выше нормы называется лейкоцитозом, уменьшение - лейкопенией.

Лейкоцитоз и лейкопения не являются самостоятельными заболеваниями, а развиваются как сопутствующая реакция при разнообразных болезнях и некоторых физиологических состояниях организма.

Лейкопения. Характеризуется падением содержания лейкоцитов крови. Наблюдается лейкопения с равномерным уменьшением числа всех клеток белой крови и лейкопения с преимущественным уменьшением количества отдельных видов лейкоцитов (нейтропения, эозинопения, лимфоцитопения и т. д.)

В возникновении лейкопений имеют значение следующие факторы: 1) перераспределение лейкоцитов в сосудистом русле; 2) интенсивное разрушение лейкоцитов, не восполняемое адекватной их продукцией; 3) подавление лейкопоэза.

Перераспределительная лейкопения наблюдается, например, при гемотрансфузионном или анафилактическом шоке в результате скопления лейкоцитов в расширенных капиллярах легких, печени, кишечника. Распределительная лейкопения носит временный характер и обычно сменяется лейкоцитозом.

Лейкопения вследствие интенсивного разрушения лейкоцитов. Как вторичное явление она встречается иногда при обширных гнойно-воспалительных процессах. В очаге воспаления разрушается большое количество лейкоцитов, преимущественно нейтрофилов. Продукты распада лейкоцитов стимулируют регенерацию костного мозга, но с течением времени она оказывается недостаточной, чтобы восполнить убыль лейкоцитов, и развивается лейкопения.

Лейкоциты могут разрушаться под влиянием аллергических и антилейкоцитарных антител.

Лейкопения вследствие нарушения или угнетения лейкопоэза. Нарушение лейкопоэза может проявиться в виде задержки созревания и выхода лейкоцитов в кровь, что наблюдается, например, при системных поражениях кроветворных органов (острый лейкоз), протекающих с лейкопенией.

Глубокое угнетение лейкопоэза вызывают следующие причины:

1) хроническое отравление химическими веществами (бензол, тетраэтилсвинец);

2) облучение рентгеновыми лучами или ионизирующей радиацией, к которой особенно чувствительна лимфоидная ткань; лимфопения обнаруживается уже в начальной стадии лучевой болезни;

3) аутоаллергические реакции, развивающиеся в кроветворных органах;

4) метастазирование опухолевых клеток в костный мозг;

5) отравление перезимовавшими злаками, которые поражены грибком, содержащим токсическое начало.

Воздействие на костный мозг перечисленных факторов может закончиться его истощением (аплазией) и агранулоцитозом (катастрофическое уменьшение в крови числа всех гранулоцитов). Иммунологическая реактивность организма резко снижается, развиваются тяжелые септические процессы, в частности язвенно-некротическая ангина (angina agranulocytica). Агрнулоцитоз обычно сочетается с анемией и тромбоцитопенией (уменьшение числа тромбоцитов).

Лейкоцитозы. Физиологический лейкоцитоз. К физиологическим лейкоцитозам относятся: а) лейкоцитоз новорожденных; б) пищеварительный лейкоцитоз, развивающийся через 2-3 часа после приема пищи; в) миогенный лейкоцитоз, связанный с физической работой и др.

Пищеварительный и миогенный лейкоцитоз - временное явление, вызываемое рефлекторным перераспределением крови в сосудистом русле и выходом депонированной крови.

Патологические лейкоцитозы. Возникают при многих инфекционных заболеваниях, интоксикациях, воспалительных процессах, эндокринных расстройствах, нарушениях нервной регуляции кроветворения. Более значительное увеличение числа лейкоцитов с появлением в периферической крови незрелых форм нейтрофильных, лимфоцитарных или моноцитарных клеток называют лейкемоидной реакцией (по внешнему сходству с картиной крови при лейкозах).

В механизме возникновения патологических лейкоцитозов основная роль принадлежит стимуляции лейкопоэза и ускоренному выходу лейкоцитов в кровь. Гиперплазия лейкопоэтической ткани (миелоидная, лимфоидная и пр.) может происходить под влиянием бактерий и их токсинов, химических агентов, продуктов тканевого распада (нуклеопротеидов), а также распада лейкоцитов. Кроме того, в крови животных обнаружены лейкопоэтины - вещества, активирующие гранулоцитопоэз. Установлено, что их концентрация в крови увеличивается при патологических условиях (воспаление, раз­личные инфекции, разрушение лейкоцитов). Природа лейкопоэтинов неизвестна.