Методическое пособие к лабораторно - практическим занятиям (стр. 15 )

В зависимости от преобладания в крови тех или иных видов лейкоцитов различают нейтрофильный, эозинофильный, базофильный лейкоцитозы, лимфоцитоз, моноцитоз.

Нейтрофильный лейкоцитоз (нейтрофилия) встречается чаще при инфекциях, вызывающих гнойное воспаление (стрептококк, стафилококк, менингококк и др.); наблюдается также при травмах черепа, инфаркте миокарда, острых кровопотерях. При оценке нейтрофилии необходимо учитывать ядерный сдвиг нейтрофилов в лейкоцитарной формуле.

Регенеративный сдвиг влево указывает на омоложение клеток нейтрофильного ряда: в крови увеличивается содержание палочкоядерных и появляются юные формы. Регенеративный сдвиг влево обычно сочетается с нейтрофильным лейкоцитозом, что сви­детельствует об активации гранулопоэза. При благоприятном течении заболевания индекс сдвига не превышает 0,25-0,45. (В норме индекс сдвига составляет 0,06-0,08. Он вычисляется как отношение суммы всех несегментированных нейтрофилов к количеству сегментоядерных клеток.)

При гиперрегенеративном ядерном сдвиге, помимо, увеличенного количества палочкоядерных и метамиелоцитов, в крови обнаруживаются и менее зрелые клетки - миелоциты. Индекс сдвига возрастает до 1-2. Отмечается эозинопения. Общее число лейкоцитов может быть увеличенным, но чаще имеется тенденция к снижению. Гиперрегенеративный сдвиг встречается при тяжело протекающих инфекционных и гнойно-септических процессах.

При различных заболеваниях в крови обнаруживаются дегенеративные формы лейкоцитов. Наиболее изучены патологические изменения в нейтрофилах. Признаками дегенерации нейтрофилов являются:

Токсогенная зернистость - появление в цитоплазме грубых, интенсивно окрашивающихся зерен в результате коагуляции белков цитоплазмы под влиянием инфекционного (токсического) агента; токсогенная зернистость наблюдается при гнойно-септических процессах (перитонит, флегмона).

Вакуолизация цитоплазмы - признак жирового перерождения клетки. При фиксации препарата спиртом жир растворяется, и остаются пустые участки, не воспринимающие окраски («дырявые лейкоциты»). Вакуолизация наиболее характерна для тяжелейших форм сепсиса, абсцессов, лучевой болезни.

К другим дегенеративным признакам относятся анизцитоз лейкоцитов, пикноз и набухание ядра, сморщивание всей клетки до микроформы.

Эозинофильный лейкоцитоз (эозинофилия) - увеличение количества эозинофилов от 5% и более. Эозинофилия типична для хронического миелоза, глистных инвазий и паразитарных заболеваний. При трихинеллезе, эхинококке печени, аскаридозе (в личиночной стадии развития) количе­ство эозинофилов может увеличиться до 30% и более (гиперэозинофилия).

Эозинофилия характерна для аллергических заболеваний (бронхиальная астма, сенная лихорадка и др.), что, по-видимому, связано с участием эозинофилов в метаболизме гистамина. Считают, что эозинофилы способны адсорбировать гистамин, освобождающийся при аллергических реакциях.

Увеличение числа эозинофилов наблюдается также при недостаточной функции коры надпочечников, когда продуцируется мало глюкокортикоидов (избыток глюкокортикоидов, наоборот, сопровождается эозинопенией, так как эти гормоны способствуют лизису эозинофилов).

Базофильный лейкоцитоз (базофилия) явление редкое, встречается при хроническом миелозе, эритремии.

Лимфоцитоз - увеличение содержания лимфоцитов свыше 35%. Лимфоцитоз, как и другие виды лейкоцитозов, может быть абсолютным и относительным. Абсолютный лимфоцитоз характеризуется увеличением абсолютного числа лимфоцитов при нормальном или повышенном содержании лейкоцитов в крови. Для относительного лимфоцитоза типично уменьшение общего количества лейкоцитов и преобладание в крови лимфоцитов за счет уменьшения числа других клеток (например, нейтрофилов), хотя абсолютное число лимфоцитов остается в пределах нормального.

Абсолютный лимфоцитоз является преобладающим признаком лимфатического лейкоза, а также наблюдается при хронических инфекционных заболеваниях (туберкулез, сифилис). Относительный лимфоцитоз отмечается при ряде инфекций, протекающих со значительной лейкопенией за счет угнетения гранулоцитопоэза (брюшной тиф, грипп).

Моноцитоз - увеличение количества моноцитов свыше 8 %. Моноциты являются активными фагоцитами крови. В участке воспаления они могут трансформироваться в фибробласты. Моноцитоз служит показателем значительного раздражения ретикулогистиоцитарной системы. Увеличение количества моноцитов как временное явление наблюдается при некоторых острых инфекционных и вирусных заболеваниях. Более продолжительный моноцитоз характерен для хронических затяжных процессов и протозойных заболеваний (септический эндокардит, малярия, инфекционный мононуклеоз, лейшманиоз). Количество моноцитов увеличивается при разрушении лимфатической ткани (лимфогранулематоз).

ЗАНЯТИЕ 6. ПАТОЛОГИЧЕСКАЯ ФИЗИОЛОГИЯ БЕЛОЙ КРОВИ

Цель занятия: Изучить различные патологические состояния белой крови.

Задание 1: Вызвать у животного экспериментальный лейкоцитоз и лейкопению.

Методика: У подопытных животных (кролики массой не более 2 кг) за неделю до опыта провести клиническое обследование (температура, пульс, дыхание) и взять кровь из вены для определения количества эритроцитов, гемоглобина, лейкоцитов и сделать мазки для выведения лейкограммы (до опыта). Количество эритроцитов и лейкоцитов подсчитывают в камере Горяева. Приготовленные мазки крови, после окрашивания микроскопируют и выводят лейкограмму.

Экспериментальная лейкопения: 1-му кролику ежедневно в течение 6-7 дней подкожного вводят по 1 мл. бензола на 1 кг. массы тела вызывают лейкопению. Экспериментальный лейкоцитоз: 2-му кролику вводят под кожу, раздражаю­щие костный мозг дозы бензола, из расчета 0,2-0,3 мл на 1 кг массы тела.

В день проведения занятий повторяют обследование животных и исследование крови.

Задание 2. Подсчитать количество лейкоцитов и сделать мазки крови для определения лейкограммы у животных с экспериментальной лейкопенией и лейкоцитозом.

Задание 3. Вывести лейкограмму для животных с экспериментальным лейкоцитозом и лейкопенией.

Дифференциальный подсчет лейкоцитов:

Для выведения лейкограммы одним из наиболее важных условий для правильного подсчета является строгая выдержанность методики. Шиллинг предложил для подсчета лейкоцитов четырехполосный метод "Меандра". Для этого выбирают участки по краям мазка: два в начальной его части один против другого и два в конце мазка. В каждом поле подсчитывают 75 лейкоцитов. Подсчет ведут по кривой похожей на букву "П".

Подсчет производят от края мазка на 3-4 поля зрения вглубь, затем на столько же полей в сторону и снова направляют к краю. При отсутствии крестообразного столбика можно вводить зигзагами, передвигая мазок на 3-4 поля вглубь по косой и затем возвращаясь снова к краю мазка. Каждую клетку белой крови записывают в таблицу.

Метод подсчета по Фелипенко. Мазок делится на три части: начальную, среднюю и конечную. Подсчет ведется по каждой линии от одного до другого края мазка. По каждой линии подсчитывают по 200 клеток. Следовательно, всего 600 клеток.

Дифференциальный подсчет лейкоцитов:

Морфологические особенности отдельных видов лейкоцитов. При описании клетки обращают внимание на:

1) ее величину;

2) свойства ядра;

3) окраску протоплазмы.

При оценке ядра обращают внимание на:

1) форму;

2) величину и расположение;

3) степень окраски;

4) его структуру.

Агранулоциты - не имеющие в цитоплазме зернистости, имеющие мелкую зернистость, лимфоциты, моноциты.

Гранулоциты: - базофилы, эозинофилы, нейтрофилы (или специальные гранулоциты), миелоциты, юные, палочко-ядерные, сегментоядерные.

Образование лейкоцитов происходит в разных кроветворных органах. Гранулоциты - в костном мозге, моноциты - в ретикулоэндотелиальной системе, лимфоциты - в лимфатических узлах.

Ранней формой гранулоцитов является: миэлобласт - крупная клетка с ядром, имеющим круглую или овальную форму, бледно окрашивается с ядрышками 2-6. Протоплазма в виде небольшого ободка, резко базофильна, окрашивается в интенсивно голубой цвет (не зернистая). Встречается в нормальных условиях только в костном мозге.

Нейтрофилы имеют обильную нейтрофильную зернистость, очень мелкую, в цитоплазме и эндоплазме. Эктоплазма - тонкий гомогенный слой, свободный от гранул. Цитоплазма окрашивается в бледно-розовый цвет, иногда бесцветна.

По форме ядра разделены на три группы:

1. Юные нейтрофилы, молодые незрелые формы, в норме от 0,5%, при инфекциях и нагноениях 5-30%. Определяют величину и силу сдвига. Протоплазма розовая, зернистая, в незрелых окрашена в дымчатый цвет с нечетко выраженной зернистостью.

2. Палочкоядерных - протоплазма бледно-розовая, зернистость красно-розовая (нейтрально окрашена). Ядро разделено на сегменты различной величины и формы (подковообразной или в виде буквы S). По всей длине одинаковой ширины или имеют на конце булавовидные вздутия. При гипер-регенеративном сдвиге протоплазма окрашена в дымчатый цвет, встречаются в. патологических мазках.

3. Сегментоядерные - отличаются от палочкоядерных только по форме ядра. Ядро разделено на сегменты перемычкой. Окрашено в фиолетовый цвет. Число сегментов от 2-5.

4. Миелоциты - встречаются только в патологической крови и характеризуют гиперрегенеративный сдвиг при тяжелых гнойных процессах. Протоплазма розовая, светло - синяя дымчатая. Зернистость мелкая и неравномерно расположенная, розового или красно-фиолетового цвета. Ядро массивное, не равномерно окрашенное. В небольшом количестве встречаются при миэлоидной лейкемии, при септических процессах незадолго до смерти.

5. Базофилы 10-12 микрон. Зернистость различной величины и формы неравномерно разбросана по протоплазме, окрашивается основными красками в темно-фиолетовый цвет, гранулы легко растворяются воде и на месте их остаются вакуоли. Форма ядра различна: то вытянутое в длину, то широкое, в норме их имеется 0,5-1%.

6. Эозинофилы - 10-12 микрон (у лошади 7-8), зернистость крупная. Окрашена в ярко-красный цвет, тесно расположена и прикрывает часть ядра. Протоплазма окрашена в голубой цвет или бесцветная. Величина гранул различна у каждого животного.