Общая микробиология (стр. 8 )

Этим способом стерилизации пользуются для обеспложивания питательных сред, лабораторной посуды, металлических и стеклянных инструментов, для обеззараживания инфекционного материала.

Стерилизация паром под давлением производится в автоклавах. На сегодняшний день это самый распространенный способ стерилизации в бактериологической практике

Автоклав представляет, собой металлическую цилиндрическую емкость с толстыми двойными стенками и с герметически закрывающейся массивной крышкой. Автоклав оборудован манометром и термометром для контроля давления и температуры. Под дном автоклава находятся нагревательные элементы. Стерилизуемые предметы помещают внутрь емкости и герметично закрывают крышку, начинается повышение давления и температуры.

Стерилизация текучим паром производится в аппарате Коха (рис. 38), представляющем собой высокий металлический цилиндр, с двойным дном и неплотно закрывающейся крышкой, снабженной термометром. На дно аппарата наливают воду, подогреваемую снизу до кипения. Образующийся пар выделяется через края неплотно закрытой крышки. Стерилиза­цию производят в течение 30—40 минут с момента выделения пара.

Стерилизацию текучим паром можно производить также и в автоклаве; в таком случае крышка автоклава остается незавинченной, а выпускной кран открытым. Текучим паром стерилизуют предметы, портящиеся от действия высокой температуры (питательные среды).

Однократная обработка текучим паром не обеспечивает полной стерилизации, так как при температуре в 100° гибнут вегетативные формы, но не споры бактерий. Полное обеспложивание при помощи текучего пара достигается при повторной (дробной) стерилизации.

Дробная стерилизация. Дробной стерилизации подвергаются материалы, не переносящие температуры выше 100° (жела­тина, молоко, питательные среды с углеводами). При температуре в 100°погибают вегетативные фор­мы бактерий, затем дают оставшимся спорам прорасти в вегетативные формы и через сутки снова стерилизуют материал при 100°. Оставшимся спорам снова дают прорасти и через сутки снова стерилизуют материал при 100°, добиваясь таким образом 100% стерилизации

Тиндализация представляет собой дробную стерилизацию при низкой температуре, предложенную Тиндалем для объектов, не переносящих температуры в 100°. Их подвергают нагреванию в течение 5—6 дней подряд при более низкой температуре ( 56—60°) по 1 часу ежедневно. Тиндализация производится или на водяной бане, или в специальных приборах с терморегуляторами.

Пастеризация. Метод предложен Пастером для частичной стерилизации жидкостей, теряющих свои качества под действием высокой температуры), используется при температурной обработке продуктов питания(соки, молоко, вино ). Способ основан на том, что при нагревании жидкости до 50—60° в течение 15—30 минут или до 70—80° в течение 5—10 минут погибает большинство бесспоровых микробов, а споры остаются жизнеспособными. Поэтому необходимым условием является упаковка и охлаждение пастеризованного продукта.

В бактериологической практике пастеризация при 90° применяется для разделения споровых и бесспоровых видов бактерий.

5. Обработка материалов рентгеновскими, ультрафиолетовыми, γ-лучами

Радиационный метод стерилизации используется для стерилизации изделий медицинского назначения одноразового применения (одноразовые чашки Петри)

Стерилизация ультрафиолетовым облучением используется для стерилизации воздуха помещений медицинского назначения, сложных изделий медицинского назначения (искусственный клапан сердца и т. д.)

2. Механические методы стерилизации.

Стерилизация фильтрованием.

Применяется в тех случаях, когда материал не может быть подвергнут нагреванию (сыворотки, белковые лекарственные вещества и т. д.).

Для этой цели применяются фильтры тонкой очистки из мелкопористых веществ. Они готовятся в виде цилиндрических свечей (фильтр Шамберлана, Берке-Фельда) или асбестовых пластинок (фильтр Зeйтца).

Фильтрование производится под повышенным давле­нием, вследствие чего жидкость нагнетается через поры фильтра в приемник, или же создается разрежение в приемнике и тогда жидкость всасывается в него через фильтр. Поэтому к фильтрующему прибору присоединяется или нагнетающий, или разрежающий насос.

Наиболее простым способом является фильтрование с по­мощью водоструйного насоса: в приемнике создается отрица­тельное давление и жидкость всасывается через фильтр. Стерильность профильтрованной жидкости проверяется путем ее посева на питательную среду - посев остается стерильным.

3. Химические методы. Методы основаны на обработке оборудования химическими веществами, обладающими бактерицидными свойствами. Применяются при стерилизации приборов и материалов, чувствительным к высоким температурам.

Дезинфекция – мероприятия, направленные на уничтожение или снижение численности микроорганизмов. Для дезинфекции применяют физические и химические методы.

Механические методы – влажная уборка.

Физические методы: кипячение, сжигание трупов.

Химические методы: методы с использованием веществ, обладающих антисептическими свойствами (дезинфектантов)

Классификация дезинфектантов

1. галогенсодержащие дезинфектанты (имеют в своем составе галогены) — препараты йода (спиртовой раствор йода, раствор Люголя, йодоформ, йодинол, йодопирин), хлора (хлорамины, хлориты);

2. перекисные соединения - перекись водорода, пергидроль (30% водный раствор перекиси водорода) дезоксон-1 и др.

3. кислоты и их соли - борная, салициловая, тетраборат натрия, калия перманганат, щелочи - аммиак и его соли, бура;

4. спирты - 70°—80° этанол и др.;

5. альдегиды - формальдегид, гексаметилен-тетрамин, бетапропиолактон;

6. детергенты - декамин, хлоргексидин, этоний и др.

7. поверхностно-активные вещества, относящиеся к четвертичным аммониевым соединениям и амфолитам (ниртан, амфолан и др.)

8. производные 8-оксихинолина - хинозол, интестопан, нитроксолин, 4-хинолона - оксолиновая кислота, хиноксалина - хиноксилин, диоксидин;

9. производные нитрофурана - фурацилин, фурагин, фуразолидон;

10. производные фенола - трикрезол, фенилрезорцин, фенилсалицилат;

11. дегти - деготь березовый, ихтиол и др.;

12. красители - бриллиантовый зеленый, метиленовый синий, этакридина лактат;

13. соединения тяжелых металлов - дихлорид ртути, нитрат серебра, колларгол, протаргол, сульфат цинка.

14. газовая смесь из оксида этилена с метилбромидом

Методические указания:

1. Схема описания культуральных свойств микроорганизмов:

1.Форма колонии

2.Размер колонии

3.Цвет

4.Характер края

5.Характер поверхности

6. Консистенция

2.Окраска по методу Грама:

1.  На фиксированный мазок нанести основной краситель – генциановый фиолетовый через полоску фильтровальной бумаги. Выдержать 2 мин.

2.  Не промывая мазок, нанести раствор Люголя на 1 мин.

3.  Обесцветить этиловым спиртом 5-10 сек.

4.  Промыть водой

5.  На мазок нанести дополнительный краситель – водный фуксин. Выдержать 2 мин.

6. Промыть водой.

7. Высушить с помощью полоски фильтровальной бумаги

3. Таблица. Основные методы дезинфекции и контроля качества дезинфекции.

Объект	Метод дезинфекции	Метод контроля
Воздух в перевязочных
Поверхности
Инструменты, белье, перевязочный материал

4.Таблица. Методы контроля режима стерилизации.

Методы	Принцип метода
Физические
Химические
Биологические

Контрольные вопросы:

1.Для чего проводится стерилизация?

2. Какие методы дезинфекции наиболее часто применяются в современных условиях?

3. Для чего питательные среды для анаэробов заливают сверху вазелиновым маслом?

4. Какие биологические методы создания анаэробных условий Вам известны?

5. Как проводится контроль стерильности?

Список литературы:

Обязательная:

1.  , , Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. М., Медицина. 1994 г.

2.  , , Рыбакова . М., Медицина. 1998 г.

3.  , , Медицинская микробиология, вирусология, иммунология. СпецЛит, 2000 г

4.  Борисов к практическим занятиям по микробиологии. М. 1973 г.

Дополнительная:

1.  , Кривошеин . М., 1980 г.

2.  , Микробиология с основами вирусологии. М., 1974 .

3.  Общая микробиология. М., Мир, 1982

Занятие № 7 Антагонизм микробов и антибиотики.

Цель: Научиться проводить качественную и количественную оценку чувствительности микроорганизмов к антибиотикам. Познакомиться с принципами рациональной химио - и антибиотикотерапии.

Знать: Определение понятия «антибиотики», их классификация, механизм действия, применение, получение, основные методы определения антибиотикорезистентности.

Уметь: осуществлять постановку диффузионного теста на антибиотикорезистентность и учитывать его результаты.

Обоснование темы: Уничтожение патогенных для человека микробов является одной из важнейших проблем в профилактике и лечении различных заболеваний. Для борьбы с микробами используют методы антимикробной терапии. Каждый метод имеет свои особые цели и условия применения.

Вопросы для самоподготовки:

1.Антибиотики, их классификация.

2.Антимиробный спектр и методы его определения.

3Практическое применение антибиотиков. Понятие о химиотерапии

4. Принципы рациональной антибиотикотерапии.

5. Устойчивость микроорганизмов к антибиотикам, механизмы ее формирования.

6. Методы определения антибиотикорезистентности.

ПЛАН

Программа:

1. Методы выявления антагонизма у бактерий.

2. Методы постановки тестов на антибиотикорезистентность.