Общая микробиология (стр. 1 )

ПЕНЗЕНСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ УНИВЕРСИТЕТ

МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ

КАФЕДРА «МИКРОБИОЛОГИИ, ЭПИДЕМИОЛОГИИ И ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ»

Н. Н. Митрофанова

ОБЩАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ.

Учебно-методическое пособие

для студентов медицинских вузов

ПЕНЗА 2012

Учебно-методическое пособие для студентов медицинских вузов «Общая микробиология» составлено в соответствии с программой для студентов 2 – 3 курса по медицинской микробиологии, вирусологии, иммунологии 2002 г.

По каждой теме сформулирована цель занятия. Имеется план и методика выполнения различных экспериментальных работ с микроорганизмами. Приведены современные методы диагностики различных инфекций.

Руководство рекомендовано для самостоятельной подготовки студентов к практическим занятиям.

Занятие № 1 Бактериологическая лаборатория и оборудование рабочего места. Техника безопасности при работе в лаборатории. Устройство современных микроскопов. Морфология бактерий и методы ее изучения.

Цель: Изучить и научиться выполнять правила противоэпидемического режима в бактериологической лаборатории,

Научиться готовить фиксированный препарат, окрашивать его простым методом и изучать при помощи иммерсионного микроскопа.

Знать: основные задачи медицинской микробиологии, устройство, оснащение, режим работы, с оборудование и материалы различных лабораторий, правила работы в них, типы микроскопов, основные принципы классификации микроорганизмов

Уметь: подготовить иммерсионный микроскоп к работе, приготовить мазок, окрасить его с помощью простых методов окраски, осуществить микроскопию с помощью иммерсионного микроскопа. Описать морфологию бактерий в мазке по схеме. Приготовить нативный препарат, определить подвижность микроорганизмов.

Обоснование темы: все работы с микроорганизмами проводятся в специализированных лабораториях, в которых необходимо использовать определенные правила по технике безопасности и специфические приемы для работы с патогенными биологическими агентами

Вопросы для самоподготовки:

1.  Предмет и задачи медицинской микробиологии

2.  История развития микробиологии.

3.  Основные принципы классификации микроорганизмов.

4.  Оснащение и режим работы бактериологической лаборатории

5.  Типы микроскопов и методы микроскопии

6.  Строение механической и оптической части микроскопа.

7.  Понятие о простых методах окраски.

8.  Принципы классификации микроорганизмов.

ПЛАН

Программа:

1.  Правила по технике безопасности.

2.  Классификация лабораторий и основное оборудование.

3.  Морфология бактерий и методы ее изучения.

4.  Типы микроскопов и их устройство.

5.  Этапы приготовления фиксированного мазка из бактерий.

6.  Приготовление нативных препаратов для прижизненного изучения микроорганизмов.

7.  Простые методы окраски препаратов.

8.  Основные принципы классификации микроорганизмов.

Демонстрация:

1. Приготовление мазков из бактериальных культур

2. Подвижность бактерий в препарате «висячая» капля

3. Подвижность бактерий в препарате «раздавленная» капля

4.Красители, используемые в микробиологии

Задание студентам:

1. Освоить методы работы с иммерсионным микроскопом.

2.  Микроскопировать и зарисовать готовые мазки, окрашенные простым методом, описать морфологию бактерий в мазке по схеме, зарисовать (стафилококки, диплококки, стрептококки, сарцины, палочки, клостридии, стрептобациллы, вибрионы, спирохеты, актиномицеты)

3. Приготовить мазки из бактерий. выращенных на жидкой и плотной питательной средах.

4. Окрасить мазки простым методом. Зарисовать, определив принадлежность к морфологическому типу.

5. Приготовить нативные препараты методом «висячая» капля и «раздавленная» капля. Определить подвижность микроорганизмов.

Информационный материал.

Лаборатория – организация, в которой выполняются экспериментальные, диагностические производственные работы с патогенными биологическими агентами (ПБА).

ПБА – патогенные для человека микроорганизмы (бактерии, вирусы, хламидии, риккетсии, простейшие, грибы, микоплазмы) а также генно-инженерно-модифицированные микроорганизмы, яды биологического происхождения 9токсины, гельминты, биологические материалы, подозрительные на содержание вышеперечисленных агентов.

Все микробиологические, биохимические, молекулярно-биологические исследования микроорганизмов проводят в специальных лабораториях, структура и оборудование которых зависят от объектов исследования и от целевой направленности (научные исследования, диагностика заболеваний, изучение иммунного ответа и серодиагностика заболеваний человека и животных) осуществляется в иммунологических и серологических лабораториях.

Бактериологические, вирусологические, микологические и серологические лаборатории входят в состав центров Роспотребнадзора, диагностических центров и крупных больниц.

В лабораториях Роспотребнадзора выполняют бактериологические, вирусологические, серологические, паразитологические анализы материалов, полученных от больных и контактировавших с ними лиц, обследуют бактерионосителей и производят санитарно-микробиологические исследования воды, воздуха, почвы, пищевых продуктов и т. д.

В бактериологических и серологических лабораториях больниц и диагностических центров производят исследования с целью диагностики кишечных, гнойных, респираторных и др. инфекционных заболеваний, осуществляют микробиологический контроль за стерилизацией и дезинфекцией.

Диагностику карантинных и особо опасных инфекций (чума, туляремия, сибирская язва и др.) проводят в специальных лабораториях, организация и порядок деятельности которых строго регламентирован.

В вирусологических лабораториях диагностируют заболевания, вызванные вирусами (грипп, полиомиелит, и т. п.), некоторыми бактериями – хламидиями (орнитоз) риккетсиями (сыпной тиф). При организации и оборудовании вирусологических лабораторий учитывают специфику работы с вирусами, культурами клеток и куриными эмбрионами, требующую строжайшей асептики.

В микологических лабораториях проводят диагностику заболеваний, вызванных патогенными грибами – возбудителями микозов.

Лаборатории обычно размещаются в нескольких помещениях, площадь которых определяется объемом работ и целевым назначением. В каждой лаборатории предусмотрены: боксы для работы с отдельными группами возбудителей, помещения для серологических исследований, помещения для мойки и стерилизации посуды. Приготовления питательных сред, виварий с боксами для здоровых и подопытных животных, регистратура для приема и выдачи анализов.

Требования, предъявляемые к бактериологическим лабораториям:

1. Все бактериологические лаборатории должны иметь разрешение на работу с ПБА

2. Лаборатория должна размещаться в отдельном здании или в изолированной части здания

3. Лаборатория должна иметь 2 входа: для сотрудников и для доставки патологического материала

4. Исходя из требований бактериологической безопасности, лаборатория должна иметь: водопровод, канализацию, вентиляцию, освещение (естественное, искусственное), отопление

5. Все помещения лаборатории делятся на две зоны: «заразная» и «чистая» где не проводятся работы с ПБА.

«Чистая» зона должна включать:

Гардероб, комнату отдыха, комнату для работы с документами, кабинет заведующего, подсобные помещения, моечную, комнату для приготовления питательных сред, препараторскую, стерилизационную.

«Заразная» зона должна включать: помещения для приема, регистрации, сортировки материала, боксированные помещения, боксы биологической безопасности, комнату для проведения бактериологических исследований, комнату для проведения серологических исследований, комнату для проведения гельминтологических исследований, термостатную (не во всех лабораториях), автоклавную.

Отличие боксированных помещений от боксов:

Боксированные помещения осуществляют защиту исследуемого материала от вторичного инфицирования, боксы предназначены для защиты от ПБА персонала и окружающей среды, в связи с чем они имеют автономные системы коммуникаций.

Группы возбудителей инфекционных заболеваний:

1.  Возбудители особо опасных инфекций: чумы, натуральной оспы, лихорадки Ласса, Эбола.

2.  Возбудители высококонтагиозных бактериальных, грибковых, вирусных инфекций: сибирская язва, холера, сыпной тиф, бешенство

3.  Возбудители бактериальных, грибковых, вирусных, протозойных инфекций, выделенных в отдельные нозологические группы: коклюш, столбняк, ботулизм, туберкулез, кандидоз, грипп, полиомиелит

4.  Возбудители бактериальных, грибковых, вирусных септицемий, менингитов, пневмоний, энтеритов (возбудители анаэробных клостридиальных инфекций, синегнойная инфекция, герпесвирусы, возбудители амебиаза)

Оборудование бактериологической лаборатории.

Микроскоп. Изучение морфологии микроорганизмов производится с помощью различных микроскопов, увеличение которых колеблется от 500 до 1000 раз.

Для микробиологических исследований используют несколько типов микроскопов (биологический, люминесцентный, электронный) и специальные методы микроскопии (фазово-контрастный, темнопольный) применяются различные марки микроскопов «Биолам», МБР -1 и т. д.

Микроскоп (от греческих слов micros — малый, skopeo — смотрю) — оптический прибор для изучения малых объектов, недоступных невооруженному глазу. Разрешающая способность оптического микроскопа равна 0,2 мкм, полезное увеличение 1 000

В микроскопе различают механическую и оптическую часть.

В механическую часть микроскопа входят - штатив, состоящего из основания и тубусодержателя, тубус с револьвером для объективов, предметный столик для микропрепаратов.

В тубус микроскопа сверху вставлен окуляр. В штатив встроены механизмы грубого (макровинт) и тонкого (микровинт) перемещения предметного столика или тубусодержателя.

Оптическая часть микроскопа состоит из осветительной системы, объективов, окуляров и конденсора.

Осветительная система находится под предметным столиком и состоит из зеркала и конденсора с диафрагмой.

Зеркало служит для отражения световых лучей по направлению к объективу и внутрь микроскопа. Одна сторона зеркала плоская, другая вогнутая. При дневном свете пользуются плоским зеркалом, при искусственном освещении — вогнутым.