В образцах периферической крови больных алкогольной зависимостью группы 2 отмечается статистически значимое снижение ИС T - и В-лимфоцитов в ответ на активацию всеми митогенными лектинами и значимо увеличивается цитолитическая активность NK-клеток в сравнении с показателями нормы. Напротив, у больных в ремиссии (группа 3) и добровольцев подгруппы 1 показатели пролиферативной активности T - и В-лимфоцитов и цитолитической активности NK-клеток соответствуют показателям нормы (табл. 10).
Таким образом, полученные результаты свидетельствуют о существенных изменениях иммунореактивности организма как после острой, так и в результате хронической алкогольной интоксикации, что выражается в снижении пролиферативной активности Т-хелперов, В-лимфоцитов и NK-клеток. Отмеченные изменения функциональной активности этих иммунокомпетентных клеток in vitro коррелируют с нарушением их функций in vivo [ и др., 2006], что является предпосылкой снижения устойчивости организма к инфекциям и повышения риска развития онкологических заболеваний у лиц, злоупотребляющих алкоголем.
2.3. Особенности фенотипа клеток крови
Алкогольная интоксикация как у добровольцев (при нагрузке крепким алкоголем в количестве 0,2 л и более за 17−19 часов до забора крови), так и у больных с алкогольной зависимостью группы 1 и 2 приводит к изменению популяционного и субпопуляционного состава периферической крови. Как у тех, так и у других в образцах периферической крови значимо снижается процент CD3+4+ Т-хелперов относительно нормы (рис. 4а).
4а 4б
Рис. 4 а). Процент CD3+4+ , CD3+8+ – Т-лимфоцитов и CD19+B-клеток; б) отношение CD4+/CD8+ у добровольцев и больных алкогольной зависимостью после алкогольной интоксикации; * – p<0,05; ** – p<0,001 – статистически значимые отличия от нормы; ↓ – тенденция к снижению показателя от нормы; t-критерий Стьюдента. Примечание: здесь и на рисунках 5 – 10 обозначения по оси абсцисс: Н – норма, 1п. – подгруппа 1 добровольцев (однократно употребляли 50 мл водки или 150 мл вина), 2 п. – подгруппа 2 добровольцев (в течение дня употребляли 0,2–0,3 л крепкого алкоголя), 3 п. – подгруппа 3 добровольцев (в течение 2–3 дней употребляли 0,6–1 л крепкого алкоголя), I с. – больные алкогольной зависимостью I стадии, II с. – больные алкогольной зависимостью II стадии, Р – ремиссия
После алкогольной интоксикации на фоне существенного снижения содержания в образцах периферической крови Т-хелперов как у добровольцев, так и у больных не было выявлено значимых изменений в содержании Т-клеток с фенотипом CD3+8+ (рис. 4а.), в то же время у них наблюдалось значимое снижение отношения CD4+/CD8+-клеток (рис.4б.), главным образом за счет снижения количества клеток с фенотипом CD4+. У добровольцев подгрупп 2 и 3 и у больных групп 1 и 2 после алкогольной интоксикации обнаружено дополнительно статистически значимое увеличение в образцах периферической крови процента CD19+ – В-лимфоцитов (рис. 4а.). Для сравнения следует отметить, что у добровольцев подгруппы 1 и у больных алкоголизмом в ремиссии все показатели соответствуют показателям нормы (рис. 4а, б).
Таким образом, у добровольцев и у больных алкоголизмом после алкогольной интоксикации выявлен существенный дисбаланс иммунорегуляторных клеток с преобладанием CD8+ Т-клеток, что свидетельствует об избирательном действии алкогольной интоксикации на эту популяцию Т-лимфоцитов. Снижение же содержания CD4+−Т-хелперов в периферической крови, безусловно, является причиной возникновения транзиторного иммунодефицитного состояния у лиц, злоупотребляющих алкоголем.
Рис. 5. Процент CD3-16+56+ NK - и CD3+16+/56+ NKT-клеток киллеров в периферической крови добровольцев и больных алкогольной зависимостью после алкогольной интоксикации; * – p<0,05; ** – p<0,001; *** – p<0,0001 – статистически значимые отличия от нормы; ↑ – тенденция к увеличению показателя от нормы; t-критерий Стьюдента. Обозначения см. рис. 4
У добровольцев после нагрузки крепким алкоголем в количестве 0,2 л и более (подгруппы 2 и 3) отмечается тенденция к увеличению в крови процента NK-клеток и статистически значимо снижается процент NKT-клеток киллеров. У больных же на начальной (I) стадии алкогольной зависимости спустя 17–19 часов после приёма последней дозы крепкого алкоголя (группа 1) в крови статистически значимо снижается не только процент NK-клеток с фенотипом CD3-16+56+ (натуральные киллеры), но и процент CD3+16+/56+ NKT-клеток киллеров (рис. 5). У больных алкоголизмом группы 2 также статистически значимо снижается процент NKT-клеток киллеров и значимо увеличивается в периферической крови процент NK-клеток (рис. 5). У больных же в ремиссии и у добровольцев подгруппы 1 (однократное употребление алкоголя в количестве 50 мл водки или 150 мл вина) процент NK-клеток и NKT-клеток в крови соответствует показателям нормы (рис. 5).
Таким образом, после алкогольной интоксикации у лиц на начальной стадии алкогольной зависимости обнаружено значимое снижение в периферической крови содержания натуральных киллеров (NK-клеток) с фенотипом CD3-16+56+ и CD3+16+/56+ (NKT-клеток киллеров), что обуславливает снижение противоопухолевого иммунитета, а также может явиться одной из причин снижения резистентности таких больных к инфекциям.
Алкогольная интоксикация влияет на активационный состав Т-лимфоцитов периферической крови, который напрямую связан с появлением на клетках HLA–DR молекул и рецептора к IL 2 (антигенный маркер CD25), а также других молекул активации [ П., М., 2001]. Установлено, что в периферической крови добровольцев после нагрузки крепким алкоголем в количестве 0,2 л и более и больных алкоголизмом, после употребления ими крепкого алкоголя в количестве 0,3–0,6 литра, статистически значимо увеличивается процент Т-клеток с фенотипом CD8+DR+, несущих на своей поверхности HLA–DR молекулу (рис. 6). Однако у добровольцев подгруппы 1 и у больных в ремиссии содержание Т-клеток с фенотипом CD8+DR+ соответствует показателям нормы.
Рис. 6. Процент CD8+DR+, CD4+DR+ Т-лимфоцитов и CD3-CD56+DR+ NK-клеток в периферической крови добровольцев и больных алкоголизмом после алкогольной интоксикации; * – p<0,05; ** – p<0,001; *** – p<0,0001 – статистически значимые отличия от нормы; ↑ – тенденция к увеличению и ↓ – тенденция к снижению показателя от нормы; t-критерий Стьюдента. Обозначения см. рис. 4
В периферической крови добровольцев подгрупп 2 и 3 и больных алкогольной зависимостью группы 1 после алкогольной интоксикации наблюдается статистически значимое снижение процента активированных Т-хелперов с фенотипом CD4+DR+ и активированных NK-клеток с фенотипом CD3-CD56+DR+ (рис. 6). У добровольцев же в подгруппе 2 отмечается лишь тенденция к снижению в крови процента CD4+DR+ клеток. В крови больных алкоголизмом группы 2, напротив, увеличивается процент не только CD8+DR+-, но и CD4+DR+- и CD3-CD56+DR+-клеток. В то время как у добровольцев подгруппы 1, так и у больных в ремиссии процент CD8+DR+-, CD4+DR+- и CD3-CD56+DR+-клеток в периферической крови соответствует норме (рис. 6).
Следовательно, нами установлено, что алкогольная интоксикация влечёт за собой активацию CD8+ цитолитических Т-лимфоцитов, что может привести к активации эффекторного (киллерного) механизма иммунной системы. Последнее является, в свою очередь, определяющим моментом в развитии патологии органов и систем. Эти данные подтверждают результаты исследований, полученных в экспериментах на модели острой алкогольной интоксикации, воспроизведённой на культурах лимфоцитов крови здоровых лиц in vitro. Изменения же в активационном составе CD4+-хелперов и NK-клеток зависят от длительности предшествовавшей хронической алкогольной интоксикации и являются дифференцирующим иммунологическим критерием продолжительности алкогольного заболевания.
Обнаружено также, что в периферической крови добровольцев подгруппы 3 и больных с алкогольной зависимостью групп 1 и 2 после алкогольной интоксикации наблюдается нарастание процента T-лимфоцитов с фенотипом CD8+28+, экспрессирующих ко-стимуляционную молекулу CD28, которая также является молекулой активации (рис. 7). В то же время, у этих больных снижается процент клеток CD8+CD28-, не экспрессирующих эту молекулу, по сравнению с нормой (рис. 7). Однако у добровольцев подгруппы 1 и больных в ремиссии содержание в крови CD8+28+- и CD8+28--клеток соответствует норме (рис. 7).
Рис. 7. Процент CD8+28+, CD8+28- Т-лимфоцитов в периферической крови добровольцев и больных алкогольной зависимостью после алкогольной интоксикации; * – p<0,05 – статистически значимые отличия от нормы; ↑ – тенденция к увеличению и ↓ – тенденция к снижению показателя от нормы; t-критерий Стьюдента. Обозначения см. рис. 4
Таким образом, можно заключить, что алкогольная интоксикация приводит к серьезным изменениям популяционного и субпопуляционного состава клеток периферической крови: как у добровольцев без синдрома зависимости от алкоголя (употребляли 0,2 л и более крепкого алкоголя), так и у больных на начальной стадии алкогольной зависимости наблюдается активация CD8+ - Т-лимфоцитов. Об этом свидетельствует увеличение в крови процента активированных T-лимфоцитов с фенотипами CD8+25+, CD8+DR+ и CD8+28+. Из активированных CD8+-лимфоцитов впоследствии образуются эффекторные цитолитические Т-клетки киллеры (CD8+56+ - ЦТЛ). Поскольку острая алкогольная интоксикация приводит к активации CD8+ Т-клеток, то в условиях постоянной алкогольной интоксикации из этих лимфоцитов могут образоваться цитолитические Т-лимфоциты (ЦТЛ), которые распознают видоизмененные (под влиянием ацетальдегида или иммунных комплексов) клетки организма человека, несущие молекулу HLA I класса [ П., М., 2001]. В результате этого распознавания может произойти цитолиз гепатоцитов печени или любых других видоизмененных клеток организма.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 |
Основные порталы (построено редакторами)