Отработанная патогенная культура энтеробактерий подвергается уничтожению автоклавированием  при  1атм. - t 121°С  в течение 20-30 мин. При работе с аналогичными культурами бактерий необходимо тщательно вымыть руки с последующей обработкой дезинфицирующим раствором. В помещении, где выполняется работа, категорически запрещается курить и принимать пищу. Культура энтеробактерий представлена палочками с закругленными концами. К ним относятся эшерихии, сальмонеллы, шигеллы, протеи и др.

Задача №4.

Лаборатории обычно размещаются в нескольких помещениях, площадь которых определяется объемом работ и целевым назначением. В каждой лаборатории предусмотрены:
    боксы для работы с определенными группами возбудителей; помещения для серологических исследований; помещения для мойки и стерилизации посуды; виварии с боксами для здоровых и подопытных животных; регистратура для приема и выдачи анализов.
Лаборатории снабжены рядом обязательных приборов и аппаратов:
    биологический микроскоп, с добавленными принадлежностями (осветитель, фазово-контрастное устройство, темнопольный конденсор); люминесцентный микроскоп; термостаты и центрифуги; рН метры; дистиллятор; весы (технические и аналитические); аппаратура для фильтрования; водяные бани; холодильники; приборы для приготовления питательных сред; набор инструментов (бактериальные петли, шпатели, иглы, пинцеты и др.) лабораторная посуда; газовая или спиртовая горелка; дезинфицирующие средства и др.
Микробиологические лаборатории по типу изучаемых микроорганизмов делятся на бактериологические, вирусологические, микологические, протозоологические.

Задача №5.

НЕ нашли? Не то? Что вы ищете?
Сообщить преподавателю о допущенной оплошности  при работе с культурой. Обработать дезинфицирующим раствором рабочий стол. Осколки, салфетки, после дезинфекции проавтаклавировать ( 1атм – 120°С - 30 мин.), вымыть тщательно руки и обработать дезинфицирующим раствором. Персонал должен быть ознакомлен с правилами поведения и режимом работы в лаборатории. Каждый сотрудник должен иметь специальную одежду (халат, шапочка, сменная обувь), строго  соблюдать правила личной гигиены, содержать рабочее место в чистоте, со всем исследуемым материалом обращаться как с инфицированным, переливать исследуемый материал из емкости в другую над дезинфицирующим раствором, при попадании инфицированного материала на различные объекты – провести дезинфекцию. После окончания работы, руки, инструменты, рабочее место, культуру  обеззараживают. Четкое соблюдение правил техники безопасности, при работе с культурой вызвано необходимостью предотвращения распространения заболевания в лаборатории. Методы микробиологической диагностики:
    микроскопический; культуральный(бактериологический); серологический; аллергологический; биологический; молекулярно-генетический.

Задача №6.

Студент при своей работе использовал объектив с увеличением 40х, который относится к сухой системе микроскопа и применяется для изучения биологических и гистологических объектов. При микроскопии микробиологических препаратов нужно использовать иммерсионный объектив с увеличением 90х, который позволяет свести до минимума потерю лучей света и получить четкую морфологическую картинку изучаемого объекта. Изучение морфологии бактерий необходимо для установления принадлежности к одной из трёх форм, а так же с целью определения видовой принадлежности (идентификации) выделенной чистой культуры.

Задача №7.

Для определения подвижности бактерий, в частности возбудителя холеры, можно использовать темнополевую или фазово-контрастную микроскопию. С целью определения подвижности бактерий готовят нативные  препараты «висячая» и «раздавленная» капли. Препарат «висячая» капля готовят на покровном стекле, в центр которого наносят каплю исследуемого материала; Затем предметное стекло с лункой, края которой смазаны вазелином, прижимают к покровному стеклу так, чтобы капля находилась в центре лунки. Быстрым движением препарат переворачивают покровным стеклом вверх. Для получения препарата «раздавленная» капля на поверхность обезжиренного предметного стекла, наносят небольшую каплю исследуемого материала или суспензию бактерий и покрывают ее покровным стеклом так, чтобы суспензия не выходила за пределы покровного стекла и не допустить образование пузырьков в ней.

Задача №8.

Методы определения жгутиков делятся на прямые (непосредственное выявление) и косвенные (по наличию подвижности). Для обнаружения жгутиков применяют электронную, световую (непосредственное определение), темнополевую и фазово-контрастную (косвенное определение) методы микроскопического исследования. Определение жгутиков по подвижности бактерий жгутиков проводят в нативных препаратах «висячая» и «раздавленная» капли. Препарат «висячая» капля готовят на покровном стекле, в центр которого наносят каплю исследуемого материала; затем предметное стекло с лункой, края которой смазаны вазелином, прижимают к покровному стеклу так, чтобы капля находилась в центре лунки. Быстрым движением препарат переворачивают покровным стеклом вверх; Для получения препарата «раздавленная» капля на поверхность обезжиренного предметного стекла, наносят небольшую каплю исследуемого материала или суспензию бактерий и накрывают ее покровным стеклом. Для прямого определения жгутиков применяют специальные методы окраски, а также электронную микроскопию.

Задача №9.

1. На фиксированный мазок нанести карболовый раствор фуксина через раствор фильтровальной бумаги и подогреть 3-5 мин. до появления паров;

    снять фильтровальную бумагу, промыть мазок; нанести 5% раствор серной кислоты на 1-2 мин. для обесцвечивания; промыть водой; докрасить мазок водным раствором метиленового синего в течение 1-2 мин; промыть водой, высушить, микроскопировать.
Основные представители микробактерий, вызывающие туберкулез – это Mycobacterium tuberculosis и Mycobacterium bovis. В моче больного могут обнаруживаться непатогенные представители микобактерий – микобактерии смегмы (M. smegmatis).

Задача №10.

Окраска кислотоустойчивых бактерий проводится по методу Циля-Нильсена. Некислотоустойчивые бактерии обесцвечиваются при обработке серной кислотой, и окрашивается метиленовым-синим в голубой цвет, а кислотоустойчивые окрашиваются в красный цвет, т. к. фуксин не вымывается при обработке кислотой. Кислотоустойчивость обусловлена наличием в клеточной стенке и цитоплазме бактерий повышенного количества липидов, воска и оксикислот (миколовой кислоты).

Задача №11.

Наиболее оптимальным в данном случае является использование дифференциального  метода окраски по Граму.
    на фиксированный мазок нанести карболово-спиртовой раствор генцианового-фиолетового через полоску фильтровальной бумаги. По истечении 1-2 мин. ее снять и слить краситель. нанести раствор Люголя на 1-2 мин. обесцветить этиловым спиртом в течение 30-60 сек. до прекращения отхождения фиолетовых струек краски. промыть водой докрасить водным раствором фуксина 1-2 мин., промыть водой, высушить, микроскопировать.
Отношение бактерий к окраске по Граму определяется их способностью удерживать комплекс генцианового-фиолетового с йодом. Это зависит от различий в химическом составе и проницаемости клеточной стенки грамположительных и грамотрицательных бактерий.

Задача № 12.

Методы определения жгутиков подразделяются на прямые и косвенные,  прямые – это электронная микроскопия и микроскопия препаратов с использованием специальных методов окраски. Косвенное определение жгутиков бактерий проводят по их подвижности. Для этого проводят микроскопию препаратов «висячая» и «раздавленная» капли, а так же посев в столбик полужидкого агара. Микроскопия в темном поле зрения основана на явлении дифракции света при сильном боковом освящении взвешенных в жидкостях мельчайших частиц (эффект Тиндаля).

Задача №13.

Описана морфология пневмококков – Streptococcus pneumoniae Светлый ободок, окружающий микроорганизмы, образует неокрашенная капсула, которая не воспринимает красители. Капсулу образуют клебсиеллы пневмонии – Klebsiella pneumoniae, пневмококки – Streptococcus pneumoniae, йерсинии чумы – Yersinia pestis, сибиреязвенные бациллы – Bacillus anthracis и др. Методы выявления капсулы - по Бурри и Бурри-Гинсу.

Задача №14.

Микроорганизмами с такой характеристикой могут быть клебсиеллы пневмонии – Klebsiella pneumoniae. Неокрашенным светлым ободком, окружающим бактерии, является капсула. Для обнаружения капсул бактерий чаще всего используется метод Бурри-Гинса: - на край предметного стекла наносят каплю туши, вносят и эмульгируют в ней культуры бактерий; - делают мазок, как мазок крови; - фиксируют химическим способом; - промывают водой и окрашивают фуксином Пфейффера 1-2 мин; - промывают водой, высушивают на воздухе, микроскопируют.

Задача №15.

Для выявления капсул бактерий чаще всего проводят пол методу Бурри-Гинса. Для окраски по методу Бурри-Гинса необходимы: черная (чертежная) тушь, вода, водный раствор фуксина (фуксин Пфейффера).
    на предметное стекло наносят каплю туши; в полученную каплю вносят небольшое количество агаровой или бульонной культуры и смешивают петлей; с помощью стекла со шлифованным краем распределяют  тушь вдоль предметного стекла (как мазок крови); высушивают и фиксируют мазок; окрашивают водным раствором фуксина 1-2 мин.; промывают водой, сушат, микроскопируют.

Задача №16.

Иммерсионные объективы светового микроскопа: масляный - имеет маркировку в виде кольцевой черной полоски; водный – белую полоску. Иммерсионная система максимально уменьшает рассевание световых лучей, способствуя лучшему  освещению, и дает наибольшее увеличение по сравнению с другими объективами.
    центрировать иммерсионный объектив; нанести каплю масла на предметное стекло и установить его на предметный столик; наблюдая сбоку, опустить объектив до погружения фронтальной линзы иммерсионного объектива в масло; осветить поле зрения; найти изображение вращением на себя макрометрического винта, глядя в окуляр микроскопа; установить четкость изображения вращением микрометрического винта (не более чем на пол-оборота в одну или другую сторону.

Задача №17.

Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 4