Лабораторная работа №1. Тема: «Методика по идентификации вирусов и лабораторной диагностике вирусных болезней рыб (стр. 7 )

Рис. 16. Споры Myxosoma cerebralis

2. Возбудитель миксоболеза карпа - Myxobolus cyprini (рис. 17).

Вегетативная форма возбудителя имеет вид мелких амебоидов неправильной формы или овальных цист диаметром до 1 мм. В амебоидах и цистах образуются многочисленные овальные споры длиной 10-16 мкм., шириной 8-12 мкм., иногда чуть суженные в передней части, с утолщенным шовным валиком. В передней части споры размещены две грушевидные полярные капсулы, сближенные и часто перекрещивающиеся.

Рис. 17. Спора Myxobolus cyprini

3. Возбудитель миксоболеза толстолобика - Myxobolus pavloskil (рис. 18).

Споры почти округлые, длиной 8,5-10 мкм., шириной 9,1-10 мкм. Полярные капсулы неравные по длине. Капсулы разделяет крупный интеркапсулярный отросток. Вегетативные стадии в виде овальных цист размером до 1 мм. Локализуются в соединительной ткани жаберных лепестков белого и пестрого толстолобиков.

Рис. 18. Myxobolus pavloskii

4. Возбудитель хлоромиксоза (желтухи) лососевых - Chloromyxum truttae (рис. 19).

Обитает в желчных протоках печени и в полости желчного пузыря лососевых рыб. Плазмоидальная стадия паразита в виде амебоидов неправильной или округлой формы, диаметром 40-70 мкм. В зрелых плазмодиях образуются по 4 шаровидные споры диаметром 10 мкм. На одном из полюсом споры располагаются 4 мелкие стрекательные капсулы. Споры покрыты толстой двустворчатой оболочкой, снабженной продольными ребрышками.

Рис. 19. Chloromyxum truttae

5. Возбудитель сфероспороза карпа - Sphaerospora branchialis (рис. 20).

Споры почти шаровидной формы с выступающим слегка раздвоенным передним полюсом. Шовный валик выражен довольно четко. Задний полюс слегка уплотнен. В задней части споры латерально от шва имеются хорошо выраженные ушковидные выступы. Обе полярные капсулы грушевидны. Длина спор 8,5-10 мкм, ширина 7,6-9 мкм. Вегетативные стадии паразита имеют вид тонкостенных, округлых цист диаметром 20-170 мкм. Локализация - жаберные лепестки.

Рис. 20. Sphaerospora branchialis

6. Возбудитель воспаления плавательного пузыря - Sphaerospora renicola (рис. 21).

Хозяин: сеголетки карпа; локализация: почки. Стадия спорогонии проходит в почечных канальцах. Вегетативные стадии - округлые плазмодии по 20 мкм в диаметре — «К» простейшие, развиваются в стенках плавательного пузыря. «С» простейшие (тельце Чабе) - в крови и др. органах. В каждом плазмодии образуется по 2 споры. Споры округлые, с гладкими створками. По заднему краю каждой створки образуется по 1 небольшому краевому выросту.

Шовный валик хорошо выражен, особенно на переднем полюсе. Поскольку шов на шовном валике образует заметное вдавление, создается впечатление, что на переднем полюсе споры имеется раздвоенный выступ. У единичных спор на заднем конце наблюдается крупная прозрачная вакуоль неизвестной природы. Небольшие грушевидные полярные капсулы располагаются у переднего полюса споры. Длина спор 7,3 (6,0-8,0), толщина 7,2 (6,4-8,3), длина полярных капсул 1,7-2,3, их диаметр 1,3-1,6 мкм.

Рис. 21. Sphaerospora renicola

По мнению некоторых авторов, вид характеризуется усложненным жизненным циклом. Проникая через кишечник в кровяное русло, амебоидный зародыш, по их мнению, превращается в так называемое тельце Чабе, которое сперва проникает в стенку плавательного пузыря, где вызывает его воспаление, известное под сокращенным названием В. П. П.

Авторы называют данные плазмодии псевдоплазмодиями на том основании, что в них споры непосредственно образуются из споробласта, минуя стадию панспоробласта, появление которого они связывают с заглатыванием одной генеративной клетки другой. Между тем отсутствие панспоробластов характерно для типичных плазмодиев с небольшим числом ядер (Ceratomyxa, Leptotheca и др.). Возникновение панспоробластов рассматривается ими как результат незавершенного внутреннего почкования у миксоспоридий с крупными многоядерными плазмодиями (см.: Шульман, 1966). Поэтому принципиальной разницы между плазмодиями и так называемыми псевдоплазмодиями нет.

7. Возбудитель гофереллеза карпа - Hoferellus су print (рис. 22)

Паразитирует в эпителии и просвете мочевых канальцев. Вегетативные стадии неправильной амебоидной формы до 40 мкм в поперечном сечении. Споры длиной 10-12, шириной 8 мкм пирамидальной формы, с короткими отростками по бокам заднего конца створок. Иногда между этими отростками видно несколько более мелких нитевидных отростков. На каждой створке имеется по 9-10 продольных полос. На переднем полюсе размещены две грушевидные полярные капсулы.

Рис. 22. Hoferellus cyprmi

После обнаружения и изучения вегетативных стадий и спор в органах и тканях рыб, делают мазок с пораженного органа на предметном стекле. Мазки заключают в глицерин - желатин. Изготовленные препараты изучают под масляной иммерсией микроскопа. С помощью определителя выясняют видовую принадлежность миксоспоридий.

Лабораторная работа № 5

Тема: «Биология и методы изучения возбудителей гельминтозов, ракообразных и других паразитов

Моногенеидозы

Нитцшиоз

Нитцшиоз осетровых обусловливается паразитированием плоских гельминтов из класса Monogenea.

Локализация. Моногенеи паразитируют на лепестках жаберного аппарата, в ротовой полости, прикрепляясь к губам, нёбу.

Распространение и экономический ущерб. Нитцшиоз зарегистрирован у рыб Каспийского и Азовского морей, а также водоемов Западной Европы. Экономический ущерб складывается из потерь в результате уменьшения массы больных рыб, отставания их роста и развития, а также гибели при интенсивной инвазии.

Возбудитель. Nitzschia sturionis относится к сем. Capsalidae. Тело гельминта продолговато-овальное, длиной 10— 25 мм, шириной 3,2 мм (рис.1).

Рис. 1 .Возбудитель нитцшиоза Nitzschia sturionis: 1 - железистый орган; 2 - присоска; 3 - кишечник; 4 - яичник; 5 - семенники; 6 — желточники; 7 — прикрепительный диск

Развитие нитцшии происходит прямым путем. Половозрелые нитцшии откладывают яйца на жабрах и в ротовой полости рыб, которые с помощью

липкого секрета прикрепляются в местах их паразитирования. Из яиц вскоре вылупляются личинки, способные прикрепляться к жабрам и слизистой оболочке ротовой полости хозяина, или попадают в воду и поселяются на других особях, где они вскоре достигают стадии имаго. В воде личинки способны заражать своего хозяина в течение 5—6 ч. Взрослые гельминты после гибели зараженной рыбы живут не более 24 ч.

Диклиботриоз

Возбудитель заболевания - моногенея Diclybothrium armatum, паразитирует на жабрах осетровых рыб. Заболевание отмечается у рыб разного возраста при нарушении условий их содержания. Гибель может достигать 80%.

При заболевании рыбы перестают брать корм, держатся у поверхности воды. Жабры покрыватся толстым слоем слизи. При высокой интенсивности заражения отмечается некроз жаберных лепестков.

Паразит достаточно крупный и виден невооружённым глазом. Для постановки диагноза заболевания проводят осмотр жабр визульно, а затем делают соскоб и исследуют его под бинокуляром.

Передача возбудителя происходит от заражённых рыб, через воду и рыбоводное оборудование.

Трематодозы. Диплостомоз

Диплостомоз вызывается метацеркариями трематоды из семейства Diplostomidae, класса Trematoda.

Возбудитель. Возбудителем является метацеркарий сосальщика — Diplostomum spathaceum. Взрослый паразит плоский, с длиной тела 0,4-0,5 см и шириной 0,2-0,3 см. В середине тела есть перетяжка, которая делит его на переднюю листовидно-расширенную часть и заднюю часть, более узкую, короткую, цилиндрическую.

Метацеркарий овальной формы, длиной 0,3-0,4 мм (рис. 2).

Рис.2. Возбудители диплостомоза — метацеркарий

а — Diplostomum spathaceum; б — D. megri;

1 — общий вид; 2 — расположение известковых телец;

3 — ротовая присоска; 4— брюшная присоска;

5 — ушки; 6— глотка; 7— кишечник;

8—железистый орган Брандеса

Биология развития. Дефинитивными хозяейами являются рыбоядные птицы, преимущественно чайковые, реже — рыбоядные утки. Промежуточные хозяева — пресноводные моллюски Lymneae stagnalis, Radix ovata и др., дополнительные —-рыбы. В кишечнике птицы гельминты откладывают яйца, которые при выходе наружу содержат мирацидии. Мирацидии, плавая в воде, отыскивают моллюсков и внедряются в их печень, где происходят бесполое размножение, образование спороцисты, редии и вилохвостых церкариев. Церкарии покидают организм моллюска и, попав в воду, внедряются через кожный покров в мышцы рыб и затем по кровеносным сосудам попадают в глаза, далее в хрусталик, где вскоре превращаются в метацеркариев. Считают, что метацеркарий в рыбе могут быть жизнеспособными 3—4 года. В кишечнике птиц трематоды достигают половой зрелости через 4—5 сут.

Цестодозы Амфилиноз осетровых

Амфилиноз осетровых рыб обусловливается ленточными гельминтами из класса Cestoda, семейства Amphilinidae.

Локализация. Цестоды паразитируют в полости тела рыб, а иногда в плавательном пузыре и гонадах.