СТАВРОПОЛЬСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ МЕДИЦИНСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ
УТВЕРЖДАЮ
проректор по научной
и инновационной работе, д. м.н.,
_____________Е. В. ЩЕТИНИН
«____» _____________20 __ г.
«Актуальные аспекты патогенеза, клиники, диагностики и лечения иммунопатологических заболеваний»
по специальности: 14.03.09. – клиническая иммунология, аллергология
Научный руководитель:
зав. каф. иммунологии
д. м.н., профессор
Ответственный исполнитель:
профессор каф. иммунологии,
д. м.н.
Ставрополь, 2016
Актуальность проблемыИммунология проникает во все области медицины и становится одной из ведущих клинических дисциплин. Врачи на практике всё чаще имеют дело с иммунокомпрометированными больными. В реестр клинической иммунологии сегодня входят не только традиционные иммунодефициты, аутоиммунная патология, но и заболевания, число которых постоянно растет, включая синдром приобретенного иммунодефицита (СПИД), аллергопатологию, хронические воспалительные заболевания, рак и многие другие.
За последние десятилетия аллергические болезни приобрели масштаб глобальной медико-социальной проблемы. Распространенность аллергического ринита в Ставропольском крае достигает 44,8%, бронхиальной астмы – 27%, атопического дерматита – 24,6%, что превышает показатели в Российской Федерации. Ежегодно в крае появляется более 2 тысяч новых больных с аллергопатологией. При этом лишь 18% пациентов получает специализированную помощь на первом году развития процесса, растет число запущенных случаев аллергических заболеваний.
Бронхиальная астма (БА) – одно из наиболее распространенных хронических заболеваний современного общества. Сегодня во всем мире БА страдает около 300 миллионов человек, к 2025 г. этот показатель может составить 400 миллионов. В начале 21 века уровень смертности в мире от БА вырос в 9 раз по сравнению с 90-ми годами [, 2012, , 2014]. В России распространенность БА составляет 5,6-7,3% [, , 2014]. Ежегодно от БА погибает около 43 тыс. человек, по смертности от БА РФ занимает второе место в мире после Китая [, 2012].
В последние годы генетика БА становится объектом международных исследований и активно развивающейся областью медицины. В рамках генной диагностики БА значительный интерес представляет функциональный полиморфизм генов регуляторных молекул и Toll-like рецепторов (TLRs) [, 2010, Lachheb J., Dhifallah I. B., 2008, Klassen E. M. et al., 2013].
Регуляторные молекулы CD14 и TLRs играют центральную роль в инициации врожденного иммунного ответа на многие патогены [, , 2007, , 2009, , 2010].
В исследованиях последних лет показана роль Toll-like рецепторов в распознавании «паттернов» бактерий и вирусов с активацией адаптивного иммунитета, каскада неспецифических базовых воспалительных реакций, вовлеченных в патогенез БА [, 2010, и др., 2014, Smit L. A. et al., 2009, Klaassen E. M. et al., 2013].
Известно, что полиморфизм гена CD14 (rs2569190) влияет на восприимчивость к астме и тяжесть ее течения [Martin A. C. et al., 2006, Zhao L. et al., 2011, Klassen E. M. et al., 2013].
В последние годы пересмотрены и алгоритмы диагностики БА. Введено понятие фенотипов БА, основанных на особенностях клинической картины, патогенетических характеристик, ответа на терапию [Wenzel S. 2012]. В основе
В основе определения фенотипов БА лежит определение системных биомаркёров воспаления, одним из которых является периостин.
Периостин (остеобласт – специфический фактор) – экстрацеллюлярный белок, находящийся в межуточном веществе и проецируемый фибробластами после повреждения под действием ИЛ13 [Kong P. 2013]. Простой в определении маркёр воспаления, позволяющий оценить текущие процессы ремоделирования бронхов, т. е. сделать вывод о достаточности противовоспалительной терапии ГКС, позволяет предсказать возможную эффективность альтернативных методов – моноклональных антител к ИЛ 13.
Одним из важных вопросов современной сифилидологии является проблема серорезистентности [Прохоренков В:И., , 2005, и соавт., 2012]. Многочисленные данные свидетельствуют о преимущественном развитии серорезистентности из скрытых форм сифилиса [,1987; , 1979]. Увеличение больных скрытым сифилисом является актуальной проблемой во всем мире [Marjfnovic А. К. et al., 2003, Fabiano Р Leal et al., 2006, и др., 2015].
Известно, что течение и исход инфекции в значительной степени зависят от иммунологического состояния макроорганизма, роль которого при сифилисе активно изучается [, 2000, , 2002, , 2005, , 2005].
Объектом международных исследований при сифилисе в настоящее время является структура и функции Toll-like рецепторов (TLR), играющих центральную роль в системе противобактериальной защиты организма [Marra C. M., Sahi S. K., 2014]. Установлено, что липопептид T. pallidum способствует увеличению синтеза IL-12 и костимулирующей молекулы В7-2 моноцитами, несущими TLR2, что сопровождается пролиферацией Т-лимфоцитов и выработкой цитокинов Th1 профиля [Hertz C. J., Kiertscher S. M., Godowski P. J. et al., 2002].
Показано, что флагеллиновые субъединицы бледной трепонемы способны взаимодействовать с TLR5, активируя NF-кB с последующей выработкой фактора некроза опухоли-б (TNF-б) и усилением синтеза оксида азота [Mizel S. B., Bates J. T., 2010].
Выявлены ассоциации генного полиморфизма TLR1, TLR2, TLR6 с развитием серорезистентного и скрытых форм сифилиса [Marra C. M., Sahi S. K., 2014].
Аллергический контактный дерматит (АКД) – одно из самых распространенных заболеваний, которое наблюдается у 2-2,5% населения Земли и значительно снижает качество жизни пациентов: отрицательно влияет на их учебу, социальную адаптацию и профессиональную деятельность. С развитием косметологии, фармакологии и химической промышленности аллергический контактный дерматит наиболее часто встречается среди взрослого населения. Ежегодно причиной развития АКД являются новые аллергены химического происхождения. Однако выявление конкретного причиннозначимого аллергена является сложной задачей в отечественной аллергологии.
Церебральная ишемия является самой частой формой патологии мозга у детей раннего возраста, перенесших перинатальное поражение ЦНС (ПП ЦНС) и регистрируется с частотой 1-3 на 1000 доношенных новорожденных в развитых странах и в 5-10 раз чаще – в развивающихся [Higgins R. D., Raju T., еt al., 2011].
В современных исследованиях показана вовлеченность иммунных механизмов в патогенез перинатальных поражений ЦНС [, 2011, Shastri A., Bonifati D. М., Kishore U., 2013, Rocha-Ferreira Е., Hristova М., 2015]. Активация врожденной иммунной системы является важной частью воспалительного ответа и ключевым событием в неблагоприятном исходе ишемии головного мозга [Trendelenburg G., 2008].
Установлено, что нейроглиальная активация сопровождается увеличением синтеза про - и противовоспалительных цитокинов, что приводит к индукции нейроповреждающих медиаторов и лейкоцитарной инфильтрации ткани мозга Установлена нейродеструктивная роль IL1, IL6, TNFб и нейропротективная – IL10 и TGFв [Kendall G. S, Hristova M., 2010, Bartkowska K., 2010., Beschoner R., 2011]. Несмотря на значительное количество исследований, точные механизмы врожденного иммунного ответа при перинатальных поражениях ЦНС до сих пор не установлены. Ведется поиск ранних маркеров повреждения головного мозга, исследуются возможные пути защиты от повреждающего действия иммунных нейромедиаторов, а также способы активации репаративных процессов [Bartkowska K., 2010., Beschoner R., 2011].
Цель исследования определить клинико-диагностическое и прогностическое значение генного полиморфизма CD14, TLR2 и TLR6 у больных аллергической бронхиальной астмой и серорезистентными формами сифилиса; доказать значимость периостина, как системного маркера атопической астмы, биомаркёра активности бронхиального Th2 – опосредованного воспаления при бронхиальной астме у детей и взрослых; определить клиническое значение кателицидина LL37, белков системы комплемента, про - и противовоспалительных цитокинов в развитии гипоксически-ишемического поражения ЦНС и оценить возможность их использования в качестве диагностических и прогностических критериев; расширить спектр диагностических и дифференциально-диагностических критериев для аллергического контактного дерматита у взрослых, бронхиальной астмы. Задачи исследования изучить эпидемиологические и клинико-лабораторные особенности аллергологических и иммунопатологических заболеваний у пациентов в Ставропольском крае; установить взаимосвязь генотипов CD14, TLR2 и TLR6 с основными клинико-инструментальными показателями у больных с различной патологией; изучить уровень биомаркеров воспаления (ИЛ1в, TNFб и TGFв, ИЛ10, C1q, C3, C4) у новорожденных с гипоксически-ишемическим поражением ЦНС. определить зависимость уровня периостина крови от уровня контроля при бронхиальной астме, ее длительности и тяжести течения; расширить спектр низкомолекулярных аллергенов для диагностики и дифференциальной диагностики аллергического контактного дерматита. Объект исследования амбулаторные карты, данные лабораторного обследования, истории болезни пациентов с иммунопатологий, аллергопатологией; группы пациентов с иммунопатологий и аллергопатологией; контрольная группа пациентовИзучаемые явления особенности иммунного статуса у пациентов с иммунопатологией, аллергопатологией; полиморфизм генов Toll-рецепторов (TLR-2,TLR-6) и регуляторной молекулы CD14 при иммунопатологических заболеваниях; биомаркеры воспаления – периостин, ИЛ1в, TNFб и TGFв, ИЛ10, кателицидина LL37, белки системы комплемента (C1q, C3, C4) при иммунопатологических заболеваниях; определение низкомолекулярных аллергенов (гаптенов) при иммунопатологических заболеваниях;
Методы исследования ретроспективный анализ историй болезни (обменных карт); эпидемиологическое исследование; лабораторно-инструментальное исследование (общий анализ крови, общий анализ мочи, биохимический анализ крови, общий анализ мокроты), инструментальные методы нейровизуализации (УЗИ, КТ или МРТ, ЭКГ); аллергологическое исследование (метод кожного тестирования: патч-тест, прик-тест), линейки-трафареты для оценки этапов эволюции кожных элементов, гистологические препараты для морфологической оценки кожи, хроматограммы, вопросники для пациентов с иммунопатологическими заболеваниями); иммунологическое исследование (определение в сыворотке уровней цитокинов (ИЛ1в, TNFб и TGFв, ИЛ10), кателицидина LL37 и белков системы комплемента (C1q, C3, C4), определение показателей клеточного и гуморального звена иммунитета, определение периостина и специфических Ig E); метод полимеразной цепной реакции для определения генного полиморфизма иммунорегуляторных молекул и рецепторов врожденного иммунитета; статистическое исследование (методы вариационной статистики: критерий Манна-Уитни, корреляционный анализ, анализ шансов с помощью пакета программ Statistica for Windows 6,1 (Statsoft Inc., США) и программного обеспечения MS Exсel (Microsoft); Используемые средства клинические исследования пациентов; лабораторно-инструментальные методы исследования; ретроспективный анализ историй болезни; иммунологические и аллергологические методы исследования; статистические методы. Новизна исследования роль гуморальных факторов врожденного иммунитета в развитии гипоксически-ишемических повреждений мозга у новорожденных и маркеры тяжести повреждений нервной системы, значимых для прогнозирования психоневрологического развития детей на первом году жизни; состояние клеточного и гуморального звена иммунитета у больных скрытыми формами сифилиса и серорезистентностью во взаимосвязи с полиморфизмом генов Toll-рецепторов (TLR-2,TLR-6); генные полиморфизмы регуляторной молекулы CD14 и Toll-like рецепторов TLR-2, TLR-6 при аллергической бронхиальной астме и их влияние на степень тяжести заболевания, особенности его течения, ответ на базисную терапию и вакцинацию; уровень периостина у детей БА в РФ в зависимости от степени тяжести и уровня контроля БА, фенотипа заболевания, связь периостина с ремоделированием бронхов при персистирующей астме у детей; особенности клинического фенотипа больных с высоким уровнем периостина, корреляция с традиционными маркерами атопических заболеваний; выделение методом хроматографии аллергена для персонализированной диагностики АКД; использование гидрофильных и гидрофобных пластырей для постановки патч-тестов, расширение дифференциально-диагностические критериев в период обострения и ремиссии АКД, объективные и морфологические изменения воспаления кожи в зависимости от дозы и длительности экспозиции одноименного аллергена; расширен спектр низкомолекулярных аллергенов для диагностики АКД, предложены вопросники для диагностики и дифференциальной диагностики АКД на доврачебном этапе.
Годовые этапы исследования
2017 г. – изучение медицинской литературы по исследуемой проблеме; освоение необходимых методик, эпидемиологические и иммунологические исследования, направленные на оценку здоровья пациентов с иммунопатологическими заболеваниями;
2018 г. – определение клинико-диагностического и прогностического значения генного полиморфизма CD14, TLR2 и TLR6 у больных аллергической бронхиальной астмой и серорезистентными формами сифилиса; определение значимости периостина, как системного маркера атопической астмы;
2019 г. – определение клинического значения кателицидина LL37, белка системы комплемента, про - и противовоспалительных цитокинов в развитии гипоксически-ишемического поражения ЦНС и оценка возможности их использования в качестве диагностических и прогностических критериев;
2020 г. – расширение спектра диагностических и дифференциально-диагностических критериев для аллергического контактного дерматита у взрослых, изучение уровеня биомаркеров воспатения (ИЛ1в, TNFб и TGFв, ИЛ10) у новорожденных с гипоксически-ишемическим поражением ЦНС.
2021 г. – статистическая обработка полученных результатов.
Ожидаемые результаты полученные результаты позволят определить клинико-диагностическое и прогностическое значение генного полиморфизма CD14, TLR2 и TLR6 у больных аллергической бронхиальной астмой и серорезистентными формами сифилиса; полученные результаты позволят доказать значимость периостина, как системного маркера атопической астмы, биомаркёра активности бронхиального Th2 – опосредованного воспаления при бронхиальной астме у детей и взрослых; полученные результаты позволят определить клиническое значение кателицидина LL37, белков системы комплемента, про - и противовоспалительных цитокинов в развитии гипоксически-ишемического поражения ЦНС и оценить возможность их использования в качестве диагностических и прогностических критериев; полученные результаты позволят расширить спектр диагностических и дифференциально-диагностических критериев для аллергического контактного дерматита у взрослых, бронхиальной астмы. Поэтапные формы внедрения
2017 г. – публикация 3-х статей в журналах рецензируемых ВАК, 4 статьи и 2 доклада на конференциях краевого уровня.
2018 г. – публикация 4-х статей в журналах рецензируемых ВАК, 4 статей в сборниках научных конференций и 2 доклада на конференциях федерального уровня.
2019 г. – публикация 3-х статей в журналах рецензируемых ВАК, 2 статей в сборниках научных конференций и 2 доклада на конференциях федерального уровня, публикация методических рекомендаций по иммунопатологическим заболеваниям.
Медико-социальная эффективностьПо результатам исследования будет выявлена взаимосвязь между уровнем факторов врожденного иммунитета и адаптивного иммунитета тяжестью поражения больных с иммунопатологическими заболеваниями, возможность прогнозировать ранние и отсроченные последствия поражения различных органов, разрабатывать тактику медикаментозного лечения и средств реабилитации. Выводы и практические предложения данного исследования позволят выявить зависимость течения заболевания и эффективность терапии от полиморфизма CD14, TLR-2,TLR-6 у пациентов с иммунопатологическими заболеваниями.
Область примененияпрактическое здравоохранение всех уровней:
- профилактическое; амбулаторно-поликлиническое; стационарное; специализированное.
Уровень внедрения
- Краевой; Региональный; Федеральный;
Охраноспособность темы – неохранноспособна Комплексирование
- Внутреннее: кафедра поликлинической педиатрии, кафедра госпитальной терапии, кафедра детских инфекционных болезней, кафедра дерматовенерологии и косметологии с курсом ДПО ГБОУ ВПО СтГМУ
- Внешнее: ГБУЗ СК «ДККБ», ГБУЗ СК «СККБ», ГБУЗ СК «ГДКБ им. Филиппского» г. Ставрополя, ФКУЗ «Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт» Роспотребнадзора, «Ставропольский краевой КДЦ».
Научный руководитель:
зав. каф. иммунологии
д. м.н., профессор
Ответственный исполнитель:
профессор каф. иммунологии,
д. м.н.
