Дифференциально-диагностические свойства и чувствительность к антибактериальным препаратам бактерий Pseudomonas aeruginosa (стр. 5 )

В целом считается, что псевдомонад чаще выявляется в почве богатой органическими соединениями, из водных источников теплых климатических регионов. В регионах с холодным климатом псевдомонад не является нормальным обитателем поверхностных вод. А поступает в них из кишечника животных и человека.

Исходя из того, что в открытых водоемах, не сообщающихся со сточными водами, этот микроорганизм не выявляется, а обнаруживается только во время купального сезона, человек и животные контаминируют водные источники, являясь основным резервуаром микроорганизма (Kandas I.,1981).

При исследовании 606-ти проб воды открытых водоемов и сточных вод выявили значительное загрязнение водной среды Р. аеruginosa от 23 до, 100% проб речной воды и 100% проб сточных вод. В связи с такими результатами, авторы предлагают внести выделение псевдомонада в схему комплексного санитарно-биологического анализа воды, как санитарно-гигиенического критерия ее чистоты ( и соавт.1982).

При изучении экологических условий циркуляции Р. аеruginosa во внешней среде и в связи с возросшей ролью данного вида в патологии людей, учёные выделяли 30 культур синегнойной палочки из воды, 31 культуру из почвы, 101 культуру из фекалий сельскохозяйственных животных и 14 культур от больных людей. Причем, культуры, выделенные от людей и животных, отмечались наличием многих факторов патогенности и полирезистентность к антибиотикам (, , 1981). Благодаря широкому и не всегда оправданному применению антибиотиков в условиях стационаров наблюдается селекция вирулентных, высокорезистентных штаммов Р. аеruginosa (, 1984).

Усиление роли Р. аеruginosa, как возбудителя спорадических, эпидемических заболеваний и тяжелых инфекционных осложнений у людей ( 1961; и соавт., 1975; и соавт., 1990; Борисова O. K., и соавт., 1983; и соавт., 1990;  и соавт., 1986; ,1985; и соавт., 1981; и соавт.,1977; , ,1986; Clements J. A., 1962). Как уже было отмечено ранее, псевдомонад настолько широко распространена, что неудивительно и большое значение ее в патогенезе многих заболеваний человека и животных. Однако, надо отметить. Что зачастую клиническое проявление заболевания и длительность его могут варьировать в широких пределах. Причиной этого, как правило, являются ассоциативные формы болезни, возникающие в результате одновременного воздействия на организм нескольких видов условно-патогенных микроорганизмов.

Частота выделения бактерий  Pseudomonas aeruginosa из пищевого сырья и продуктов. Послеубойное обсеменение тушек птицы происходит в ходе технологического процесса убоя и обработки. Микрофлора поверхности тушек представлена главным образом аэробными бесспоровыми палочками из родов Pseudomonas (до 70…75%) ( и соавт., 2010; ,2006). Для более полного удаления микроорганизмов применяют комбинированную обработку молока, сочетая бактофугирование с пастеризацией. При этом из молока удаляют до 99,9% бактерий. До переработки молоко должно храниться в охлажденном состоянии при температуре до 2-4 ℃ для создания условий,  замедляющих развитие в нем микроорганизмов. При температуре 2-4 ℃  развитие большинства микроорганизмов в молоке приостанавливается, однако могут размножаться психрофильные бактерии рода Pseudomonas и некоторые другие микроорганизмы. Содержание микроорганизмов (бактерии родов Vibrio, Pseudomonas, Acinetobacter) в свежевыловленных тихоокеанских креветках составляет от 8,6*102  до 1,3*10 6 КОЕ/г. Более 70% микрофлоры замороженных креветок составляют грамположительные бактерии родов Micrococcus, Streptococcus, Stephylococcus, Microbacterium, Corynebacterium, а также грамотрицательные микроорганизмы – родов Flavobacterium, Cytofaga, Pseudomonas и др.  В охлажденных омарах  преобладают бактерии родов  Pseudomonas,  cinetobacter. Условно-патогенные и токсигенные микроорганизмы обнаруживаются редко,  а если выявляются, то в очень малых количествах (, 1995). В мясе и соке охлажденных льдом устриц и мидий содержится большое количество мезофильных микроорганизмов. В процессе хранения количество мезофильных микроорганизмов снижается, а психрофильных увеличивается. В микрофлоре охлажденных устриц и мидий преобладают Lactobacillus и Pseudomonas.

Псевдомонады были выделены из сырой мороженной свинины, говяжьего мяса, фляжного молока, из готовых блюд на предприятиях общественного питания и из других пищевых продуктов (Ali Luzan A., 1982). При исследовании 60 образцов Fast food и традиционной блюда, из Mathabib и салат были выделены P. аeruginosa. Появление P. aeruginosa при температурах (20,30,40єС) от традиционных продуктов питания из разных ресторан, а при 10 єС и 50 єС не были выделены. Из Fast Food были выделены при 10, 20, 30, 40 єС, а при 50 єС не были (Saadia M., Hassanein Easa, 2010). При исследовании 300 проб мяса из говядины (n=100), курицы  (n=100), chevron (n=100) были выделены 6(2%) культур P. аeruginosa из говядины (Iroha I. R. et al.,2011).

Описаны вспышки пищевых токсикоинфекций псевдомонадной этиологии и обнаружение Ps. aeruginosa в пищевых продуктах, особенно богатых белками (мясо, рыба), что характеризует последние как возможный источник пищевой токсикоинфекции. Острые кишечные инфекции псевдомонадной этиологии клинически протекают в виде диарей той или иной тяжести, особенно тяжело у детей, пожилых людей и больных хроническими заболеваниями, а при пищевых токсикоинфекциях - со всеми признаками этиопатогенеза этого типа заболеваний (Huang Meizi. et al.,2003, Shen Ying. et al.,2010, He Lanxiang, et al.,2012).

P. aeruginosa вызывает порчу белковых пищевых продуктов (в первую очередь мясомолочных) (Стефанов, 1997).  Псевдомонады  характеризуются  высокой протеолитической  и  липолитической  активностью, способны сбраживать углеводы с образованием кислот, продуцировать слизь. Развитие  и  биохимическая  активность  этих  бактерий затормаживаются при рН ниже 5,5  и  при 5 – 6%-ной концентрации поваренной соли. Псевдомонады  являются  антагонистами  многих бактерий и плесеней, т. к. вырабатывают антибиотические вещества. В установленном температурно-влажностном режиме хранения в охлажденном мясе активно размножаются и становятся преобладающими  неспорообразующие грамотрицательные палочки родов Pseudomonas. Наиболее  активно размножаются бактерии рода Pseudomonas, которые обладают антагонистическими свойствами в отношении других микроорганизмов. Через несколько недель бактерии рода Pseudomonas составляют 90% микрофлоры охлажденного мяса. Эти бактерии выделяют активные ферменты, расщепляющие белки и жиры, а также вырабатывают слизь. Они являются возбудителями гниения охлажденного мяса, которое хранится сверх допустимого срока (, 2004, Ashok Kumar. et al.,2011). Бактерии рода Pseudomonas (P. fluorescens, P. aeruginosa) гидролизуют составные части яйца с образованием специфических продуктов гниения, благодаря которым белок становится зеленым. При развитии бактерий Proteus vulgaris и некоторых представителей рода Pseudomonas появляется черная гниль. Содержимое яйца разжижается и становится коричневого или черного цвета. Образовавшиеся  газы часто разрывают скорлупу, а содержимое выливается на соседние яйца и загрязняет их.

На фоне псевдомоноза могут возникнуть вторичные бактериальные инфекции, которые сыграют важную роль в развитии необратимых процессов. Может быть и наоборот, когда псевдомонад, попадая в организм, провоцирует заболевание. В связи с этим при диагностике возбудителя псевдомонада и изучении патогенеза болезни необходимо обращать внимание на наличие и роль микробных ассоциаций. Встречаемость псевдомонада среди других возбудителей инфекционных осложнений с годами увеличивается (с 3,4% в 1965-1971 гг. до 11,2% в 1968 г.). Причем 39-46% штаммов были выделены из мочи, 28-39% - из послеоперационных ран. Авторы отмечают, что в 60% случаев штаммы псевдомонада встречаются в составе полимикробных ассоциаций и этому способствует тот факт, что с годами чувствительность псевдомонада к антибиотикам снижается. Так, по сравнению с 1985 годом она снизилась в отношении гентамицина с 80,4 до 65,3%, тобрамицина с 87,7 до 76,2%, стрептомицина с 73,9 до 52,0%. В этиологии и патогенезе хронического заболевания легких и плевры у человека основная роль принадлежит энтеробактериям и Р. аeruginosa. По их данным, в отмытой мокроте в трахеобронхеальном экссудате больных хроническим заболеванием легких и плевры в большинстве случаев содержится сложная ассоциация микробов, одним из сочленов которой являются  Р. аeruginosa (54,9±6,9%) или энтеробактерии (56,9±6,9% – E. coli), Enterobacter spp., Citrobacter spp., Serratia spp., К. Pneumoniae(, 2011; Борисова O. K. и соавт., 1983).

1.4. Чувствительность Pseudomonas aeruginosa к антибактериальным средствам

  Антибиотики (S. A. Waksman, 1942) – группа природных или полусинтетических органических веществ, разрушающих или подавляющих размножениемикроорганизмов. Антибиотики  природного происхождения получают экстрагированием  из колоний грибов или бактерий, тканей растений или животных, для получения полусинтетических антибиотиков исходную молекулу подвергают дополнительным химическим модификациям. Для рационального применения антибактериальных препаратов необходимо соблюдать основные принципы: изучение антибиотикограммы эпизоотических штаммов микроорганизмов; выбор наиболее активного и наименее токсического препарата; определение оптимальных доз и методов введения, на основе знания особенностей кинетики препаратов; своевременное начало  и проведение курса для достижения терапевтического эффекта; знание частоты встречаемости побочных эффектов препаратов, например, гепато-нефротоксический эффект; комбинирование препаратов с целью усиления антибактериального эффекта (, 1985; , , 1998). Данные литературы изложены в соответствии с классификацией антибактериальных препаратов по  механизму и спектру действия:

в-лактамы группы природных пенициллинов и нескольких поколений цефалоспоринов, нетрадиционных в-лактамаз; макролиды; аминогликозиды; тетрациклины, основой молекулы антибиотиков является полифункциональное соединение – тетрациклин; хлорамфеникол (левомицетин); фосфомицины из группы фосфоновой кислоты; Хинолоны (нефторированные хинолоны и фторхинолоны) – неприродные соединения).

Р. aeruginosa обладает множественной лекарственной устойчивостью (, 1988; , 1999; , 1986; Clements J. A., 1962; Sonntag C., 1986) и даже способна к контаминации растворов антибиотиков. Это является характерной и важной особенностью псевдомонадов. Высокая лекарственная устойчивость псевдомонад обусловлена R-плазмидами, а не хромосомами клетки.(Emmanoulidou - Arseni A. et al., 1964; Reuben R. et al., 1987). Число маркеров резистентности в 11-плазмиде достигает 11-12, и все они могут передаваться совместно при конъюгации и трансдукции как внутри вида, так и между бактериями разных видов и родов, в то время как в хромосоме возникает устойчивость только к одному, реже к двум, антибиотикам, близким по механизму действия. Такая большая возможность передачи генетической информации об устойчивости к антибиотикам как в пределах вида, так и рода, способствует формированию полирезистентных штаммов Р. аeruginosa, что усложняет борьбу с данной инфекцией.