КЛИНИКО-МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ПАРАЛЛЕЛИ В ПАТОГЕНЕЗЕ ПИТАТЕЛЬНОЙ НЕДОСТАТОЧНОСТИ ПРИ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКТИВНОЙ БОЛЕЗНИ ЛЕГКИХ (стр. 3 )

Примечание: Достоверность различий(p<0,05): *-между ТМТ определенной методами антропометрии и биоимпедансометрии у пациентов ХОБЛ

Рисунок 2. Показатели ТМТ, определенные методами антропометрии и биоимпедансометрии, в зависимости от значений ИМТ

Согласно нашим результатам во всех исследованных биоптатах у здоровых людей регистрируются клетки кожи, подкожно – жировой клетчатки и поперечнополосатой мускулатуры, с обычной гистоархитектоникой и без признаков метаболической альтерации и патологических изменений (рис. 3, а, б, в).

а)б) в) г) Рисунок 3. Морфологическое исследование биопсии тканей кожи и поперечнополосатой мускулатуры лиц контрольной группы: а, б – кожа и соединительная ткань; в - поперечнополосатая мышечная ткань; и пациентов с III стадией ХОБЛ (г). Окраска гематоксилин и эозин. Увеличение х100

В биоптатах пациентов ХОБЛ (рис. 3, г), видимых изменений в эпидермисе не обнаружено. В соединительной ткани гиподермы преобладает фиброретикулярная ткань, мышечные волокна единичные, встречаются включения жировой ткани. Наиболее выраженные изменения регистрируются у пациентов с III стадий ХОБЛ, что является косвенным морфологическим проявлением системного процесса, затрагивающего поперечнополосатую мускулатуру в условиях которого происходит ее замещение фиброретикулярной брадитрофной тканью.

Для уточнения ультраструктуры тканей кожи и поперечнополосатой мускулатуры у пациентов ХОБЛ проведено электронно — микроскопическое исследование полученных образцов (рис. 4). Как следует из представленных данных, в электронограммах преобладают фиброциты.

а)б)в)г) д)

Рисунок 4. Электронограммы фиброцитов контрольной группы исследования (а), пациентов с I стадией ХОБЛ (б), со II стадией ХОБЛ (в, г) и III стадией ХОБЛ (д).

На электронограммах у обследованных контрольной группы (а) и пациентов с I стадией ХОБЛ (б), определяется ядро клеток, которое равномерно заполнено хроматином, в нем четко визуализируется ядрышко с гомогенным содержимым. Цитоплазма клеток заполнена микротрабекулярной сеткой из тонких белковых миофиламентов диаметром 5-7 нм, обеспечивающих движение клетки. Плазмолемма фибробласта имеет многочисленные рецепторы. На внутренней поверхности цитолемы отмечаются многочисленные окаймленные ямки, что свидетельствует об эндоцитозе.

На электронограммах пациентов со II стадией ХОБЛ (в), в ядре фиброцита помимо активного хроматина (эухроматина) имеются глыбки гетерохроматина (электронно-плотные структуры, фиксированные к внутренней ядерной мембране), отсутствует ядрышко. Наблюдаются перфориванная ядерная оболочка и появление вакуолей в гетерохроматине, указывающие на начальные признаки апоптоза. Уменьшается площадь цитоплазмы (г). На электронограммах пациентов с III стадией ХОБЛ (д) преобладают фиброциты с характерным проявлением апоптоза в ядре. Хроматин конденсируется по периферии, под мембраной ядра, при этом образуются четко очерченные плотные массы различной формы и размеров, наблюдается перфориванная ядерная оболочка. В цитоплазме видны измененные в митохондриях в виде снижения плотности, количества органелл под сарколеммой; полиморфизм с наличием крупных, удлиненных, пучкующихся форм и преобладанием мелких овальных органелл; дезорганизация архитектоники и структуры крист, свидетельствующие о нарушении структуры и функции митохондрий. Большинство исследований описывающих изменение ультраструктуры клеток периферических тканей при ХОБЛ отмечают изменение состояния волокон поперечнополосатой мускулатуры в виде уменьшения доли мышечных волокон I и II типа, уменьшения количества капилляров на единицу площади поверхности мышечной ткани [Palange P., Deutz N. E., 2004]. Согласно нашим результатам процессы дезорганизации структуры захватывают не только поперечнополосатую мускулатуру, но и клетки дермы, указывая на системность происходящих процессов метаболической альтерации и структурного ремоделирования.

В литературе активно обсуждаются вопросы патогенеза потери тощей массы тела у пациентов ХОБЛ. Наиболее часто упоминается вклад гипоксии и плохо контролируемого системного воспаления низкой градации. Полагают, что гипоксия играет важную роль в нарушении регенеративной способности мышечной ткани при ХОБЛ, вследствие развития лактатацидоза [P. Palange, 2004], и нарушения капилляризации периферических мышечных волокон (F. Franssen, 2003). К сожалению рекомендуемая кислородотерапия не устраняет в полной мере потерю скелетной мускулатуры и достоверно увеличивает выживаемость пациентов только с IV стадией ХОБЛ [Payen J. F., Agusto A. G., Noguera A., 2006]. Исследования показателей активности системного воспаления у пациентов ХОБЛ с питательной недостаточностью показали их отрицательное влияние на тяжесть обострения и показатели бронхообструкции [Kokturk N.,2006]. Тем не менее, контроль за процессами системного воспаления при ХОБЛ затруднен. Использование глюкокортикостероидов при ХОБЛ не увеличивает продолжительность жизни и приводит к еще более выраженной потере скелетной мускулатуры.

Одновременно с потерей поперечнополосатой мускулатуры при ХОБЛ возможно усиление процессов толерантности к инсулину и увеличение риска развития сахарного диабета. В качестве одного из объединяющих механизмов прогрессирования питательной недостаточности и увеличения метаболического и сердечнососудистого риска у пациентов ХОБЛ рассматривается нарушение адипокинового обмена или гормонов жировой ткани лептина и адипонектина [, ]. Результаты иммуноцитохимического исследования локализации рецепторов к лептину в тканях кожи и поперечнополосатой мускулатуре у здоровых и пациентов ХОБЛ представлены на рисунке 5.

Рисунок 5 (а, б, в, г). Рецепторы к лептину в группе контроля (а), при I(б),II(в),III(г) стадии ХОБЛ (метод иммунофлюорисценции; увеличение х200).

В тканях контрольной группы положительная иммуноцито-химическая реакция обнаруживается в цитоплазме и на мембране клеток. Выраженная экспрессия метки в группе контроля наблюдается во всех слоях эпидермиса и клетках дермы, подкожно – жировой клетчатке и мышечной ткани. У пациентов ХОБЛ наблюдается изменение рецепторного аппарата эпителиальных клеток, что сопровождается постепенным снижением активности реакции в роговом слое эпидермиса у пациентов с I стадией ХОБЛ (Б), и впоследствии приводит к уменьшению количества рецепторов на эпителиоцитах базальных и средних слоев, а также – исчезновением рецепторов на клеточных элементах дермы. Так же заметно, что экспрессия рецепторов к лептину уменьшается по мере возрастания тяжести заболевания от I к III стадии ХОБЛ. У пациентов ХОБЛ положительная экспрессия антител регистрируется к лептину в клетках кожи и подкожно – жировой клетчатке. В клетках мышечной ткани, вне зависимости от стадии заболевания, наблюдается исчезновение иммунопозитивной окраски.

Результаты исследования локализации адипонектин-рецепторов 1 типа у группы контроля (а) и пациентов ХОБЛ I(б),II(в) и III(г) стадии представлены на рисунке 6.

а) Группа контроля б) ХОБЛ I стадии

в) ХОБЛ II стадии г) ХОБЛ III стадии

Рисунок 6. (а, б, в, г). Рецепторы к адипонектину 1 типа в группе контроля (а), при I(б),II(в),III(г) стадии ХОБЛ (метод иммунофлюорисценции; (*)-положительная экспрессия метки, увеличение х200).

Как следует из представленных данных, в группе контроля регистрируется яркое свечение иммунофлюоресцентной метки к адипонектину 1 типа в цитоплазме и на мембране клеток кожи, подкожно – жировой клетчатки и мышечной ткани. По сравнению с группой контроля у пациентов с I, II и III стадией ХОБЛ, экспрессия рецепторов к адипонектину 1 типа, обнаруживается преимущественно в тканях кожи и исчезает в поперечнополосатой мускулатуре. Экспрессия рецепторов клеток тканей кожи к адипонектину 1 типа возрастает с увеличением стадии заболевания, с максимальной яркостью свечения у пациентов с III стадией ХОБЛ.

Исходя из задач исследования нами подсчитано количество сигналов к рецепторам лептина и адипонектина в изучаемых тканях (таб. 2).

Таблица 2

Количественная характеристика экспрессии рецепторов к лептину и адипонектину у пациентов ХОБЛ

Адипокины	Контрольная группа	Общая группа	I стадия ХОБЛ	II стадия ХОБЛ	III стадия ХОБЛ
LepR (ед.)	8,1±1,8	4,9±1,6	6,7±2,1	3,2±0,4*	2,1±0,9*#
AdipoR1(ед.)	11,1±1,4	13,8±1,5	12,6±0,8	15,8±0,4*	17,1±0,6*#

Примечание. Достоверность различий (р<0,05): *-между группой контроля, общей группой и стадиями ХОБЛ, # - достоверность различий между I и II стадией ХОБЛ, , I и III стадией ХОБЛ