По нашим данным, перед редукцией эмалевого органа на 22-24 неделе в его структурах происходит постепенное снижение содержания исследуемых БА, в то время как в мезенхимальных структурах – в зубном сосочке, одонтобластах, сосудах пульпы зуба – содержание медиаторов повышается, а в развивающейся пульпе зуба появляются первичные нервные волокна, ГЛК и ТК, являющиеся огромным по ёмкости депо БА. Стабилизация содержания исследуемых БА в структурах развивающегося зуба происходит в конце периода гистогенеза твёрдых тканей зуба, на 26-28 неделе, когда основные структуры уже сформированы.
Таким образом, имеющаяся связь по содержанию БА в эмалевом органе и мезенхимальных структурах развивающегося зуба, а также в биоаминсодержащих клетках и нервных волокнах может быть в основе одного из важных механизмов их взаимного влияния в процессе одонтогенеза. Мы предполагаем, что исследуемые БА могут являться теми сигналами, которые (1998) называет индукторами дифференцировки тканей в процессе антенатального развития.
Постановка тетразолевой гистохимической реакции Гленнера на активность МАО, которая может косвенным путём констатировать наличие или отсутствие БА в люминесцирующих структурах развивающегося зуба, показала, что до появления околозубных ТК на 12 неделе антенатального периода развития активность МАО усиливается параллельно с увеличением содержания БА в большинстве структур развивающегося зуба. На 12 неделе развития в околозубной мезенхиме нами выявлены МАО-положительные ТК, а на 22 неделе в развивающейся пульпе зуба – МАО-положительные гранулярные клетки и ТК. Гранулы формазана визуализируются в виде включений разной величины с тёмно-фиолетовым оттенком. В цитоплазме ТК гранулы формазана располагаются плотным кольцом вокруг ядра.
Реакция Массона-Фонтаны, направленная на идентификацию аргентаффинных веществ типа СТ и его метаболитов, позволила выявить нам импрегнацию разной интенсивности в ТК, гладкомышечных клетках, кровеносных сосудах, миелиновых нервных волокнах. На территории развивающейся пульпы зуба гранулярные клетки дали положительную аргентаффинную реакцию, микроспектральным анализом в них определялось высокое содержание СТ.
В срезах ткани развивающейся нижней челюсти человека, окрашенных суданом чёрным «В», суданофильные клетки по топографии полностью совпадали с люминесцирующими и аргентаффинными гранулярными клетками. Положительную реакцию на фосфолипиды дали ТК окружающей мезенхимы, которые содержали в цитоплазме гранулы сероватого оттенка. Резко суданофильными при этой реакции оказались ТК развивающейся пульпы зуба, где межгранулярные пространства почти не просматривались. Одонтобласты развивающейся пульпы зуба дали очень слабую реакцию, однако синеватые оттенки мембран клеток указывали на присутствие здесь фосфолипидов.
При изучении гистологических препаратов, окрашенных полихромным толуидиновым синим по Унна, установлено, что до 20 недели развития эпителий десны окрашивается ортохромно и содержит гепарин-моносульфат с незавершённым синтезом мономеров. Зубной сосочек, зубной мешочек и эмалевый орган имеют β-метахроматичную окраску и содержат созревающий гепарин. Околозубные ТК окрашиваются преимущественно γ-метахроматично. Это свидетельствует о более высокой сульфатированности углеводного компонента, что характерно для зрелых ТК. В них происходит инактивация БА гепарином. На 18 неделе антенатального периода развития эмалевый орган приобретает γ-метахромазию, что совпадает с появлением в зубном мешочке первичных кровеносных капилляров, заходящих между складками наружного эпителия эмалевого органа.
С 20 недели антенатального периода развития степень созревания гепарина в структурах зуба изменяется. Эпителий десны окрашивается γ-метахроматично, зубной сосочек и зубной мешочек приобретают ортохромную окраску, околозубные ТК окрашиваются преимущественно β-метахроматично. Таким образом, с наступлением периода гистогенеза твёрдых тканей зуба сульфатированность гепарина в околозубных ТК, зубном сосочке и зубном мешочке уменьшается, а в эпителии десны повышается.
2. Результаты люминесцентно-гистохимического исследования структур пульпы зуба взрослого человека. При исследовании пульпы по методу Фалька во всех срезах пульпы зубов контрольной группы в центральном слое выявляются адренергические нервные волокна, расположенные по ходу кровеносных сосудов. От нервно-сосудистых сплетений отходят одиночные нервные терминали в виде изумрудно-зелёных нитей с варикозными расширениями, что совпадает с данными по адренергической иннервации пульпы зуба N. P. Kerezoudis et al. (1995), A. Casasco et al. (1995).
По нашим данным, адренергическая иннервация наиболее обильна в субодонтобластическом слое. Здесь же выявляются единичные ГЛК – клетки полигональной формы, со множеством ярких, желтовато-белых глыбовидных гранул, тесно контактирующие с нервными терминалями. Эти данные могут указывать на наличие функциональной связи между названными структурами.
Одонтобласты, а также собственная соединительная ткань пульпы дают диффузное слабое желтовато-зелёное свечение, обозначаемое как «фон». Люминесцентно-гистохимическими методами в пульпе зуба нами также были выявлены клетки, относящиеся к ТК, которые расположены по ходу кровеносных сосудов. Они отличаются от ГЛК меньшими размерами, удлинённой формой, наличием тёмного ядра и мелкозернистых гранул в цитоплазме.
Количественный цитоспектрофлуометрический анализ светящихся структур пульпы зуба показал, что БА в определённых концентрациях содержатся в одонтобластах, собственно соединительной ткани пульпы, нервных волокнах, кровеносных сосудах (табл. 2). D. Wang et al. (1998), исследуя методом хроматографии содержание КА в пульпе здоровых зубов, удаленных по ортодонтическим показаниям, также определили высокое содержание норадреналина, что согласуется и с нашими данными. Обработка криостатных срезов пульпы парами ортофталевого альдегида по методу Кросса позволила нам обнаружить Г во всех вышеназванных структурах.
Прямую идентификацию БА в структурах пульпы зубов взрослого человека дополнили используемые нами методы косвенного выявления этих веществ – обнаружение МАО по методу Гленнера, аргентаффинная реакция Массона-Фонтаны на индолсодержащие вещества (СТ и его метаболиты), метод окраски суданом чёрным «В» на фосфолипиды, являющиеся субстратом для связывания БА.
При глубоком кариесе в сочетании с пародонтитом лёгкой степени отмечено повышение содержания Г в ТК и КА, СТ в ГЛК при низком значении серотонинового индекса, что указывает на преобладание в них КА.
Известно, что повышенное содержание в крови и других тканях БА влияет на развитие кариеса зубов. По данным (1985), повышенное содержание СТ в крови является фактором, понижающим устойчивость зубов к кариесу. (1973) доказана роль Г в развитии кариеса зубов.
По-видимому, при прогрессировании кариеса в сочетании с пародонтитом лёгкой степени биоаминсодержащие ГЛК, расположенные в субодонтобластическом слое в непосредственной близости к пульпарно-дентинной границе, и ТК, локализованные преимущественно по ходу кровеносных сосудов, чутко ре-
Таблица 2
Интенсивность люминесценции катехоламинов, серотонина, гистамина в структурах пульпы зуба
в норме, при кариесе, пульпите и пародонтите (у. е.)
15 | Группы Структуры | БА | I | II | III | IV | V | VI | VII | VIII |
Одонтобласты | КА | 4,3±0,3 | 10,1±0,5* | 8,2±0,2* | 9,5±0,6* | 17,4±0,5** | 28,3±0,7*** | 21,7±0,1*** | 3,8±0,2 | |
СТ | 15,3±0,4 | 18,7±0,6 | 21,5±0,9 | 18,7±0,7 | 6,1±0,2 | 35,1±0,6** | 22,3±0,1 | 8,6±0,6 | ||
Г | 5,3±0,3 | 11,5±0,1 | 14,2±0,6 | 16,7±0,8* | 44,5±0,2*** | 47,8±0,5*** | 18,2±0,9* | 5,1±0,2 | ||
Кровеносные сосуды | КА | 29,3±0,8 | 31,4±0,9 | 32,6±0,2 | 46,9±0,7* | 37,8±0,9* | 34,2±0,5 | 26,5±0,3 | 21,1±0,8 | |
СТ | 47,8±0,9 | 70,7±0,4 | 58,3±0,3 | 61,6±0,1 | 58,4±0,5 | 56,2±0,3 | 50,8±0,7 | 34,7±0,2 | ||
Г | 19,5±0,1 | 31,7±0,8 | 32,1±0,2 | 30,2±0,1 | 87,4±0,9*** | 167,1±1,5*** | 43,9±0,1* | 13,7±0,2 | ||
Нервные волокна | КА | 25,2±0,3 | 28,5±0,5 | 37,1±0,9* | 40,7±0,5* | 66,4±0,3** | 59,8±0,7** | 37,2±0,6* | 13,4±0,2* | |
СТ | 43,6±0,5 | 45,9±0,8 | 64,1±0,3** | 53,7±0,1** | 97,6±0,5*** | 156,4±3,7*** | 113,2±1,8* | 27,6±0,4 | ||
Г | – | – | – | – | – | – | – | – | ||
Тучные клетки | КА | 7,6±0,5 | 11,7±1,1* | 14,8±0,3** | 30,6±1,2*** | 19,5±0,1** | 18,1±0,7** | 13,4±0,4* | 6,9±0,5 | |
СТ | 15,6±0,5 | 21,5±0,8 | 22,3±0,1 | 40,3±0,4 | 25,6±0,2 | 22,4±0,9 | 16,9±1,5 | 11,7±1,2 | ||
Г | 26,2±2,4 | 48,9±1,5** | 87,1±2,3** | 192,4±7,8*** | 97,6±2,9** | 25,3±1,6 | 16,1±0,5* | 14,8±0,2* | ||
Гранулярные клетки | КА | 40,9±0,6 | 47,6±3,9 | 75,8±2,7** | 128,9±3,4*** | 95,6±1,8** | 81,2±1,3** | 58,7±1,2* | 29,1±0,6 | |
СТ | 57,9±1,2 | 63,2±1,4 | 81,4±27,1* | 94,6±2,3** | 97,8±0,5** | 102,4±2,6** | 79,7±2,8* | 43,2±1,4 | ||
Г | 15,8±1,3 | 39,6±3,5* | 68,7±4,6** | 103,9±10,1*** | 52,7±4,6** | 26,5±2,5 | 22,3±2,1 | 10,9±0,7* | ||
Фон пульпы зуба | КА | 3,9±0,2 | 8,7±0,7* | 6,6±0,5 | 7,6±0,6 | 15,3±1,3** | 26,3±2,4*** | 12,7±1,2** | 2,6±0,1 | |
СТ | 13,5±0,2 | 15,9±1,0 | 18,2±0,7 | 17,6±0,1 | 27,3±1,5 | 33,6±1,8 | 20,4±2,7 | 6,6±0,4 | ||
Г | 4,1±0,3 | 6,5±0,5 | 7,1±0,8 | 9,2±1,1* | 33,4±0,9*** | 36,2±0,4*** | 14,5±1,3* | 2,3±0,2 |
Примечание: * – p£0,05; ** – p£0,01; *** – p£0,001.
|
Из за большого объема этот материал размещен на нескольких страницах:
1 2 3 |
