Руководство к практическим занятиям по биохимии (стр. 31 )

58. Найти соответствие X (цифры) и Y (буквы) в следующей цепи превращений

1	глицеральдегид	А	триозофосфатизомераза
2	2-фосфоглицерат	Б	фосфоглицераткиназа
3	3-фосфоглицерат	В	глицеральдегидфосфат-дегидрогеназа
4	2,3-бисфосфоглицерат	Г	альдолаза
5	глицеральдегид-3-фосфат	Д	фосфоглицеромутаза

59. Найти соответствие между процессом и его графическим изображением

А зависимость оптической плотности от концентрации вещества (калибровочная кривая)

Б зависимость скорости ферментативной реакции от температуры

В кинетика действия липазы

Г сахарная кривая (норма)

60. Цикл мочевинообразования установил

1  Л. Пастер

2  Г. Кребс

3 

4 

5  А. Майстер

Ответы к экзаменационному тесту

1.  2, 4, 5 2.  3 3.  1, 3 4.  2, 3, 4, 5 5.  3 6.  2 7.  5 8.  1 9.  4 10.  5 11.  3 12.  2, 3 13.  1, 3 14.  3 15.  3,4 16.  2, 3, 4 17.  1 18.  1, 2, 4 19.  3,4 20.  4

21.  1 22.  1, 2, 4 23.  2 24.  3, 4, 5 25.  3 26.  2, 4 27.  1, 3, 5 28.  3 29.  4 30.  2, 3, 4 31.  1, 4 32.  2 33.  2 34.  1, 2, 3 35.  1, 2, 3, 4 36.  1, 2 37.  1Г, 2В, 3А, 4Д, 5Б 38.  1, 4 39.  1А, 2Б, 3Д, 4В, 5Г 40.  5

41.  1Д, 2Б, 3А, 4В, 5Г 42.  4 43.  2, 3 44.  1Б, 2В, 3Д, 4А, 5Г 45.  1Д, 2Г, 3А, 4В, 5Б 46.  1 47.  4, 5 48.  3 49.  3, 4 50.  1Д, 2Б, 3А, 4Г, 5В 51.  3 52.  2, 3 53.  1А, 2Б 54.  2 55.  1Д, 2Г, 3Б, 4В, 5А 56.  2, 4 57.  1, 2, 5 58.  5В 59.  1Г, 2А, 3Б, 4В

Раздел 9: Приложения

9.1. Термины, различающиеся по смыслу, но сходные по написанию и звучанию

·  аспарагин и аспартат

·  гистидин и гистамин

·  гликолиз и гликогенолиз

·  глицерин, глицин и лейцин

·  гликоген и глюкагон

·  карнитин и карнозин

·  каротин и кератин

·  кортизол и кортизон

·  креатин и креатинин

·  лизин и лейцин

·  меланин и мелатонин

·  нуклеозид и нуклеотид

·  серин и серотонин

·  синтазы и синтетазы

·  тиамин и тимин

·  тироксин и тиоредоксин

Начало формы

Конец формы

Начало формы

Конец формы

9.2. Стандартные биохимические наборы и реактивы, используемые в практикуме

1.  Набор реактивов для определения холестерина «Новохол-100», Кольцово;

2.  Набор реактивов для определения активности аминотрансфераз «AST-ALT 180», Лахема;

3.  Набор реактивов для определения мочевины в моче «Мочевина-2», Витал-Диагностикс, С. Петербург;

4.  Набор реактивов для определения прямого и общего билирубина в сыворотке и плазме крови «Билирубин», Диаком, Москва;

5.  Диагностические тест-полоски для определения составных частей мочи «ФАН», Лахема

6.  Набор для определения ЛДГ в сыворотке крови LD-50, Лахема ;

7.  Стандартный набор для определения активности холинэстеразы «Sigma»;

8.  В качестве сыворотки крови используют контрольные сыворотки Биоконт АГАТ;

9.  Фосфорно-вольфрамовый реактив: 100 г вольфрамовокислого натрия, 80 мл 85% раствора ортофосфорной кислоты и 300 мл дистиллированной воды кипятя 2 часа с обратным холодильником и после охлаждения доводят объём дистиллированной водой до 1 л.

9.3. Рекомендуемая литература

1.  Т., Коровкин химия: Учебник.- 4-е изд. Переработ. и доп.- М.: Медицина, 2007.-704 с.

2.  Биохимия. Краткий курс с упражнениями и задачами./ Под ред. и .- 2-е изд., испр. и доп. – М.: Гэотар Мед, 2002.- 448 с.

3.  Биохимия. Учебник / Под ред. . – 2-е изд., испр. - М.: Гэотар Мед, 2004.- 784 с.

4.  Клиническая биохимия/ Под ред. .- М.: Гэотар Мед, 2002.- 360 с.

5.  -Г. Наглядная биохимия: Пер с нем.- М.: Мир, 2000.-469 с.

6.  Николаев химия.- М.: Медицинское информационное агенство, 1998.- 496 с.

7.  Руководство к лабораторным занятиям по биохимии/ Под ред. ёзова.- М.: Медицина, 1976.- 294 с.

8.  Сборник тестов по биохимии. Учебное пособие/ Под ред. . - М.: Изд-во РУДН, 2004. - 92 с.

9.  Справочник биохимика: Пер с англ./ - М.: Мир, 1991.- 544 с.

10. , Буробина и тесты для проверки знаний по биохимии. Для студентов мед. факультетов.- М.: Изд-во РУДН, 2002.- 62 с.

11. Rendox, Manual procedures, Edition III, Bilirubin, Colorimetric Method

Содержание

Список сокращений и условных обозначений.. 4

Техника безопасности при работе в биохимической лаборатории.. 5

Раздел 1: Аминокислоты и простые белки.. 10

1.1 Проверка знаний по органической химии. 11

1.2. Цветные реакции на белки и аминокислоты. Реакции осаждения и денатурации белков 12

1.3. Количественное определение белка биуретовым методом. Построение калибровочных кривых 17

1.4. Диализ белков. Бумажная хроматография аминокислот. 19

1.5. Коллоквиум I по теме «Аминокислоты и простые белки». 23

Раздел 2: Сложные белки, нуклеиновые кислоты и ферменты.. 29

2.1 Действие амилазы на крахмал. Влияние температуры на активность амилазы.. 30

2.2. Количественное определение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови с п-нитрофенилфосфатом.. 33

2.3. Коллоквиум II по теме: «Сложные белки, нуклеиновые кислоты и ферменты» 37

Раздел 3: Витамины, липиды, гормоны.. 44

3.1. Количественное определение витаминов С и Р. 44

3.2. Спектрофотометрическое определение НАДН(Н+) и расчёт чистоты коммерческого препарата 48

3.3. Влияние гормонов на содержание глюкозы в крови. 51

3.4. Коллоквиум III по теме «Витамины, липиды, гормоны». 53

Раздел 4: Метаболизм. Биоэнергетика клеток. Химия и обмен углеводов. 62

4.1. Специфичность действия ферментов распада углеводов: амилазы и сахаразы 63

4.2. Количественное определение глюкозы. Построение «сахарных кривых». 65

4.3. Определение активности сукцинатдегидрогеназы в мышцах. Количественное определение пирувата в моче. 69

4.4 Коллоквиум IV по теме: «Метаболизм. Биоэнергетика клеток. Химия и обмен углеводов» 75

Раздел 5: Обмен липидов и его регуляция. 81

5.1. Кинетика действия липазы. 82

5.2. Количественное определение фосфатидилхолинов (лецитинов) по фосфору. 85

5.3. Количественное определение холестерина в сыворотке крови. 89

5.4. Количественное определение малонового диальдегида. 91

5.5. Коллоквиум по теме «Обмен липидов». 94

Раздел 6: Переваривание белков и обмен аминокислот. 100

6.1. Количественный анализ желудочного сока. Определение свободной, связанной, общей соляной кислоты и общей кислотности желудочного сока. 102

6.2. Количественное определение аспартатаминотрансферазы и аланинаминотрансферазы в сыворотке крови. 104

6.3. Доказательство проявления активности аланин-аминотрансферазы (АлАТ) методом бумажной хроматографии. 107

6.4. Экспресс-метод определения повышенного содержания фенилаланина в плазме крови 109

6.5. Количественное определение мочевины в моче ферментативным уреазным/фенол-гипохлоритным методом.. 111

6.6. Количественное определение креатинина в моче. 114

6.7. Коллоквиум по теме: «Обмен простых белков». 117

Раздел 7: Обмен хромопротеинов и нуклеопротеинов. Биохимия крови и мочи. Биосинтез нуклеиновых кислот и белков. 124

7.1. Определение общего билирубина в сыворотке крови. 125

7.2. Количественное определение мочевой кислоты в моче. 127

7.3. А. Определение активности a-амилазы в моче. 129

7.3. Б. Составные части мочи в норме и при патологии. 130

7.4. Определение активности холинэстеразы в сыворотке крови. 134

7.5. Определение активности лактатдегидрогеназы в сыворотке крови. 137

7.6. Коллоквиум по теме: «Обмен хромопротеинов и нуклеопротеинов. Биохимия крови и мочи. Биосинтез нуклеиновых кислот и белка». 139

Раздел 8: Подготовка к экзамену. 146

8.1.Пример экзаменационного тестового задания по курсу биохимии. 148

8.2. Ответы к экзаменационному тесту. 158

Раздел 9: Приложения. 159

9.1. Термины, различающиеся по смыслу, но сходные по написанию и звучанию.. 159

9.2. Стандартные биохимические наборы и реактивы, используемые в практикуме 160

9.3. Рекомендуемая литература. 161

[*] Растворы I и II готовятся лаборантом по указанию преподавателя (белок одного куриного яйца разводят в 300 мл дистиллированной воды, фильтруют; используют 1%-ный раствор желатины)

* Параллельно преподаватель проводит демонстрационный опыт в пробирках, результаты которого студенты используют для оформления таблицы.

[‡] Lowry O. H., Rosebrough N. J., Farr A. L., Rafndall R. Y. (1951) J. Biol. Chem., 193, 265-275.

[§] Готовится заранее лаборантом по указанию преподавателя

[**] Последние три стадии выполняет лаборант под тягой в резиновых перчатках (см. раздел по технике безопасности работ в биохимической лаборатории).

[††] При гидролизе одной фосфоангидридной связи АТФ (АТФ ® АДФ + Н3РО4 ) высвобождается примерно в 2 раза больше энергии (-DG° = 7,3 ккал/моль), чем при гидролизе, например, глюкозо-6-фосфата (-DG° = 3,3 ккал/моль).

[‡‡] Одна половина студенческой группы определяет активность АлАТ, а другая – АсАТ, затем обмениваются результатами.

[§§] Последние операции выполняются лаборантами под тягой

[***] учитывая суточное количество мочи 1,5 л