Руководство к практическим занятиям по биохимии (стр. 1 )

Российский университет дружбы народов

Р у к о в о д с т в о

к практическим занятиям

по биохимии

для студентов специальностей

«лечебное дело» и «фармация»

Москва

2008

УДК 577.1 ББК 28.072 Р 82

Утверждено РИС Учёного совета медицинского факультета РУДН

Авторский коллектив:

, , ;

Р 82 Руководство к практическим занятиям по биохимии: Учебное пособие/ , , . - М.:

ISBN 5-98115-060-2

В сборнике представлены лабораторные занятия, контрольные, зачётные задания и тесты, составленные в соответствии с программой по биологической химии для студентов медицинских ВУЗов.

Учебное пособие может быть использовано студентами и преподавателями медицинских специальностей при проведении аудиторных занятий, зачётов, экзаменов.

ISBN 5-98115-060-2

© Издательство

© Коллектив авторов

Предисловие

как пользоваться этим учебным пособием?

Перед вами - учебное пособие, составленное на основе многолетнего опыта работы преподавателей кафедры биологической химии медицинского факультета Российского университета дружбы народов.

Приступая к изучению новой для вас дисциплины, следует помнить о том, что для полного усвоения материала необходимо использовать все типы человеческой памяти: слуховую (прослушивание лекций, ответы на устные вопросы), зрительную (просмотр схем, рисунков, таблиц, формул и др.), память при письме (конспектирование теоретического материала). И конечно, несомненный опыт вам даст проведение эксперимента в виде лабораторной работы на самом занятии по биохимии.

В связи с этим, предлагаемое пособие построено по принципу систематизации полученных сведений по биохимии на основе проведения лабораторной работы, обсуждения полученных результатов и закрепления теоретического материала с использованием многоуровневых тестов.

Мы постарались, чтобы информация была лаконичной и точной.

Предлагаемое вашему вниманию учебное пособие содержит:

1) введение к соответствующему разделу;

2) методики выполнения лабораторных работ;

3) альтернативные вопросы для текущего контроля, проводимого на каждом занятии путем фронтального опроса;

4) примеры вопросов с выборочным ответом и вопросов на соответствие;

5) вопросы для самостоятельной подготовки студентов к коллоквиуму;

6) варианты письменных работ для коллоквиумов;

7) примеры заданий компьютерного тестирования.

Ответы на альтернативные вопросы не приводятся, так как их целесообразно найти самостоятельно при чтении учебника и лекционного материала и обсудить затем на занятии. Ответы на вопросы компьютерного тестирования приводятся в конце каждого раздела.

Предлагаемые тестовые задания просты, конкретны, легко воспринимаются на слух, содержат наиболее важные положения по изучаемой теме, включают новые термины и концепции, излагаемые в лекционном курсе.

Варианты письменных контрольных работ предлагаются для самостоятельного выполнения на итоговых занятиях по основным разделам курса биохимии (коллоквиумах).

Авторский коллектив заранее благодарен педагогам и студентам за советы и замечания по содержанию представленного руководства. Ваши пожелания мы принимаем на кафедре биохимии медицинского факультета РУДН (ул. Миклухо-Маклая д.8), а также по электронной почте:

*****@***rudn. ru

Список сокращений и условных обозначений

АДФ – аденозиндифосфат АлАТ – аланинаминотрансфераза АМК – аминокислота АМФ – аденозинмонофосфат цАМФ – циклический АМФ АПБ – ацилпереносящий белок АсАТ – аспартатаминотрансфераза АТФ – аденозинтрифосфат АТФаза – аденозинтрифосфатаза ГАМК – гамма-аминомасляная кислота ГАФ – глицеральдегид-3-фосфат ГДФ – гуанозиндифосфат ГМГ-КоА – β-гидрокси-β-метилглутарил-КоА ГМФ – гуанозинмонофосфат цГМФ – циклический ГМФ ГТФ – гуанозинтрифосфат ДАГ – диацилглицеролы ДАФ – диоксиацетонфосфат ДНК – дезоксирибонуклеиновая кислота ДНКаза – дезоксирибонуклеаза ДНФГ – 2,4-динитрофенилгидразин ДОФА – диоксифенилаланин кат - катал ИМФ – инозинмонофосфат КоА – кофермент (коэнзим) А КоQ – кофермент (коэнзим) Q КФ – классификация ферментов КФК - креатинфосфокиназа ЛДГ – лактатдегидрогеназа ЛП – липопротеины ЛПВП – липопротеины высокой плотности ЛПНП – липопротеины низкой плотности ЛПОНП – липопротеины очень низкой плотности МАГ – моноацилглицеролы МАО - моноаминооксидаза НАД+ – никотинамидадениндинуклеотид окисленный НАДН(Н+) – никотинамидадениндинуклеотид восстановленный НАДФ+ – никотинамидадениндинуклеотидфосфат окисленный НАДФН(Н+) –

никотинамидадениндинуклеотидфосфат восстановленный ПВК – пировиноградная кислота ПФ – пиридоксальфосфат РНК – рибонуклеиновая кислота т-РНК – транспортная РНК РНКаза - рибонуклеаза СДГ – сукцинатдегидрогеназа ТАГ – триацилглицеролы ТГФК – тетрагидрофолиевая кислота ТДФ – тимидиндифосфат ТМФ – тимидинмонофосфат ТПФ – тиаминпирофосфат ТТФ – тимидинтрифосфат ТХУ – трихлоруксусная кислота УДФ – уридиндифосфат УМФ – уридинмонофосфат УТФ – уридинтрифосфат ФАД – флавинадениндинуклеотид окисленный ФАДН2 – флавинадениндинуклеотид восстановленный ФЕП – фосфоенолпируват ФМН – флавинаденинмононуклеотид Фн – неорганический фосфат ФФн – неорганический пирофосфат ФРПФ – 5-фосфорибозил-1-пирофосфат ФФК – фосфофруктокиназа ФЭК – фотоэлектроколориметр ХЭ - холинэстераза ЦДФ – цитидиндифосфат ЦМФ – цитидинмонофосфат ЦТК – цикл трикарбоновых кислот (цикл Кребса) ЦТФ – цитидинтрифосфат ЩУК – щавелевоуксусная кислота ЭПС – эндоплазматическая сеть D – оптическая плотность Dоп – оптическая плотность опытного образца Dст – оптическая плотность стандартного образца Dк – оптическая плотность контрольного образца Dх – оптическая плотность исследуемого образца КМ – константа Михаэлиса Vmax – максимальная скорость реакции

Техника безопасности при работе в биохимической лаборатории

1. Общие требования безопасности

Для обеспечения безопасности труда сотрудников биохимической лаборатории следует руководствоваться международными стандартами надлежащей лабораторной практики (GLP, Good Laboratory Practice), а также общегосударственными законами и ведомственными документами по технике безопасности при проведении работ в лаборатории.

Важным элементом обеспечения безопасных условий работы является правильная организация труда сотрудников лаборатории, рационализация работ.

Во время работы в лаборатории следует неукоснительно соблюдать правила техники безопасности.

Во время работы необходимо соблюдать правила личной гигиены.

Каждый работающий должен быть полностью информирован о требованиях по безопасности труда, принятых в лаборатории и о нахождении в рабочих помещениях средств противопожарной безопасности и аптечки первой помощи.

Для ознакомления с правилами безопасного проведения работ организуется регулярное проведение инструктажа сотрудников по технике безопасности. Результаты инструктажа заносятся в специальный журнал.

Курить в лаборатории запрещается.

Помещения лаборатории должны быть оборудованы специальными контейнерами для сбора мусора и производственных отходов. Утилизация отходов должна проводиться регулярно в соответствии со специальными требованиями по утилизации отходов.

Помещения лаборатории должны быть оборудованы местами хранения повседневной и спецодежды, индивидуальных средств защиты, а также специально выделенными местами для переодевания.

Все помещения лаборатории должны быть оборудованы аптечками для оказания первой (неотложной) помощи.

В каждой лаборатории должны быть хорошая вентиляция, горячий и холодный водопровод, проводка технического тока, канализация, установки для дистилляции воды.

В качестве спецодежды в лаборатории используются лабораторные халаты и перчатки.

Халаты должны быть достаточно длинными и застегиваться полностью, при этом быть закрытыми спереди. Рукава должны плотно охватывать запястья. Перчатки должны быть удобными и достаточно длинными.

Защита глаз обеспечивается защитными очками с противоударными стеклами и защитными масками различной конструкции.

В случае необходимости для защиты органов дыхания используют респираторы различного типа (в зависимости от степени опасности).

Одноразовые средства защиты должны удаляться сразу после загрязнения.

Все химические вещества (реактивы), используемые в биохимической лаборатории, подразделяются на 8 групп хранения в зависимости от степени их опасности. Особенности правил безопасной работы с определенными реактивами и требования к их хранению зависят от отнесения вещества к той или иной группе хранения (см. таблицу).

Таблица

Классификация химических реактивов в биохимической лаборатории

Группа	Общие свойства	Перечень веществ	Условия хранения
I	Взрывчатые вещества	нитроглицерин
II	Вещества, выделяющие при взаимодействии с водой легковоспламеняющиеся газы	литий, натрий, кальций металлические; кальция карбид	В сейфе или в шкафу под замком
III	Самовозгорающиеся вещества
IV	Легковоспламеняющиеся жидкости (температура воспламенения ниже 61°C)	диэтиловый эфир, ацетон, этанол	В металлическом ящике или в специальной заводской укладке
V	Легковоспламеняющиеся твердые вещества	сера, фосфор красный	В сейфе или в шкафу под замком
VI	Окисляющие (воспламеняющие) реактивы	калия перманганат, азотная кислота (конц.), нитраты щелочных металлов	В шкафу под замком, отдельно от реактивов IV и V групп
VII	Вещества повышенной физиологической активности (ядовитые)	бром, аммиак, бария нитрат, свинца(II) оксид	В сейфе или в шкафу под замком
VIII	Малоопасные и безопасные вещества	натрия хлорид, сахароза, магния сульфат	нет особых условий хранения

Не допускается совместное хранение химических веществ (реактивов), способных к активному взаимодействию друг с другом.