Гуморальный и секреторный иммунный ответ к Helicobacter pylori у детей с хроническими воспалительными заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки (стр. 1 )

На правах рукописи

Гуморальный и секреторный иммунный ответ к Helicobacter pylori у детей с хроническими воспалительными заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки

14.03.09 – клиническая иммунология, аллергология

Автореферат

диссертации на соискание ученой степени

кандидата медицинских наук

Москва – 2011

Работа выполнена в Учреждении Российской академии медицинских наук Научно-исследовательском институте вакцин и сывороток им.

РАМН

Научный руководитель: заслуженный деятель науки РФ,

доктор медицинских наук, профессор

Официальные оппоненты: заслуженный деятель науки РФ,

доктор медицинских наук, профессор

доктор медицинских наук

Ведущая организация: ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России

Защита диссертации состоится «24» марта 2011 г. в 12.00 часов на

заседании диссертационного совета Д 001.035.01 при НИИВС им. РАМН по адресу: 105064, Москва, Малый Казенный пер. д.5а

С диссертацией можно ознакомиться в библиотеке НИИВС им. РАМН.

Автореферат разослан «18 » феврвля 2011 г.

Ученый секретарь

диссертационного совета

кандидат биологических наук

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность проблемы. По данным статистики за последние 20 лет распространенность хронических заболеваний желудочно-кишечного тракта у детей возросла с 99,5 до 159,5, а у подростков - с 90,9 до 157,9 на 1000 детского населения. Наряду с неуклонным ростом заболеваемости хроническим гастритом (ХГ), гастродуоденитом (ХГД), дискинезией желчевыводящих путей (ЖВП) постоянно растет удельный вес язвенно-эрозивных форм заболеваний, отмечается отчетливое омоложение патологии (, 2009).

Большинством исследователей в качестве этиологического фактора развития ХГ, язвенной болезни (ЯБ) и ассоциированной с лимфоидной тканью опухоли желудка признается бактерия Helicobacter pylori (H.pylori). Инфицирование H. pylori происходит в раннем детстве, обычно после первого года жизни. Распространенность H. pylori в человеческой популяции высока и составляет более 50-80%, при этом у большинства людей инфицирование H.pylori протекает бессимптомно (Blaser M. J. et al, 2008). Однако последние десятилетия характеризуются неуклонным ростом H. pylori – ассоциированных заболеваний. С одной стороны, это объясняют высокой генетической изменчивостью бактерии с быстрым формированием высокотоксигенных (CagA+) и патогенных штаммов (Atherton J. C. et al, 2009). С другой стороны, важную роль в развитии хронической гастродуоденальной патологии, ассоциированной с Н.pylori-инфекцией, отводят состоянию иммунной системы в целом и секреторного иммунитета, в частности. ( с соавт., 2008; с соавт., 2008). Особый интерес представляет исследование иммунного ответа к Н.pylori у детей с неблагоприятным течением гастродуоденальных заболеваний, а также у лиц с аллергопатологией.

Полагают, что у людей с атопической реактивностью иммунный ответ к H.рylori отличается Th2-направленностью и усилением синтеза соответствующих цитокинов. При этом отмечается снижение уровня H. рylori-обусловленной выработки ИФН-γ, ИЛ-10 и ТНФ-α (Maciorkowska Е. et al., 2005).

Известно, что в слизистой ЖКТ содержатся IgE-продуцирующие плазматические клетки, повышенное количество которых отмечается при язвенной болезни и эрозиях слизистой оболочки (СО) желудка и двенадцатиперстной кишки (ДПК) (Berczi L. et al., 2000), а также у лиц с аллергическими заболеваниями (Liutu M. et al., 2004). Однако роль системы IgE в гуморальном и секреторном антихеликобактерном иммунитете не определена окончательно, и это диктует необходимость дальнейших исследований.

Цель исследования

Выявить особенности клинического течения и состояние гуморального и секреторного иммунного ответа к Н.pylori у детей с хроническими воспалительными заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки, ассоциированными с атопической реактивностью.

Задачи исследования

1. Выявить клинические особенности течения хронических воспалительных заболеваний гастродуоденальной зоны у детей, в том числе на фоне атопической реактивности.

2. Определить содержание антител IgM, IgG, IgA, IgE изотипов к H. рylori, общего IgE и ИЛ-10 в сыворотке крови детей с хроническими заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки.

3. Исследовать содержание секреторного IgA, ИЛ-17 и цитотоксина CagА H. рylori в надосадочной жидкости проб фекалий у детей с хронической гастродуоденальной патологией.

4. Определить содержание IgЕ-АТ к H. рylori и его цитотоксину CagА в надосадочной жидкости проб фекалий у детей обследуемых групп.

Научная новизна

1.  Показано, что у детей с аллергопатологией и сопутствующими хроническими воспалительными заболеваниями гастродуоденальной зоны антихеликобактерный IgЕ ответ преобладает над IgА (81% и 25% серопозитивных лиц, соответственно), при этом уровень IgЕ-АТ к H.pylori повышается при обострении аллергического процесса.

2.  Выявлено, что у детей с язвенной болезнью и эрозиями слизистой оболочки гастродуоденальной зоны, а также у детей с неэффективной эрадикацией H.pylori в анамнезе IgE-АТ к H.pylori в сыворотке крови определяются реже и в более низких концентрациях, чем у здоровых.

3.  Впервые показано, что положительная уреазная активность чаще встречается у H.pylori-серопозитивных (73%), чем у H.pylori-негативных пациентов (32%); при выявлении сывороточных IgЕ-АТ к H.pylori она регистрируется в 92-94% случаев и ассоциирована с наличием более высоких концентраций цитотоксина CagА H.pylori в надосадочной жидкости проб фекалий.

4.  Впервые установлена высокая частота выявления IgЕ-АТ к H.pylori (89-100%) и IgЕ-АТ к CagА H.pylori (65%-77%) в надосадочной жидкости проб фекалий у детей с хроническими воспалительными заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки.

5.  У детей с аллергопатологией и хроническими заболеваниями гастродуоденальной зоны выявлена прямая корреляция между уровнем цитотоксина CagА H.pylori и IgЕ-АТ к H.pylori в надосадочной жидкости проб фекалий (r=+0,5; р<0,05) и отмечена высокая частота обнаружения ИЛ-17 по сравнению с больными без атопии.

Практическая значимость

Определение IgЕ-АТ к H.pylori в сыворотке крови детей, наряду с определением IgG-АТ и IgA-АТ (или суммарных АТ), можно рекомендовать для повышения эффективности серодиагностики H.pylori-инфекции в детской практике. Полученные данные о высокой частоте выявления IgE-АТ к H.pylori в надосадочной жидкости проб фекалий обосновывают создание новой медицинской технологии неинвазивной диагностики хеликобактерной инфекции.

Апробация материалов диссертации и публикации

Материалы диссертации доложены на Всесоюзном форуме с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» в 2009 г.

Апробация диссертации состоялась 24 ноября 2010 г. на научной конференции отделов аллергологии и иммунологии НИИВС им. РАМН. Основные положения диссертации отражены в 4 печатных работах, 3 из них - в журнале, рекомендованном ВАК.

Объем и структура диссертации

Материалы диссертации изложены на 97 страницах машинописного текста, иллюстрированы 7 таблицами и 6 рисунками. Диссертация состоит из введения, 3 глав обзора литературы, 3 глав собственных исследований, обсуждения полученных результатов и выводов. Список цитируемой литературы включает 120 работ отечественных и зарубежных авторов.

Содержание работы

Материалы и методы исследования

Обследовано 83 ребенка. Из них 69 детей с хроническими воспалительными заболеваниями желудка и ДПК в стадии обострения проходили курс лечения на базе пульмонологического отделения ГКБ №1 и педиатрического отделения ДГКБ №1 г. Ульяновска. Критериями включения пациентов в исследование являлись наличие хронического заболевания желудка/ДПК в стадии обострения с эндоскопической верификацией диагноза; отсутствие или наличие подтвержденного аллергического заболевания. В исследование не включали детей с сопутствующими заболеваниями, требующими приема нестероидных противовоспалительных препаратов, сопровождающимися декомпенсацией жизненно важных функций организма, эндокринной патологией и оперативными вмешательствами на органах брюшной полости в анамнезе. Группу контроля (14 человек) составили практически здоровые дети того же возраста.

Общее клиническое обследование пациентов включало сбор гастроэнтерологического и аллергологического анамнеза и жалоб, физикальное исследование, клинические анализы крови, мочи и кала, ЭКГ, УЗИ органов брюшной полости, ЭГДС по общепринятым методикам.

Инфицирование H. pylori в группах больных детей подтверждали при наличии положительных результатов не менее двух из нижеперечисленных методов: быстрый уреазный метод, аммонийный дыхательный тест, серологический метод.

Материалом для иммунологического исследования служили: образцы сыворотки крови больных и здоровых детей; образцы экзосекрета ротовой полости и образцы надосадочной жидкости проб фекалий больных детей. Для получения надосадочной жидкости к пробам фекалий добавляли фосфатсодержащий буферный раствор (рН 7,4-7,6) в соотношении 1:1, образцы встряхивали, затем отделяли надосадочную жидкость центрифугированием при 1500 об/мин.