Лекционный курс по частной вирусологии Вирусы вызывающие болезни жвачных и однокопытных (стр. 15 )

Влияние вируса на плод. Плоды КРС очень чувствительны к заражению ВД из-за сво­ей агамма-глобулинемии, иммунологической незрелости и наличия во многих органах не­дифференцированных клеток. Цитопатогенные штаммы вируса ПВО повреждают плаценту и плод. При заражении коров шт. NADL и овец шт. ВД-3 наблюдается ранняя смерть эм­брионов, аборты, мертворождения, недоразвитость плодов, малая масса родившихся телят, наличие у них вирусной персистенции и иммунологической толерантности. На 80-90-й день стельности изменения выявлялись в легких плода и коже, при инфицировании на 140-150-й день возникала дисплазия сетчатки и гипоплазия мозжечка, вызванная непосредственным повреждением вирусом этих органов. При заражении суягных овец шт. ВД-3 ягнята рожда­лись слабыми, с курчавой шерстью У них наблюдался тремор, персистентная виремия, иммунологическая толерантность и гипомиелинизация.

Конгенитальные аномалии. В 1986-97 гг в Японии были зарегистрированы 25% конгенитальных аномалий на ферме молочного скота голштино-фризской породы Часть коров абортировали, у 43% родились телята с нарушением ЦНС. Инфицирование происходило между 90-150 дн беременности. Инфицирование после 150 дн беременности не отражалось на иммунотолерантности плода к ВД-БС. Такие телята оставались на всю жизнь пер-систентно инфицированными. Иммунотолерантность и персистентная инфекция встречают­ся естественно и могут быть воспроизведены экспериментально. Точная стадия развития плода, когда инфекция может вызвать иммунотолерантность, неизвестна, однако приблизи­тельно она возникает в сроки 100-125-дн стельности. Кроме того, показано, что иммуното­лерантность и персистенция обусловлены только не цитопатогенными штаммами ВД. Инфицирование коров в период 50-100-дн стельности может привести к смерти плода с последующей его мумификацией, абортом или мертворождением. Освобождение от плода может произойти в промежутке от нескольких недель до месяца после заражения, однако в стационарно неблагополучных стадах процент таких случаев низок В стадах, где преобладают коровы, не имеющие AT к ВД КРС, этот процент может достигать 30. Инфицирование плода примерно 100-150-дн стельности может привести к появлению врож­денных дефектов у новорожденных телят. В этот период вирус поражает ство­ловые клетки развивающихся систем.

Связь биотипов вируса с клиническим проявлением заболевания. Воздействие и взаимодействие 2-х биотипов вируса, описанных ранее, в последние 6 лет стало предметом пристального изучения и вызывает не только научный, но и практический интерес к рас­шифровке патогенеза ВД-БС КРС. При остром течении инфекции первично вирус проникает через слизистую носа или рта, затем распространяется по лимфоидной системе организма Некоторые полевые штаммы хорошо адаптируются к росту на слизистой оболочке носовой полости. Эта способность быстрой репродукции в слизистых оболочках рта и носа мо­жет объяснить возникновение слюнотечения, неглубоких эрозий, язв, а также катарального воспаления тонкого кишечника, что характеризует острую инфекцию Дальнейшие ослож­нения острой инфекции встречаются, когда к ВД-БС КРС присоединяются другие патогены Многократно отмечали смешанные инфекции с возбудителем ИРГ, респираторно-синцитальной инфекцией. ВД-БС в ассоциации с ротавирусной и коронавирусной, или сальмонеллезной инфекциями проявляется в виде тяжелой формы болезни с энтеритным синдромом. Некоторые эпителиальные ткани поддерживают репликацию ВД Его АГ был обнару­жен в кератоцитах языка, кожи и губ и это может быть связано с образованием эрозии в ротовой полости, на носовом зеркальце, что характерно для хронического течения болезни Необходимость антигенной гомологии между персистирующим и суперинфицирующим био­типом вируса стала решающей для развития клиничски выраженной формы ВД-БС и инду-цирования персистенции и иммунотолерантности. Выявлено, что VII биотип имеет тро­пизм к мезентериальным лимфоузлам и что при последующем развитии поражений этот биотип вируса быстро переходит в пейеровы бляшки, вызывая их поражение и диарею. Патогенез хронического течения болезни объяснить трудно. В подавляющем боль­шинстве случаев персистентно инфицированные животные не проявляют хроническую фор­му болезни и этот синдром экспериментально не воспроизводится. В патогенезе БС первоначально не цитопатогенный вирус заражает плод и приводит к развитию персистентной виремии у телят. БС у таких телят может возникнуть при суперин­фекции "гомологичным" цитопатогенным вирусом, образовавшимся в результате мутации По мнению Becker J. C., БС - это спорадическая форма ВД, возникающая обычно у жи­вотных в возрасте от 6 мес до 2-х лет. Заболевает менее 5% животных, но летальность дос­тигает 100%. Хроническая болезнь может развиваться у телят при суперинфекции гете­рогенным цитопатогенным биотипом вируса с персистентной виремией. У персистент-но инфицированных быков ВД постоянно контаминирует сперму, которая служит источни­ком заражения чувствительных к вирусу телок, но инфекция не всегда передается потомству вертикально.

В патогенезе ВД-БС первыми поражаются нейтрофилы, затем инфицируются макрофа­ги, отмечается 2-кратное уменьшение числа Т-супрессоров с сохранением числа Т-хелперов без изменений. Увеличивается содержание общего белка и IgG, а снижение числа В-лимфоцитов и моноцитов бывает переходящим и нормализуется к 30-му дню. Поскольку вирус реплицируется во всех главных субпопуляциях лимфоцитов и в других клетках, ре­зультатом могут быть лейкопения, что является продолжением инфекции; повреждаются В-клетки и Т-клеточные субпопуляции. В - и Т - клетки повреждаются вследствие воздействия ВД и их способность противостоять другим инфекциям утрачивается.

Согласно концепции патогенеза ВД-БС клинически выраженное заболевание воз­никает только у животных, которые инфицируются вирусом на ранней стадии беременности и рождаются с персистирующей вирусной инфекцией и специфической иммунотолерантностью. Врожденные дефекты могут развиваться, когда инфекция плода происходит на про­межуточных сроках стельности. Плод может быть инфицирован внутриматочно на поздних строках стельности, при этом инфекция не персистирует и у плода вырабатываются AT. По-стнатальная инфекция проявляется в виде субклинических заболеваний с нормальным им­мунным ответом.

ДИАГНОСТИКА

Диагноз ставят на основании клинических, эпизоотологических данных и лабораторных методов исследования. Однако эпизоотологические данные, симптомы болезни и характер патологических изменений дают основание лишь заподозрить болезнь. Поскольку ВД-БС напоминает многие другие болезни (чуму, инфекционный язвенный стоматит, грибковый стоматит, ПГ-3, катаральную лихорадку КРС, паратуберкулез и алиментарные отравления), лабораторные исследования в диагностике имеют решающее значение. При ди­агнозе на ВД-БС следует учитывать следующее: заболевают отдельные животные в возрасте 3-36 мес, типичные клинические изменения проявляются поражением слизистых оболочек или кровянистым поносом с эрозией или без эрозии слизистых мембран, все заболевшие животные погибают в течение нескольких дней, у больных животных нет специфических AT в крови, хотя остальное поголовье имеет их в высоких титрах.

Лабораторная диагностика ВД-БС включает: 1) обнаружение в патологическом мате­риале (мазках, отпечатках, срезах), полученном от больных животных АГ в РИФ; 2) выде­ление возбудителя из патологического материала в культуре клеток ТБ, ПЭК или ЛЭК и его идентификация в РН или РИФ; 3) выявление AT в сыворотке крови больных и переболев­ших животных (ретроспективная диагностика) в РСК и РН.

Лабораторную диагностику ВД-БС проводят с использованием набора диагностикумов (ТУ 4621-529-79), выпускаемых биологической промышленностью. Ее ведут параллельно с исследованием материала на ПГ-3, аденовирусную (адено 1 и 2), PC и ИРГ. Предварительный диагноз на ВД-БС КРС ставят на основании положительных резуль­татов обнаружения АГ в патологическом материале в ИФ и ПЦР с учетом эпизоотологических и клинических данных, а также патологоанатомических изменений. Окончательный диагноз ставят на основании: совпадения результатов ИФ с ПЦР, выделением и идентифи­кацией вируса; совпадения результатов ИФ с обнаружением AT в 30% и более вторых проб парных сывороток в титрах не ниже 1:4 в РСК и 1:16 в РН; обнаружения 4-кратного и более прироста AT в парных пробах сывороток. Предварительный диагноз ставят в ветеринарных лабораториях в течение 2-3 дн, окончательный - до 30 дн.

Выделение вируса.

Взятие и подготовка материала. В лабораторию направляют патологический матери­ал от больных животных, взятый в первые 2-3 дня при выраженных симптомах болезни, или от животных, убитых с диагностической целью в острой стадии заболевания. От боль­ных животных берут 15-20 проб следующего материала: смывы со слизистой оболочки но­совой полости, получаемые путем введения стерильного ватно-марлевого или поролонового тампона в носовые ходы; пробы крови в первые 3 да болезни и через 3 нед от тех же живот­ных с соблюдением правил асептики в стерильные пробирки по 8-10 мл; соскобы с изъязв­ленных или эрозированных участков слизистых оболочек ротовой полости и носового зер­кала, взятые жесткими ватно-марлевыми тампонами или скальпелем. Тампоны с материа­лом помещают в стерильные пенициллиновые флаконы или пробирки с 2-3 мл стерильного физиологического р-ра или р-ра Хенкса, содержащего 500-1000 ЕД/мл антибиотиков (канамицина, мономицина, неомицина, пенициллина, стрептомицина и др.). Из крови после свертывания стерильно сливают 3-4 мл сыворотки и доставляют в лабораторию.

От животных, убитых с диагностической целью, берут с соблюдением правил асептики кусочки легких с бронхом (на границе пораженного и здорового участков), селезенки, сре-достенные, бронхиальные и брыжеечные лимфоузлы, миндалины, пораженные участки сли­зистых оболочек носовой и ротовой полостей, трахеи, ЖКТ, а также пробу крови. Кусочки материала массой до 20 г помещают в стерильную, плотно закрывающуюся посуду. Легче вирус выделить в начале болезни и в период обострения из крови, легких, различных участ­ков тонкого кишечника (в особенности из клеток слизистой оболочки 12-перстной кишки), лимфоузлов и селезенки. При хроническом течении болезни его удается регулярно выделять из разных отделов кишечника, но не из крови. Исследование носовых смывов и фекалий в этих случаях также дает отрицательные результаты, хотя в отдельных случаях вирус удава­лось выделять из фекалий даже через 5 мес после болезни. В начале болезни в период подъ­ема температуры от больных животных берут пробы крови в р-р цитрата натрия или гепа-рина и помещают их в термос со льдом. Из крови экспериментально зараженных животных выделяли вирус с 1-14-го да после заражения. Выделяли его также из тканей абортирован­ных или мертворожденных плодов, плаценты и околоплодной жидкости.