Лекционный курс по частной вирусологии Вирусы вызывающие болезни жвачных и однокопытных (стр. 26 )

Антигенная вариабельность и родство. Штаммы вируса ИНАН, выделенные в раз­личных частях земного шара, в АГ-отношении идентичны Они различаются в РН, но име­ют общий АГ, выявляемый в РСК, РЗСК и РДП Помимо того, вирус ИНАН дает перекрест­ные серологические реакции с вирусом ВИЧ (СПИД), но не дает таких перекрестов со всеми другими ретровирусами животных. У лошадей, экспериментально зараженных клонирован­ным вирусом ИНАН, развивается хронически протекающая болезнь с периодическими ре­цидивами лихорадки, сопровождающаяся виремией. Изоляты вируса, выделенные во врем приступов лихорадки, были неодинаковы по АГ-свойствам и отличались друг от друга в РН и ЭФ-ПААГ, но не в РСК и РДП.

Локализация вируса. Вирус проникает в организм восприимчивых животных, глав­ным образом, парентерально и разносится по всем органам и тканям. Особенно интенсивно размножается в костном мозге и крови, вызывая угнетение эритропоэза и гемолиз части эритроцитов во время приступа лихорадки. Наиболее высокие титры вируса наблюдают у зараженных лошадей во время первого подъема температуры. Затем титр вируса снижается, но в период повышения температуры вновь возрастает. У лошадей без симптомов болезни титр вируса низкий, иногда его даже невозможно выявить (в культуре лейкоцитов). ИНАН - лимфопролиферативная болезнь с непрерывной виремией при наличии AT. Это можно объ­яснить повреждением лимфоцитов, вызванным вирусом, в результате чего защитный кле­точный иммунный процесс нарушается. Возбудитель в крови находится в виде комплекса вирус-АТ. У большинства лошадей наблюдают гипергаммаглобулинемию и снижение в сы­воротке крови количества комплемента С-3. При изучении локализации вирусного АГ с по­мощью ИФ у экспериментально зараженных лошадей установлено следующее. Через 6-38 дн. после заражения животных АГ обнаруживали в цитоплазме клеток селезенки, лимфоуз­лов, печени, почек, легких, костного мозга, зобной железы, головного мозга, мозжечка, ги­пофиза и желудка. Он обычно находился в единичных клетках или в макрофагах в виде не­больших капелек, включенных в цитоплазму.

Вирусовыделение. Из организма больной лошади вирус выделяется с мочой, калом, носовой слизью, секретом конъюнктивы, молоком. Загрязненные выделениями больных корма, навоз и другие субстраты могут быть факторами передачи инфекции.

Антигенная активность. У инфицированных лошадей образуются AT к гликопротеинам оболочки и мажорному протеину сердцевины (р26) вирионов Однако гликопротеины оболочки вирионов очень вариабельны, что является одним из основных механизмов защи­ты возбудителя от элиминирующего воздействия факторов иммунитета. В организме инфи­цированных лошадей в процессе персистенции возбудителя образуется большое количество различающихся по гликопротеину антигенных вариантов вируса КСА у больных животных впервые обнаружены в 1966 г. Сыворотка экспериментально зараженных лошадей стано­вится положительной в РСК с 14-го по 29-й день после инокуляции и удерживается в таком значении в течение нескольких недель Величину КС-титра у больных животных можно разделить на 4 стадии предшествующую - перед развитием AT, раннюю - увеличение титра с высоким плато, снижающую - с уменьшением титра, и позднюю стадии болезни. Специфические ПА появляются в крови лошадей в течение 45 дн. после заражения Ос­новные симптомы болезни, включая анемию, тромбоцитонемию и гломерулит, являются следствием развития специфического иммунного ответа. ПА к группоспецифическому АГ выявляют РИД, используя АГ из зараженные культур клеток или тканей селезенки или из очищенного вируса ПА обнаруживают на 14-38-й день после заражения; они могут со­храняться до 7 лет. Преципитины более постоянно обнаруживают в сыворотках крови хро­нически больных животных. В селезенке больных лошадей выявлен АГ, участвующий в ре­акции преципитации с AT сыворотки крови больных животных. Сыворотка крови заражен­ных лошадей содержит антивирусные AT, реагирующие как в РСК, так и в РЗСК Выделен­ный IgG реагировал в РСК, в то время как иммуноглобулин IgG(T) ингибировал РСК и свя­зывался в РЗСК В РЗСК AT выявляли с 28-го по 120-й день после заражения животного.

АГ детерминанты для индукции ВНА расположены в вариабельной области gp90. Основная гуморальная реакция направлена против высоко АГ домена, представленного 83 аминокислотами. Низкие титры ВНА и высокий уровень антигликопротеинной активности сывороток свидетельствует о том, что иммунный ответ направлен прежде всего не на ней­трализующие эпитопы, а на вирусные гликопротеины. Большинство иммуногенных сайтов на поверхности вириона не чувствительно к нейтрализации. Нейтрализующей активностью обладает фракция IgG, которую обнаруживают через 40 дн после заражения животного. У некоторых лошадей она сохраняется в течение всей болезни и действует на поверхностные АГ вириона, т. е. реагирует с типо-, но не группоспецифическим компонентом вируса ИНАН. Опыты показали, что 99% инфекционного вируса циркулирует в сыворотке больных живот­ных в комплексе с AT.

Экспериментальная инфекция. Подкожное или внутривенное введение 20-50 мл, а часто даже 0,01 мл крови или сыворотки, вызывает у лошадей, в частности у жеребят, через 9-93 дня остро или хронически протекающую болезнь или только вирусоносительство. Заражение per os удается с трудом даже при введении массивных доз вируса. Требуется по­вторная дача большого количества инфицированных крови или мочи. Ослов и мулов заразить искусственно удает­ся не всегда Удавалось заражать свиней, в их организме вирус находился 30-197 дн.

Культивирование. Вирусразвивается в переживающей ткани селезенки, надпо­чечников и лимфоузлов жеребят, в культурах эмбриональных тканей лошади, но без при­знаков ЦПД, в культуре клеток лошадиных лейкоцитов, а также клеточной линии кожи лошади.

ГА свойства. Вирус обладает ГА активностью в отношении эритроцитов морской свин­ки ГА АГ вируса типоспецифичны и отличаются от АГ, выявляемых в РН. ГА не отделим от вирусных частиц. Рецепторы эритроцитов разрушаются протеолитическими ферментами и формальдегидом, но устойчивы к нейраминидазе, дезоксихолату натрия и перйодату ка­лия. В сыворотке больных лошадей содержатся анти-ГА. В РТГА вирус каждого штамма ингибируется только гомологичной антисывороткой. Появление в сыворотках крови анти-ГА предшествует появлению у них ВНА. Вирус ИНАН адсорбируется на лошадиных эрит­роцитах, гемолиз их происходит после инкубации со свежей сывороткой крови лошади или морских свинок при 37°С Эритроциты, обработанные 4 ед. ГА и неразведенной свежей сы­вороткой лошади, лизируются на 20%, в то время как при обработке 4 ед комплемента морской свинки - на 100%. Специфическая сыворотка лошади подавляет способность вируса агглютинировать эритроциты, но гемолиз не тормозит. Добавление специфической сыво­ротки к вирусу, уже прикрепившемуся на эритроцитах, усиливает гемолиз.

Гемадсорбирующие свойства. Наблюдали адсорбцию эритроцитов морской свинки на инфицированной вирусом культуре клеток кожно-мышечной ткани эмбриона лошади.

ЭПИЗООТОЛОГИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ

Источники и пути передачи инфекции. Источник инфекции - больные лошади. Осо­бенно опасны животные в период острого течения болезни и хроники в период обострения болезни, так как в это время вирус в организме лошадей находится в наибольшей концен­трации. Источниками инфекции могут быть также лошади с латентными формами болезни. Вирусоносительство у них может продолжаться 7-10 и даже 18 лет. Необходимо также учитывать возможность распространения возбудителя лошадьми при латентном течении инфекции. Факторами передачи возбудителя могут быть загрязненные выделениями боль­ной лошади корма, вода, навоз, предметы ухода и т. д. В организме восприимчивого живот­ного вирус попадает через кожу, слизистые оболочки и ЖКТ. Последний путь заражения, по наблюдениям многих авторов, не считается ведущим. Заражение ИНАН возможно при случке и конгенитально - жеребят больными кобылами. Передача вируса может про­изойти при проведении различных манипуляций с кровью, шприцем, при маллеинизации, искусственном осеменении и т. д.. Однако основной путь переноса возбудителя от боль­ных лошадей к здоровым - кровососущие насекомые: слепни, мухи-жигалки, комары, а так­же от кобылы к жеребенку - внутриутробно или с молоком. Установ­лено заражение при совместном содержании животных.

ИНАН характеризуется выраженной стационарностью, сезонностью и определенным ареалом. Болезнь чаще встречается в летне-осеннее время, в лесисто-болотистых с кислыми неполноценными почвами, в период массового размножения и лета жалящих насекомых (гнус). Массовое заболевание лошадей наблюдают преимущественно в годы с жарким и су­хим летом, а зимой и весной и в горных местностях - в виде спорадических случаев. Эпизо­отия может продолжаться от 3-5 мес. до 1-2 лет, протекая остро и подостро. Затем начинает преобладать хроническое (медленное) и латентное течение. Факторы, ослабляющие резистентность животного, - неполноценное кормление и сильное раздражение нерв­ной системы животного, вызванное укусами кровососущих насекомых.

Спектр патогенности в естественных условиях. В естественных условиях болеют лошади всех возрастов и пород, а также ослы и мулы Заболевшие жеребята часто погиба­ют. Ослы более устойчивы к вирусу ИНАН.

Клиническая картина и патологоанатомические изменения. Болезнь развивается после периода инкубации в течение от 15 дн. до нескольких недель в природных условиях и от 10 до 20 дн. в эксперименте. Различают сверхострое, или септицемическое, острое, подострое и хроническое или латентное течение анемии. В развитии болезни характерна опреде­ленная цикличность с чередованием периодов обострения (рецидивов) и затухания (ремис­сий), что создает в конечном счете большое многообразие ее форм.

При сверхостром течении отмечают быстрый подъем температуры тела, геморрагиче­ский гастроэнтерит, асфиксию, сердечную слабость, атаксию, параличи задних конечностей и гибель животных через несколько часов или 1-2 дня.

Острое течение болезни также характеризуется лихорадкой (41-42°С), угнетением или легким возбуждением, гиперемией и отеком конъюнктивы и слизистой оболочки носовой и ротовой полостей, нарушением сердечной деятельности, иногда кровавым поносом, исхуда­нием при сохраненном аппетите, набуханием и бледностью с наличием кровоизлияний обо­лочек третьего века, отеками в области живота, препуция, конечностей, шаткостью походки, одышкой, быстрым развитием анемии. Кровь становится водянистой (разжижение), количе­ство эритроцитов падает до 1 млн. в 1 см3. В крови появляются комплексы "инфекционный вирус - антитело" и отложение их в клубочках почек. Количество гемоглобина сни­жается до 20-30%, СОЭ ускорена (70-80 делений в первые 15 мин), отмечается гипергам-маглобулинемия и тромбоцитопения. В церебральной жидкости регистрируют увеличение количества белка и белых клеток крови. Продолжительность болезни 1-3 нед, иногда месяц, и животные погибают.