Материалы всероссийской научной школы для молодежи «Перспективы развития инноваций в биологии» (стр. 22 )

4.  Akbasheva O. E., Parameters of plasma blood proteolysis and phenotypes of alpha1-proteinase inhibitor in children with duodenal ulcer // Biomed. Khim. - 2007. - V. 53, № 3. - P. 338-344.

5.  Santos M. M., Moreira R. Michael acceptors as cysteine protease inhibitors // Mini Rev. Med. Chem. - 2007. - V. 7, № 10. - P. 1040-1050.

6.  Nichols L., Lagana S., Parwani A. Coronary artery aneurysm: a review and hypothesis regarding etiology // Arch. Pathol. Lab. Med. - 2008. - Vol. 132, № 5. - P. 823-828.

7.  Rementeria A., López-Molina N., Ludwig A., Vivanco A. B., Bikandi J., Pontón J., Garaizar J. Genes and molecules involved in Aspergillus fumigatus virulence // Rev. Iberoam. Micol. - 2005. - Vol. 22, № 1. - Р. 1-23.

8.  Bashir T., Pagano M. Aberrant ubiquitin-mediated proteolysis of cell cycle regulatory proteins and oncogenesis // Adv. Cancer. Res. - 2003. - Vol. 88. - P. 101-144.

9.  Doherty F. J., Dawson S., Mayer R. J. The ubiquitin-proteasome pathway of intracellular proteolysis // J. Essays Biochem. - 2003. - Vol. 38. - P. 51-63.

10.  Søreide K. Proteinase-activated receptor 2 (PAR-2) in gastrointestinal and pancreatic pathophysiology, inflammation and neoplasia // Scand. J. Gastroenterol. - 2008. - Vol. 43, № 8. - P. 902-909.

11.  Химия и биохимия бобовых. – Москва : Агропромиздат, 1986. - 248 с.

12.  Csáky I., Fekete S. Soybean: feed quality and safety. Part 1: biologically active components. A review // Acta. Vet. Hung. - 2004. – Vol. 52, № 3. - P. 299-313.

13.  Kennedy A. R. The Bowman-Birk inhibitor from soybeans as anticarcinogenic agent // Am. J. Clin. Nutr. - 1998. - Vol. 68, № 6. - P. 1406-1412.

14.  Losso J. N. The biochemical and functional food properties of the bowman-birk inhibitor // Crit. Rev. Food Sci. Nutr. - 2008. - Vol. 48, № 1. - P. 94-118.

Глава 6. ОЦЕНКА ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ ЛИСТВЕННИЧНОЙ ГУБКИ В КАЧЕСТВЕ ИСТОЧНИКА БИОЛОГИЧЕСКИ АКТИВНЫХ ВЕЩЕСТВ

В настоящее время в отечественной и мировой науке наблюдается повышенный интерес к изучению грибов. Это связано, прежде всего, с кардинальным пересмотром значимости и уникальности экологических функций, контролируемых грибами в природных экосистемах. Во-вторых, грибы были и остаются одним из основных и перспективных объектов биотехнологии.

Особое внимание привлекает ксилотрофный базидиомицет Fomitopsis officinalis (Vill.: Fr.) Bond. et Sing., известный как трутовик лекарственный или лиственничная губка. Этот вид характеризуется многими интересными с научной точки зрения особенностями, изучение которых очень важно для понимания эволюции микобиоты Евразии в третичном и четвертичном периодах. Лиственничная губка на протяжении нескольких тысячелетий является объектом заготовок в качестве лекарственного сырья в народной и официальной медицине. В настоящее время естественные ресурсы этого вида истощены и как редкий исчезающий вид он внесен во многие региональные Красные книги. Это единственный вид трутовых грибов, который планируется включить и в Красную книгу России. Поэтому данная работа направлена на решение не только одной из приоритетных задач, стоящих перед отечественной наукой - “Химический и биологический синтез лекарственных средств и пищевых продуктов” (Постановление Правительства РФ N 2727/п-П8 от 21 июля 1996 г.), - но и на решение фундаментальных вопросов сохранения биологического разнообразия путем разработки ресурсосберегающих технологий.

Лиственничная губка паразитирует, вызывая бурую гниль древесины, на стволах лиственниц, реже на кедрах, пихтах и соснах. Ареал ее совпадает с таковым лиственниц, то есть занимает всю лесную зону Сибири и доходит через Урал до Онежского озера. Используются плодовые тела гриба, собираемые весной и в первой половине лета. Плодовое тело гриба содержит агарициновую и эбуриколовую кислоты, d-глюкозамин; фумаровую, рициноловую, лимонную и яблочную, органические кислоты; 30% смол (с возрастом содержание смол увеличивается); жирное масло, фитостерин, глюкозу и маннит. В медицинской практике препараты из лиственничной губки применяются как слабительное и кровоостанавливающее средство и для уменьшения изнурительного потоотделения у туберкулезных больных. Агарицин в небольших дозах при приеме внутрь вызывает снотворное и успокаивающее действие.

Клинические испытания трутовика, проведенные в Японии, позволили выделить полисахарид "ланофил", который заставляет "ленивую" печень выделять нужные ферменты для расщепления глюкозы и жиров в организме, то есть, другими словами, восстанавливать нарушенный обмен веществ. Помимо этого лиственничная губка содержит смолистые вещества, которые губят патогенную микрофлору бронхо-легочных путей. Трутовиком в России лечили туберкулез, пневмонии, бронхиты, рак легких и бронхов в любой стадии.

В основном о целебных свойствах трутовика известно из прописей Диоскорида, древнегреческого врача. В России он тоже был известен и вплоть до прошлого века считался традиционным лекарством против туберкулеза и даже служил для России прибыльным товаром. Только в 1870 году Россия экспортировала в Европу 8 тонн сушеного трутовика.

Трутовик, по описаниям русских знахарей и врачевателей Востока, применяют при следующих заболеваниях: инфекционные (грипп, вирусные заболевания, туберкулез), опухолевые (доброкачественные и злокачественные опухоли), заболевания почек и поджелудочной железы, желудочно-кишечные заболевания. Применяется как присыпка при гнойных ранах и язвах.

В последнее время этот гриб начали изучать в качестве продуцента биологически активных веществ. Из плодового тела F. officinalis выделены каратиноиды, стерины, ненасыщенные жирные кислоты агарициновая кислота, биофлаваноиды, витамины группы В, Р, Е, А. Установлена антибиотическая активность плодового тела и мицелиальной культуры гриба в отношении некоторых патогенных бактерий. Наряду с этим лиственничная губка остается пока еще недостаточно изученным и новым для биологии и медицины видом.

Скорость роста исследованного нами мицелия лиственничной губки на различных натуральных, комплексных и синтетических агаризованных средах относительно не велика (средняя суточная скорость линейного роста составляет 2 - 4 мм), поэтому для получения иннокулюма требуется 12-14 дней, а посевного мицелия на зерне ячменя около 20 дней. Однако эта величина не является сама по себе постоянной. Она изменяется и при этом не равномерно, в зависимости от возраста культуры и состава среды. Мицелий гриба характеризуется увеличением среднесуточной скорости роста в течение первой недели и далее. С использованием подобранных нами условий получения жидкого иннокулюма (состава и рН сред, температура инкубации, аэрация, освещение, скорость перемешивания) сроки получения посевного мицелия первой генерации могут быть сокращены до 10-12 суток.

Для получения целостной картины культурально-морфологических особенностей исследуемого штамма в зависимости от источников питания на плотных средах была изучена морфология колоний. Обнаружено, что колонии лиственничной губки на разных агаризованных средах были морфологически различны. Так, при культивировании на сусло-агаре образуется ватная колония, воздушный мицелий высокий. Цвет белый, центр и края прижаты, колония округлая, внешняя линия ровная. При описании мицелия под световым микроскопом наблюдали длинные, спутанные мицелиальные гифы. Отдельные гифы переплетены во всех направлениях. На 35 – 40 сутки колония приобретает желтоватый оттенок. При культивировании на глюкозопептонной среде края колонии прижаты, центр приподнят. Гифы длинные, спутанные, от центра отходят радиально, покрыты пушком. Колония просвечивается

Также, нами были проведены исследования глубинного культивирования в колбах на качалках, в результате которых установлено, что на богатых натуральных средах, содержащих соевую, пшеничную или кукурузную муку, молочную сыворотку мицелиальный рост гриба очень слабый или не наблюдается вообще. В тоже время на синтетических средах с добавкой пивного сусла урожай биомассы достигает 7,1 г/л за 14 суток, что является своеобразным рекордом для лиственничной губки.

Одним из наиболее важных компонентов плодовых тел трутовика лекарственного является агарициновая кислота. Последние исследования зарубежных авторов доказывают, что агарициновая кислота является соединением, которое индуцирует проницаемость ионов кальция в митохондрии путем связывания с аденин-нуклеотидтранслоказой, т. е. может использоваться при раковых новообразованиях.

Проведенный сравнительный анализ ИК-спектроскопии образца мицелия лиственничной губки и стандартного образца агарициновой кислоты показал идентичность спекров опытного и стандартного образцов. Следовательно, мицелий ЛГ может быть использован для получения биологически активного соединения агарициновой кислоты.

В настоящее время очень остро стоит вопрос поиска новых природных антибиотиков. Одним из направлений такого поиска новых является изучение видов, ранее не рассматривавшихся как возможные продуценты антибиотиков. Различные экологические и систематические группы высших Basidiomycetes отличаются характером антибиотического спектра. Образование антибиотиков более присуще дереворазрушающим базидиомицетам. Среди них свойство образовывать антибиотики в большей мере характерно для возбудителей бурой гнили древесины, к которым и относится лиственничная губка.

В результате исследований была установлена антибактериальная активность поверхностного мицелия в отношении Yersinia pseudotuberculosis. Во всех вариантах наблюдаются зоны лизиса, в пределах 12 – 24 см. Полученные результаты сравнимы с действием общепринятых противомикробных препаратов, а в некоторых случаях превышают действие таковых.

Таким образом, культивирование лиственничной губки возможно и необходимо развивать. Важными аргументами в пользу дальнейшей оптимизации технологии культивирования лиственничной губки и включения его в число новых перспективных объектов отечественного грибоводства является не только убедительные данные, касающиеся его лекарственных свойств, но и возможное исчезновение его в природе.