Урок-КВН по сказкам (стр. 27 )

4 Назначение разработки

4.1 Разрабатываемая технология получения фармакологической субстанции дарбэпоэтина альфа (далее – ФС дарбэпоэтина альфа) предназначена для получения на ее основе готовых лекарственных форм дарбэпоэтина – фармацевтического препарата для стимулирования эритропоэза, а также для повышения эффективности других белков терапевтического назначения путем увеличения периода полувыведения молекул белка из организма, повышения молекулярной стабильности in vitro и in vivo, снижения иммуногенности, улучшения фармакокинетики и фармакодинамики.

5 Технические требования

5.1 Характеристика продукции, изготовление которой обеспечивается разрабатываемым технологическим процессом

5.1.1 Разрабатываемый технологический процесс должен обеспечивать изготовление ФС дарбэпоэтина альфа со следующими характеристиками:

5.1.1.1 наименование продукции:

1) тривиальное название: дарбэпоэтин альфа

2) структурная формула:C815H1317N233O241S5 

3) аминокислотная последовательность:

apprlicdsrvlerylleakeaenittgcnetcslnenitvpdtkvnfyawkrmevgqqavevwqglallseavlrgqallvnssqvnetlqlhvdkavsglrslttllralgaqkeaisppdaasaaplrtitadtfrklfrvysnflrgklklytgeacrtgdr

4) синоним: Аранесп

5) международное название: darbepoetin alfa

5.1.1.2 основное назначение ФС дарбэпоэтина альфа:

- стимулирует образование эритроцитов из клеток-предшественников эритроцитарного ряда, стимулирует их дифференцировку и увеличивает синтез гемоглобина в развивающихся эритробластах. Увеличивает число эритроцитов, ретикулоцитов, гематокрит и уровень гемоглобина в крови.

- применяется для стимулирования гемопоэза, для терапии анемии, ассоциированной с хронической почечной недостаточностью у взрослых и детей старше 11 лет, также препарат применяется для терапии анемии у взрослых онкологических больных с немиелоидными злокачественными новообразованиями, получающих химиотерапию.

5.1.1.3 внешний вид и потребительские свойства продукции:

ФС дарбэпоэтина альфа должна соответствовать требованиям, представленным в таблице 1:

Таблица 1:

Наименование показателя	Характеристика
Внешний вид	Прозрачный бесцветный раствор без запаха
Вспомогательные вещества на 1мл раствора	натрия дигидрофосфата моногидрат — 2,118 мг, натрия гидрофосфат — 0,661 мг, натрия хлорид — 8,182 мг, полисорбат 80 — 0,05 мг, вода для инъекций — до 1 мл
Стерильность	должен быть стерилен
Посторонние примеси	Не должно быть полос изоформ ниже изоформы 17
Молекулярная масса	37,1кДа
pH	6,2±0,2

5.1.1.4 требования к упаковке, маркировке, транспортированию, условиям хранения продукции:

5.1.1.4.1 требования к упаковке: ФС дарбэпоэтина альфа пакуется в 200 и 500 мл бутыли из нейтрального стекла I гидролитического класса, укупоренные резиновыми пробками, обжатые алюминиевыми колпачками. По 1-й бутыли в пачку из картона.

5.1.1.4.2 требования к маркировке: маркировка ФС дарбэпоэтина альфа должна содержать сведения о количестве активного вещества, его концентрации, дате выпуска и номере серии.

5.1.1.4.3 требования к транспортированию: при транспортировке необходимо строго соблюдать температурный режим от 2 до 8°C.

5.1.1.4.4 требования к условиям хранения продукции: ФС дарбэпоэтина альфа хранится в сухом, защищенном от света месте, при температуре 2 – 8°C.

5.1.1.5 срок годности:

Срок годности ФС дарбэпоэтина альфа должен составлять не менее 2 лет.

5.2 Требования к разрабатываемым технологическим процессам

5.2.1 Разрабатываемый технологический процесс получения ФС дарбэпоэтина альфа должен включать следующие технологические операции

5.2.1.1 Разрабатываемый технологический процесс должен включать следующие технологические (далее – ТО) и контрольные (далее – КО) операции:

КО 1 Микробиологический контроль компонентов среды для культивирования клеточной линии-продуцента [разрабатывается] [64];

ТО 1 Подготовка сырья, реактивов и оборудования [разрабатывается]

ТО 2 Подготовка посевного материала для культивирования [разрабатывается];

КО 1 Оценка жизнеспособности клеточной линии-продуцента [разрабатывается]

ТО 3 Культивирование клеточной линии-продуцента [разрабатывается]

КО 2 Оценка продуктивности, жизнеспособности и ростовой характеристики клеток-продуцентов [разрабатывается]

ТО 4 Выделение ФС дарбэпоэтина альфа из культуральной жидкости [разрабатывается];

ТО 5 Утилизация отходов [разрабатывается]

КО 3 Оценка выделенной ФС дарбэпоэтина альфа на количество и соотношение изоформ в культуральной жидкости [разрабатывается]

ТО 6 Очистка ФС дарбэпоэтина альфа [разрабатывается];

КО 4 Контроль качества ФС дарбэпоэтина альфа: оценка биологических и физико-химических свойств [разрабатывается]

ТО 7 Фасовка и упаковка [разрабатывается]

5.2.2 Нормы и количественные показатели

5.2.2.1 Разрабатываемый технологический процесс должен обеспечивать следующие показатели:

1) жизнеспособность стабильной клеточной линии-продуцента в конце культивирования (7-14 сутки)– 50%, не менее.

2) плотность жизнеспособных клеток в конце культивирования – 3*106кл/мл, не менее.

3) продуктивность стабильной клеточной линии-продуцента ФС дарбэпоэтина альфа при технологии культивирования в волновом биореакторе – 50мг/л, не менее.

4 время культивирования стабильной клеточной линии продуцента с целью наработки ФС дарбэпоэтина альфа – 7 дней, не менее.

5) количество целевых фракций (изоформ 19-22) ФС дарбэпоэтина альфа, выделенных из образцов культуральной жидкости - 10мг/л, не менее.

[….]

5.2.3 Технические характеристики (параметры) технологических операций

5.2.3.1.Технические характеристики технологических операций должны соответствовать параметрам, приведенным в таблице 2:

Таблица 2

Наименование стадии (операции)	Параметры технологического процесса
Наименование	Значение технологической нормы
1	2	3
ТО 2 Подготовка посевного материала для культивирования	1) Температура 0С 2) Длительность культивирования, дней 3) Объем питательной среды среды, мл 4)интенсивность перемешивания, кол-во встряхиваний/мин 5) Количество CO2, %	37 2-3 25 130 5
ТО 3 Культивирование клеточной линии-продуцента	1)Температура, 0С 2)Длительность культивирования, дней 3)pH 4)интенсивность перемешивания, кол-во покачиваний, качаний/мин. Угол наклона, градусов 5) Количество CO2, %	37 7-14 7,0 15-25 10 5
ТО 4 Выделение ФС дарбэпоэтина альфа	1)Скорость фильтрации литр/мин 2)Время фильтрации, час 3)Давление на входе в фильтр, бар 4)Давление на выходе с фильтра, бар	0,5-1 1-1,2 0,3-1 0-0,1
ТО 6 Очистка ФС дарбэпоэтина альфа	I)Аффинная хроматография: 1)Объем сорбента, мл 2)Скорость потока, мл/мин 3) Температура, 0С II)Ионообменная хроматография: 1)Объем сорбента, мл 2)Скорость потока, мл/мин 3)Температура, 0С	150 2 18 25 2 18

5.2.4 Требования к качеству технологического процесса

Разрабатываемый технологический процесс должен иметь следующие показатели качества:

1) чистота целевого белка (дарбэпоэтина альфа) не менее 95 %;

2) специфическая активность ФС дарбэпоэтина альфа в пределах 70-130% от активности действующего вещества зарубежного аналога (Аранесп);

3) количество остаточной ДНК клеток-продуцентов в образце ФС дарбэпоэтина альфа не более 100 пг/мг целевого белка;

4) количество остаточных белков клеток-продуцентов в образце ФС дарбэпоэтина альфа не более 200 пг/мг целевого белка;

5) количество эндотоксинов в образце ФС дарбэпоэтина альфа не более 25 ЕЭ/дозу целевого белка;

6) количество изоформ в образце ФС дарбэпоэтина альфа: должны обнаруживаться полосы изоформ от 19-й до 22-й, характерные для стандартного образца дарбэпоэтина альфа;

7) посторонние примеси: не должно быть полос изоформ ниже 17-й.

[….]

5.3 Требования к сырью и материалам

5.3.1 В разрабатываемом технологическом процессе должны использоваться материалы и сырье, указанные в таблице:

(приводятся соответствующие требования)

№ п/п	Наименование сырья, материалов, полупродуктов	ГОСТ, ОСТ, СТП, ТУ, регламент или методика на подготовку сырья	Регламентируемый показатель	Значение показателя
1
…

5.3.2 Номенклатура применяемых марок и ассортимент сырья и материалов должны быть минимальными.

5.3.3 Применение дефицитного и драгоценного сырья и материалов должно быть минимальным.

5.3.4 Требования к средам для культивирования должны быть определены по результатам выполнения этапа исследовательских испытаний.

[….]

5.4 Требования по эксплуатации и удобству технического обслуживания

5.4.1 Рабочие и предельные условия выполнения технологического процесса

5.4.1.1Требования к рабочим и предельным условиям выполнения технологического процесса определяются требованиями, предъявляемыми производителем оборудования, используемого в технологических и контрольных операциях, предназначенных для реализации технологического процесса. Более точные требования к рабочим и предельным условиям выполнения технологического процесса должны быть определены на этапе разработки технического проекта.