Методические рекомендации по биохимии для самостоятельной работы студентов стоматологического факультета, обучающихся по кредитно-модульной системе (стр. 19 )

Только зная биохимические пути распада гемоглобина, можно понять характерные изменения лабораторных показателей пигментного обмена при различных желтухах, и, следовательно, правильно поставить диагноз.

Знание механизма образования желчных пигментов позволит студентам успешно овладеть материалом из курса биохимии: «Моча», «Печень», а также материалом других медико-биологических и клинических дисциплин.

Теперь ознакомьтесь с целями занятия, продумайте их, усвойте необходимость их изучения.

Общая цель

Уметь интерпретировать результаты количественного определения билирубина и продуктов его распада в крови и моче в норме и при патологических состояниях для оценки нарушения обмена желчных пигментов при различных формах желтух.

Конкретные цели:                         Цели исходного уровня:

                                       Уметь:

1. Анализировать белки эритроцитов для диагностики гемоглобинопатий.	1. Анализировать метаболизм эритроцитов в норме и при  патологи (каф. биологической химии).
2. Анализировать характерные изменения лабораторных показателей пигментного обмена мочи, крови для определения вида желтухи.	2.Интерпретировать  строение гемоглобина (каф. биоорганической химии).
3. Интерпретировать роль печени в пигментном обмене.	3. Интерпретировать реакции осаждения белков, используя различные осадители ( каф. биоорганической химии).

  Для проверки исходного уровня Вам предлагается выполнить ряд заданий.

Задания для самопроверки и самокоррекции исходного уровня.

Задание 1.

       В схеме метаболизма эритроцитов ( схема 1) укажите:

Ферменты, обозначенные цифрами 1, 2 и т. д.

(варианты ответов: 6-фосфофруктокиназа, гексокиназа, пируваткиназа, альдолаза, глутатионпероксидаза, глутатионредуктаза, триозофосфатизомераза, глюкозо-6-фосфатдегидрогеназа, дифосфоглицератмутаза, 1-фосфоглюконатдегидрогеназа, фосфогексоизомераза, фосфоглицераткиназа, глицеральдегидфосфатдегидрогеназа, каталаза, супероксиддисмутаза, лактатдегидрогеназа, метгемоглобинредуктаза).

Б. Коферменты, обозначенные буквами А, Б (варианты ответов: НАД, НАДФ).

B.        Реакции, обеспечивающие эритроциты АТФ.

Г. Процесс, обеспечивающий эритроциты восстановленным НАДФ (НАДФН).

Д. Ферменты антиоксидантной защиты.

Е. Аллостерический регулятор, снижающий сродство гемоглобина к кислороду.

  Схема 1

Задание 2 .        Недостаточность каких ферментов эритроцитов сопровождается гемолизом?

A.        Глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы.  Б. Пируваткиназы.

B.        Пируватдегидрогеназы.  Г. Изоцитратдегидрогеназы.  Д. Аргиназы.

Задание 3. В результате пищевого отравления ядовитыми грибами  у пациента начался распад эритроцитов и гемоглобина. Выбрать из предложенных формул цикл, лежащий в основе  простетической группы гемоглобина:

       А. Пиримидин

       В. Пиррол

       С. Тиазол

       Д. Пурин

       Е. Фенантрен

Правильность решений проверьте, сопоставив их с эталонами ответов.

Эталоны ответов к решению заданий для самопроверки и самоконтроля исходного уровня:

1. Б: А-НАДФ, Б-НАД; В: фосфоглицераткиназная (14) и пируваткиназная (15) реакции; Г: пентозофосфатный путь; Д: супероксиддисмутаза, каталаза, глутатион-пероксидаза, глутатинредуктаза; Е: 2,3-дифосфоглицерат; 2. А, Б; 3. - В

       Информацию для восполнения исходного уровня можно найти в следующей литературе:

1.,Бауков химия. М.: “Медицина”, 1991. – С.277-281, 361-377.

2.Лекции по биоорганической химии.

Содержание обучения.

       Содержание обучения должно обеспечивать достижение целей обучения, чему способствует граф логической структуры изучаемой темы (Приложение 1).

Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:

1.Химический состав эритроцитов. Гемоглобин:  строение, функции, разновидности 

( нормальные и аномальные) и производные гемоглобина. Гемоглобинозы.

2. Биосинтез гемоглобина. Наследственные нарушения синтеза (порфирии): эритропоэтическая порфирия, печеночная порфирия. Регуляция биосинтеза гемоглобина.

3.Распад гемоглобина в тканях. Образование желчных пигментов, их обезвреживание. Желтухи: гемолитическая (предпеченочная), паренхиматозная (печеночная), обтурационная (постпеченочная). Дифференциальная діагностика желтух.

4. Принцип метода и ход определения билирубина в крови.

Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников:

Обязательная литература.

1. Біологічна хімія. - Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. - С. 462-467.

2. Практикум з біологічної хімії/ За ред.. проф.. – Київ: Здоров’я, 2002. –

С.

3.Тестовые задания по биологической химии/ Под ред. . - Донецк, 2000. -

С. 252-280.

4.Лекции по биохимии.

5.Граф логической структуры (Приложение 1).

6.Инструкция к практическому занятию.

Дополнительная литература 

1., Коровкин химия. - М.:  Медицина, 1998. - С. С.561-564.

2., Коровкин химия. - М.:  Медицина, 1990. - С.65-70, 394-398, 544-552, 590-593.

3.Николаев химия. - М.: информационное агентство», 1998.-.415-418, 427-433.

После изучения вышеперечисленных вопросов для самопроверки усвоения материала по изучаемой теме Вам предлагается решить следующие целевые обучающие задачи. Правильность решения задач можно проверить, сопоставив их с эталонами ответов.

  Целевые обучающие задачи.

Задача 1 .  У больного 40 лет-желтуха. Содержание билирубина в крови 38 мкмоль/л. «Прямой» билирубин - норма, «непрямой» билирубин-повышен. В моче билирубин не определяется, содержание уробилиногена повышено. Кал темный, количество стеркобилиногена превышает норму. Какой тип желтухи у больного?

А. Механическая        

В. Подпеченочная        

С. Паренхиматозная        

Д. Гемолитическая

Е. Физиологическая

Задача 2.  У больного 20 лет резко повышено содержание  уролибиногена в моче, а содержание стеркобилиногена в кале снижено. Для какого типа желтухи это характерно?

А. Паренхиматозная        

В. Обтурационная        

С. Гемолитическая 

Д. Конъюгационная

Е. Физиологическая

Задача 3. У больного инфекционным гепатитом произошло обесцвечивание кала. Отсутствием в кишечнике какого продукта распада билирубина это связано?

А. Копропорфирина        

В. Стеркобилина        

С. Биливердина        

Д. Вердоглобина        

Е.»Непрямого»билирубина.

Задача 4.  У ребенка, страдающего желтухой, в эритроцитах обнаружен  НвS. Какой вид желтухи у пациента?

А. Гемолитическая        

В. Паренхиматозная        

С. Обтурационная 

Д. Физиологическая желтуха

Е. Врожденная негемолитическая желтуха.        

Задача 5.  В крови пациента определены следующие разновидности гемоглобина: НвА-96%, НвF-2%,  НвА2  - 2%. Для какого состояния характерен такой состав гемоглобина крови?

А. Норма        

В. Талассемия А 

С. Талассемия В 

Д. Серповидноклеточная анемия 

Е. Гемоглобин плода

Задача 6.  В моче больного обнаружены в большом количестве аминолевулиновая кислота порфобилиноген и порфирины. Моча при длительном освещении приобрела  темно-красный винный цвет. Какую патологию можно предположить в данном случае?

А. Печеночная желтуха        

В. Эритропоэтическая порфирия        

С. Гемолитическая желтуха

Д. Печеночная порфирия        

Е. Талассемия.

       Правильность решения проверьте, сопоставив их с эталонами ответов.

Эталоны ответов к решению целевых обучающих задач: 4 – А; 5 – А

Краткие  методические рекомендации к проведению занятия.

       В начале занятия проводятся тестовый контроль исходного уровня знаний студентов и его коррекция. Затем студенты приступают к выполнению лабораторной работы, используя при этом инструкцию.

       После выполнения лабораторной работы необходимо оформить протокол, сделать выводы  к работе, которые проверяет и контролирует преподаватель. Проводится анализ самостоятельной работы студентов и коррекция.

  В конце занятия проходит итоговый контроль,  подводятся итоги занятия.

Инструкция к практическому занятию

Колориметрическое определение билирубина в сыворотке крови по

Ван ден Бергу и Мюллеру

Принцип метода. Колориметрический метод определения билирубина основан на способности давать с диазореактивом Эрлиха розовую окраску, интенсивность которой пропорциональна концентрации присутствующего в крови билирубина.

Материальное обеспечение:.  центрифужные пробирки, негемолизированной сыворотка, диазореактив, 96% раствор спирта, насыщенный раствор сульфата аммония, ФЭК.

Ход работы: в центрифужную пробирку наливают 2 мл негемолизированной сыворотки, 1 мл диазореактива, 5,8 мл 96% раствора спирта и 1 мл насыщенного раствора сульфата аммония. Хорошо встряхивают и центрифугируют при 4000-5000 об/мин до тех пор пока надосадочная жидкость не станет прозрачной. Надосадочную жидкость осторожно сливают в кювету и калориметрируют на ФЭКе с зеленым светофильтром против спирта. Затем по заранее построенной калибровочной кривой находят содержание общего билирубина в сыворотке крови.