Рабочая программа дисциплины патофизиология - патофизиология головы и шеи (стр. 18 )

Опыт № 1. Влияние местного анестетика на ноцицептивную систему

Необходимые приборы и оборудование: 0,5-1%-й раствор новокаина, физиологический раствор, шприц, 0,1%-й раствор адреналина, весы.

Объект исследования: крысы

Ход работы: Опытной крысе у корня хвоста подкожно вводят 0,5%-й раствор новокаина из расчета 6 мл на 1 кг массы тела. Через 10 мин после инъекции ущемляют хвост зажимом и наблюдают за реакцией животного. Отмечают время действия новокаина. Аналогичную процедуру проводят с контрольной крысой. Сравнивают поведенческую реакцию животных. Далее контрольной крысе вводят новокаин с 0,1 мл раствора адреналина. Отмечают время обезболивания. Сравнивают результаты проведенных исследований. Делают выводы. Оформляют протокол.

III. Решение ситуационных задач

ТЕМА: Введение в гематологию. Нарушения объема крови.

Цель занятия:Сформировать умение решать профессиональные задачи на основе патофизиологического анализа данных о причинах и условиях возникновения, механизмах развития и исходах типовых форм патологии и заболеваний, патогенез которых включает анемии и эритроцитозы.

Самостоятельная внеаудиторная работа

Задание 1. Проработать учебный материал по вопросам:

Система крови: определение понятия. Гемопоэз: характеристика понятия. Современная схема кроветворения Воробьева – Черткова. Нарушения общего объема крови и соотношения форменных элементов и плазмы крови. Гиперволемии: понятие, виды, причины и механизмы развития. Гиповолемии: понятие, виды, причины и механизмы развития. Полицитемии и эритроцитозы: определение понятий, причины возникновения и механизмы развития, картина крови, значение. Анемия: характеристика понятия, принципы классификации. Качественные изменения эритроцитов при анемиях.

II. Провести патофизиологический анализ результатов эксперимента

Необходимое оборудование и приборы: ножницы, дощечка для фиксации животного, эфир для наркоза, эксикатор, микроскоп, камера Горяева, гемометр Сали, меланжеры, резиновые трубки и груши, набор реактивов (0,1 н раствор соляной кислоты, 3%-й раствор уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим, 3%-й раствор хлорида натрия, цитрат натрия, дистиллированная вода, спирт), вата.

Объект исследования: крыса

Опыт № 1. Определение количества гемоглобина с помощью гемоглобинометра визуального колориметрического (гематиновый метод Сали)

Ход определения:

Градуированная пробирка наполняется из капельницы 0,1 н раствором соляной кислоты до нижней контрольной метки с цифрой 2 г/л, что соответствует 0,2 мл.

Крысу наркотизируют эфиром, фиксируют на доске, отрезают кончик хвоста, снимают тампоном первую каплю крови и из второй выступившей капли, набирают кровь в капилляр гемометра до метки 0,02 мл путем осторожного всасывания через резиновую трубочку с грушей. Если крови взято больше, излишек удаляют осторожно касанием кончика капилляра о тугой ватный тампон.

Кончик капилляра тщательно вытирают, погружают в градуированную пробирку с соляной кислотой до дна и осторожно выдувают кровь. Трижды промывают капилляр. Пробирку встряхивают, перемешивая раствор, и, заметив время, помещают в среднее гнездо штатива гемометра на 5 минут.

Гемоглобин, соединяясь с соляной кислотой, превращается в солянокислый гематин, цвет раствора из красного переходит в бурый. Через 5 минут добавляют дистиллированную воду по каплям, перемешивая стеклян­ной палочкой, входящей в комплект гемометра,  до выравнивания цвета испытуемого раствора с цветом  стандарта. Показания снимают с градуированной шкалы на пробирке по нижнему мениску уровня раствора. Если шкала проградуирована в г%, числовое значение шкалы, умноженное на 10, выражает количество гемоглобина в крови в граммах на литр (г/л). Полученный результат заносят в протокол, обсуждают и делают выводы.

Норма: За идеальную норму у человека принимают концентрацию гемоглобина в крови, равную 16,67 г% или 166,7 г/л; у крыс – 130-160 г/л.

Опыт № 2. Определение числа эритроцитов подсчетом в камере Горяева

Ход определения:

Крысу наркотизируют и фиксируют на дощечке или в домике. Отрезают кончик хвоста, первую каплю вытирают ватным тампоном, из второй капли в эритроцитарный меланжер набирают кровь непрерывным столбиком до метки 0,5, затем сразу же разводят ее до метки 101 3%-ым раствором хлорида натрия, получая, таким образом, разведение 1:200. Взвесь тщательно перемешивают.

Затем первые 5 капель из меланжера выпускают на ватный тампон и лишь 6-ю каплю вносят под предварительно притертое стекло в камеру Горяева. Если стекло притерто правильно, появляются радужные кольца. Только при этих условиях соблюдается правильный постоянный объем камеры.

После заполнения камеру помещают под микроскоп и оставляют в покое 1-2 минуты для оседания форменных элементов, затем приступают к подсчету при малом увеличении микроскопа в затемненном поле зрения (прикрытой диафрагмой и опущенном конденсоре).

Эритроциты считают в пяти больших квадратах (5 Ч 16 = 80 малым квадратам), расположенных по диагонали сетки Горяева. Подсчет начинают с левого верхнего квадрата, затем по диагонали вниз и направо и т. д.

Количество эритроцитов в 1 мкл крови рассчитывают по формуле

y - количество эритроцитов в 1 мкл крови;

а - число эритроцитов, сосчитанных в 80-ти малых квадратах;

б - количество малых квадратов,  в которых считались эритроциты (80);

в - степень разведения крови (1 : 200);

Известно, что объем малого квад­рата – 1/4000.

В результате произведенных сокращений число эритроцитов в 1 мкл определяется:  у = а Ч 10000 в 1 мкл

Для перевода в систему единиц СИ (содержание эритроцитов в 1 л крови) надо  а Ч 10 10:

у = а Ч 10 10/л

Например:

а = 500

у = 500 Ч 1000 = 5,0 Ч 10 12/л

Полученный результат заносят в протокол, обсуждают и делают выводы.

Опыт № 3. Вычисление цветового показателя

Цветовой показатель – относительная величина, характеризующая степень насыщения эритроцитов гемоглобином, определяется по формуле:

или

Опыт № 4. Определение числа лейкоцитов подсчетом в камере Горяева

Ход определения: Крысу наркотизируют и фиксируют. Забор крови производят лейкоцитарным меланжером непрерывным столбиком до метки 0,5. Излишки крови выпускают на ватный тампон, кончик меланжера вытирают насухо и набирают в меланжер 3-5%-й раствор уксусной кислоты до метки 11 (разведение 1 : 20). Уксусная кислота лизирует эритроциты, метиленовый синий окрашива­ет ядра лейкоцитов. Меланжер в течение 1-2 минут встряхивают. Затем первые 4-5 капель выпускают на ватный тампон, 5-ю каплю запускают под притертое стекло в камеру Горяева и микроскопируют под малым увеличе­нием в затемненном поле. Подсчет лейкоцитов производят в 100 больших квадратах (неразграфленных). Расчет числа лейкоцитов на 1 мкл крови аналогичен расчету эритроцитов.

a – число лейкоцитов, сосчитанных в 100 больших квадратах;

в - разведение (в 20 раз);

б - число малых квадратов, в которых производился расчет (1600).

После соответствующих математических преобразований:

у = а Ч 50 /мкл. В системе СИ: у = а Ч 50 Ч 106/л.

Результаты опытов заносят в таблицу, обсуждают и делают выводы.

nn	Исследуемые показатели крови	Значения у крысы
1	Число эритроцитов, (n ×1012/л)
2	Количество гемоглобина, (г/л)
3	Цветовой показатель
4	Число лейкоцитов, (n ×109/л)

III. Самостоятельная аудиторная работа:

Задание 1. Изучение компьютерной презентации по теме занятия

Задание 2. Изучение и зарисовка таблиц:

Схема гемопоэза Схема эритропоэза Суправитальная окраска мазка крови на ретикулоциты Патологические формы эритроцитов

Задание 2. Изучение стенда «Патология системы эритрон»

Тема: Типовые формы нарушений в системе эритроцитов.

Цель занятия: Сформировать умение решать профессиональные врачебные задачи на основе патофизиологического анализа данных о причинах и условиях возникновения, механизмах развития и исходах типовых форм патологии и  заболеваний, патогенез которых включает анемии и эритроцитозы.

I. Самостоятельная внеаудиторная работа

Задание 1. Проработать учебный материал по вопросам:

Анемия: характеристика понятия, виды. Изменения гематологических показателей при анемиях различного генеза. Эритроцитарные индексы. Гипопластические и апластические анемии: определение понятия, этиология, патогенез, картина крови. Постгеморрагические анемии: определение понятия, виды, этиология, патогенез, картина крови. Причины и механизмы развития недостаточности железа и железодефицитных анемий, картина крови. В12- и фолиеводефицитные анемии: этиология, патогенез, картина крови, клинические проявления. Гемолитические анемии: определение понятия, принципы классификации. Клинические, гематологические и биохимические признаки повышенного гемолиза. Наследственные гемолитические анемии: классификация, этиология, патогенез, картина крови. Приобретенные гемолитические анемии: классификация, этиология, патогенез, картина крови. Принципы профилактики и лечения основных видов анемий.

Задание 2.Дайте определения понятиям

МСН _____________________

МСНС ________________________

МСV___________________________

Ht____________________________

PCV___________________________

II. Провести патофизиологический анализ результатов эксперимента

Необходимое оборудование и приборы: ножницы, дощечка для фиксации животного, эфир для наркоза, эксикатор, микроскоп, камера Горяева, гемометр Сали, меланжеры, резиновые трубки и груши, набор реактивов (0,1 н раствор соляной кислоты, 3%-й раствор уксусной кислоты, подкрашенной метиленовым синим, 3%-й раствор хлорида натрия, цитрат натрия, дистиллированная вода, спирт), вата.