Молодежная наука и АПК: проблемы и перспективы (стр. 21 )

С целью изучения путей передачи ВЛКРС в производственных условиях нами проведены исследования по определению лейкозогенности молока от инфицированных и больных лейкозом коров в эксперименте на овцах. Для выполнения данной задачи в изолятор было завезено 15 голов клинически здоровых овец 8-месячного возраста, которых подвергли предварительным гематологическим и серологическим исследованиям на лейкоз. В неблагополучном по лейкозу хозяйстве были подобраны коровы-доноры сероположительные в РИД на наличие
антител к ВЛКРС как по сывороткам крови так и по молочному секрету. Гематологические показатели крови у коров-доноров имели отклонения характерные для лейкозного процесса. Так общее количества лейкоцитов у коровы № 000 составило 37,3тыс./мкл, у коровы № 000 – 14,0 тыс./мкл, у коровы № 000 – 45,9тыс./мкл. От каждой коровы-донора было взято по 0,5 л молока и по 5 мл крови в антикоагулянт. Полученный материал обрабатывали на центрифуге при 1000 об./мин для получения клеточного осадка. Осадки центрифугировали в среде 199 с антибиотиками и до введения овцам хранили при 40С в течение 18 часов. Клеточные суспензии полученные из молока коров ввели 9 овцам, из расчета по 3 головы на донора. Суспензию лейкоцитов крови коров ввели 3 овцам, из расчета по одной овце на донора. Контрольная группа состояла из 3 овец. При заражении использовали подкожный метод введения материала. Подопытные животные находились под наблюдением в течение 3-х месяцев и через каждое 30 дней подвергались клинико-гематологическому и серологическому исследованиям на лейкоз (таблица).

Таблица Результаты заражения овец клеточными суспензиями молока и крови коров, больных лейкозом

Инвентарный номер подопытной овцы	Номер коровы-донора	Вводимый материал	Гематологические исследования крови, количество лейцитов в 1 мкл	Серологические исследования (РИД)
до заражения	через 30 дней	через 60 дней	до заражения	через 30 дней	через 60 дней
07675 07651 07546	1402	КМ КМ КМ	8,6 4,9 5,0	11,7 12,5 8,0	10,8 11,3 8,8	- - -	+ + -	+ + +
07550 07020 07050	0060	КМ КМ КМ	4,9 6,0 4,3	10,0 12,2 8,9	10,6 11,0 9,6	- - -	- + -	+ + +
07357 07174 07111	3630	КМ КМ КМ	4,4 5,7 5,1	13,0 9,0 6,2	10,9 8,3 8,8	- - -	+ - -	+ + -
07231 07461 07571	3630 1402 0060	КК КК КК	6,8 7,3 4,0	11,8 9,8 7,9	11,0 10,2 8,1	- - -	+ + +	+ + +
07074 07563 07741	К К К	- - -	7,0 5,4 4,6	11,0 7,0 7,2	9,3 6,8 7,9	- - -	- - -	- - -

Примечание: КМ – клетки молока; КК – клетки крови; К – контроль.

Как показывают результаты, приведенные в таблице, общее количество лейкоцитов в 1 мкл крови у овец до и после введения материала от больных лейкозом коров-доноров не превышало пределы физиологической нормы для данного вида животных. При серологическом исследовании крови овец в РИД с гликопротеидным антигеном ВЛКРС уже через 30 дней были выявлены сероположительные животные. Так из 3 овец, инфицированные суспензией клеток молока коровы № 000, положительно реагировали 2 овцы, что составило 66,6%, а через 60 дней все 3 овцы были сероположительными, что составило уже 100% в данной группе.

Овцы, инфицированные суспензией клеток молока коровы
№ 000, как через 30, так и через 60 дней были сероположительными только на 66,6% т. к. у одной овцы на протяжении всего периода наблюдения антител к ВЛКРС не обнаружили. В группе овец, которых заражали лейкоцитами крови коров-доноров, уже через 30 дней все животные имели антитела к вирусу лейкоза крупного рогатого скота.

Таким образом, результаты изучения лейкозогенных свойств молочного секрета от больных лейкозом коров на биологический чувствительных к ВЛКРС овцам указывают на то, что молоко может быть одним из факторов горизонтальной передачи вируса от взрослых животных молодняку КРС при выпойке последних не пастеризованным «сборным» молоком.

УДК 619;616.98

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТЬ МЕТОДОВ
РИД И ИФА ПРИ ВЫЯВЛЕНИИ АНТИТЕЛ К ВИРУСУ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА
В СЫВОРОТКЕ КРОВИ И МОЛОКЕ

, ,

ФГОУ ВПО «Башкирский ГАУ»

В настоящее время для диагностики лейкоза крупного рогатого скота, наряду с основным клинико-гематологическим нашел широкое применение в практике иммунологический метод (РИД), который дает возможность выявлять в сыворотке крови антитела к антигенам ВЛКРС (вирус лейкоза крупного рогатого скота). Использование реакции иммунодиффузии в системе осуществления противолейкозных мероприятий позволяет оздоровить поголовье крупного рогатого скота за 3-5 лет в зависимости от первоначального поражения стад
лейкозом и вирусом, технологии ведения животноводства. Вместе с тем, для предотвращения распространения ВЛКРС среди оздоровленного поголовья и ускорения процесса оздоровления стад от лейкоза, важное значение приобретает использование РИД в комплексе с более чувствительными диагностическими тестами. Одним из таких тестов, который определяет вирусоспецифические антитела к ВЛКРС ниже пороговой величины, улавливаемой РИД, является метод иммуноферментного анализа (ИФА). Достоинство иммуноферментного анализа заключается в его высокой чувствительности, быстроте, возможности автоматизации процесса постановки реакций.

Цель нашей работы заключалась в проведении сравнительных исследований сывороток крови методами РИД и ИФА для определения антител к вирусу лейкоза крупного рогатого скота. Под наблюдением было 240 коров черно-пестрой породы, инфицированных ВЛКРС. Исследования коров проводили в динамике (через 3-4 мес.) с учетом их физиологического состояния. Согласно «лейкозного ключа» среди инфицированных ВЛКРС коров 27% составляли больные и подозрительные в заболевании лейкозом. В сравнительном аспекте (контроль) исследованы в ИФА 192 сыворотки крови коров и молодняка двух стад, оздоровленных от лейкоза и инфекции ВЛКРС комплексным клинико-гематологическим и серологическим (РИД) методами диагностики.

Для постановки РИД использовали набор серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота Курской биофабрики. Компоненты для проведения ИФА были приготовлены в ВНИИЭВ им. (Москва) ВИЭВ. Гематологические и серологические исследования на лейкоз проводили согласно разработанным методическим рекомендациям.

В стаде коров, где лейкоз был установлен гематологический (больных - 14,5%, подозрительных в заболевании - 12,5%), в реакции иммунодиффузии были выявлены вирусоспецифические антитела у 89,1%, а методом иммуноферментного анализа - 96,2% животных. Среди гематологических больных и подозрительных в заболевании лейкозом животных антитело носительство определено в 100% случаев обеими методами. При сравнении эффективности двух методов оказалось, что по чувствительности ИФА превосходит реакцию иммунодиффузии в геле агара на 7,1% (положительных реакций было установлено по РИД, так и ИФА). В эти периоды невозможно было установить наличие антител к ВЛКРС в сыворотке крови, о чем свидетельствует выпадение положительных реакций в 10,9% и 3,8% случаев соответственно. После отела у 95,1% коров положительные реакции восстановились, и лишь у 4,1% из них антитела не обнаружены в РИД в связи с низкой иммунологической реактивностью организма. Практически анологичные показатели были и при исследовании молока в РИД и ИФА.

Практический интерес представляло сравнительное исследование сывороток крови и молока на наличие антител к ВЛКРС у животных, оздоровленных стад с использованием РИД, методом иммуноферментного анализа. Установлена в стадах, освобожденных от инфекции ВЛКРС на основе реакции иммунодиффузии, от 1,9% до 4,8% серологический положительных в ИФА. Дальнейший серологический контроль за этими животными позволит определить возможность и сроки появления у них положительных реакций в РИД.

Таким образом, использование на различных этапах осуществления противолейкозных мероприятий серологических методов диагностики – РИД и ИФА позволяет обеспечить большую надежность при создании стад, благополучных по лейкозу крупного рогатого скота, а исследование молока - увеличить кратность исследования и сократить сроки оздоровления хозяйств от лейкоза.

УДК 619:616.681:636.2

ГИПОФУНКЦИЯ ЯИЧНИКОВ У КОРОВ:
ДИАГНОСТИКА И ПРОФИЛАКТИКА

, ,

ФГОУ ВПО «Башкирский ГАУ»

Проведенная в 2007 году акушерско-гинекологическая диспансеризация коров голштинской породы, завезенных из Голландии, в хозяйстве «Шемяк» -Агро» позволила сделать вывод, что из 262 исследуемых животных стельность установили у 12-ти коров (5%). У 15-и животных (6%) матка находилась в брюшной полости, что соответствует 4-6-месячной стельности, аналогичная картина может наблюдаться и у бесплодных коров. В связи с этим был поставлен «сомнительный» диагноз на стельность. 109 (42%) коров были осеменены менее 3-х месяцев назад и ректальная диагностика стельности не является достоверной. Остальные 126 коров (47%) были бесплодными.

По данным анамнеза, результатам клинических и гинекологических исследований коров, длительное время не приходивших в охоту после отела, у большинства из них установлена:
гипофункция яичников - 103 гол. (81%); тихая охота - 12 гол. (9%); желтое гол. (6%); с патологией матки – 2 гол. (1,3%); цервицит – 1 гол. (0,7%).