Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии (стр. 50 )

Время появления и характер роста колоний зависят от вида гриба — возбудителя дерматомикоза.

Возбудитель микроспории — Microsporum. Различают три вида данного рода гриба: Microsporum lanosum, M. equinum и М. gypseum. Стригущий лишай, вызванный грибом рода микроспорум, по клиническому проявлению не отличается от трихофитии, за исключе­нием того, что волосы на пораженных участках кожи головы, ног обламываются ближе к поверхности кожи. К микроспории вос­приимчивы кошки, собаки, лошади, пушные звери, обезьяны, тигры, а также человек (особенно дети). Взятие патологического материала, порядок его исследования такие же, как при трихофи­тии.

В культурах гриб микроспорум имеет мицелиальную форму. Мицелий септирован, многоклеточный, почти такой же, как и мицелий трихофитона, отличие только в пораженном волосе: гриб располагается не рядами, а беспорядочно разбросан, обычно в виде «сотообразных» скоплений.

Необходимо проводить дифференциацию трихофитона и мик-роспорума ввиду различного их антигенного строения.

Люминесцентная диагностика микроспо­рии. Осуществляют с помощью ПРК-4 с фильтром Вуда в тем­ном помещении. При наличии возбудителя последний обнаружи­вают по характерному зеленоватому свечению под действием уль­трафиолетового излучения (возбудители трихофитии не флуорес­цируют). Возможна идентификация видов и родов возбудителей трихофитии и микроспории методом флуоресцирующих антител.

Различие в антигенном строении разных видов дерматомице-тов имеет значение в создании профилактических специфических биопрепаратов. Биологическая промышленность выпускает вак­цину для иммунизации животных против стригущего лишая с ис­пользованием культуры гриба T.faviforme (вакцина ЛТФ-130).

Биопроба. Микроспорию можно воспроизвести у морских свинок, кроликов путем втирания культуры возбудителя или пато­логического материала в скарифицированную кожу.

Возбудитель парши. Парша как дерматомикоз клинически проявляется так же, как и стригущий лишай, но при парше пора­жения более глубокие. Возбудителей парши относят к роду Achorion. A. gallinae поражает кожу, перья птицы, реже вызывает заболевание у млекопитающих. A. schoenkini вызывает заболева­ние у человека; спорадически болеют собаки, кошки, обезьяны, редко телята.

Отбор и пересылка патологического ма­териала. Для лабораторного исследования материал берут так же, как при диагностике трихофитии. В культуре гриб Achorion имеет многоклеточный септированный мицелий, в препаратах из патологического материала находится в виде тонкого септирован-ного мицелия со спиралевидными «воздушными спорами» на кон­цах. Хорошо видны хламидоспоры с двухконтурной оболочкой. Хламидоспоры круглой или многогранной формы располагаются цепочками или группами. Диаметр споры 4...8 мкм. В пораженном волосе при микроскопировании видны темные образования — пу­зырьки воздуха.

Культивируют возбудитель парши на тех же питательных сре­дах, что и возбудителей стригущего лишая. На глюкозном агаре Сабуро колонии гриба белого цвета, бархатистые, гладкие, при старении складчатые, пигментированные (розового цвета).

Биопрепараты. Препарат ТФ-130 (ВИЭВ) и сухая вак­цина ЛТФ-130 (ВИЭВ) против трихофитии крупного рогатого скота содержат аттенуированный штамм Trichophyton verrucosum (Vaviforme).

Вакцина СП-! против трихофитии лошадей: из штамма Trichophyton equinum.

Вакцина Триховис (ВИЭВ) сухая против трихофитии овец: из штамма Trichophyton verrucosum (вариант автотрофикум).

Вакцина МЕНТАВАК против трихофитии пушных зверей и кроликов: готовят из культуры Trichophyton mentagrophytes.

Вакцина Камелвак-ТС против трихофитии верблюдов: содер­жит аттенуированный штамм гриба Trichophyton sarkisovi.

Вакцина МИКОЛАМ против трихофитии и микроспории пло­тоядных животных, нутрий и кроликов.

Поливак-ТМ: инактивированная вакцина против дерматофи-тозов собак, включает 8 видов и разновидностей грибов родов Trichophyton и Microsporum.

Вакцина ВАКДЕРМ против дерматофитозов: предназначена для борьбы с микроспорией и трихофитией собак, кошек, пушных зверей и кроликов. Готовят из высокоиммуногенных штаммов Microsporum canis, Microsporum gypseum и Trichophyton mentagrophytes.

Возбудитель кандидамнкоза. Принадлежит к роду Candida, включающему 7 видов. Наиболее частым возбудителем заболева­ния служит вид Candida albicans, реже С. tropicahs и др. Кандида-микоз (молочница) характеризуется воспалением с последующим некрозом слизистых оболочек пищеварительного тракта, начиная с ротовой полости, и образованием налета (пленок) на поверхнос­ти слизистой. Кандидамикозом болеют птицы (особенно молод­няк), телята и реже животные других видов. У взрослого крупного рогатого скота поражаются легкие, вымя; у поросят заболевание проявляется афтозным стоматитом и энтеритом. К кандидамикозу восприимчив человек, особенно грудные дети.

Патологический материал. Для микологического исследования у больной птицы и млекопитающих берут пинце­том пленки (налет) со слизистой оболочки ротовой полости; у коров исследуют дополнительно молоко (пробы из пораженной доли вымени). Посмертно делают соскобы со слизистой пищева­рительного тракта, а также отбирают кусочки пораженных орга­нов. Павшую птицу и трупы мелких животных направляют цели­ком.

Исследование патологического материала включает в себя мик-роскопирование нативных препаратов методом «раздавленная капля» или фиксированных и окрашенных по Граму, посев патологического материала для получения культуры гриба, биопробу.

Материал для микроскопического исследования готовят так же, как при диагностике дерматомикозов.

Возбудитель кандидамикоза — дрожжеподобные круглые и овальные почкующиеся клетки, диаметром 2,5...6мкм. Мицелий септированный (многоклеточный), распадающийся на бластоспо-ры. По Граму окрашивается положительно, при этом четко видны структурные элементы клетки.

Выделение чистой культуры. Возбудитель выде­лить трудно, так как исследуемый материал загрязнен бактериаль­ной микрофлорой. Поэтому перед посевом на питательные среды материал обрабатывают 0,5 %-м раствором фенола или формали­ном, а в питательные среды добавляют пенициллин и стрептоми­цин. Культивируют на глюкозном агаре Сабуро с рН 6,0...6,5 (для очистки от бактериального загрязнения рекомендуют применять среды с рН 2,5...3,0) при 37 °С. Рост колоний Candida отмечают через 2...4сут в виде средней величины гладких образований на поверхности среды, иногда с радиально расположенными лучами, сливкоподобного кремового цвета. Колонии врастают и в глубь среды. Встречаются колонии S - и R-формы. В жидких питатель­ных средах гриб растет в виде густого крошковатого осадка; обра­зует пристеночное кольцо.

Дифференциация. Для дифференциации видов гриба используют посев на среды с глюкозой, фруктозой, маннозой, мальтозой, галактозой, сахарозой, раффинозой, левулезой и инди­катором Андрэдэ. Ферментативная способность по отношению к перечисленным углеводам у разных видов неодинаковая.

Патогенность. Определяют при заражении лаборатор­ных животных 1 мл взвеси 48-часовой культуры гриба, выращен­ной на среде Сабуро, содержащей 300...500 тыс. клеток. Кроликов заражают внутривенно, белых мышей внутрибрюшинно в дозе 0,5.мл. Животные погибают на 2...7-е сутки в результате генерали­зованного процесса с образованием белых гранулем в почках, пе­чени, сердце и других органах.

Возбудитель эпизоотического лимфангита (африканского сапа) (Histoplasma farciminosus, Cryptococcus farciminostis). Болезнь цель-нокопытных, характеризуется хроническим течением, поражени­ем лимфатических узлов и лимфатических сосудов кожи подкож­ной клетчатки. Клинически отмечают плотные узелки в толще кожи с последующим их размягчением и развитием абсцессов. После вскрытия абсцессов образуются язвы с гнойным экссуда­том. Края язв неровные.

Микологический диагноз. Лимфангит ставят на основании обнаружения возбудителя в микроскопируемых препа­ратах-мазках из гнойного экссудата язв, который обычно служит патологическим материалом для отправки в лабораторию. В со­мнительных случаях производят посев из гноя на питательные среды. Возбудитель — криптококк, трудно культивируется. Био­пробу на лабораторных животных не проводят, так как они нечув­ствительны к данному виду гриба. Имеются единичные сообще­ния об экспериментальном воспроизведении заболевания у лоша­ди в виде местного процесса; у лабораторных животных при внут-рибрюшинном заражении криптококком отмечалось поражение регионарных лимфатических узлов.

У возбудителя хорошо выражен полиморфизм, то есть мор­фология его в культуре и в патологическом материале {от больного животного) различна. Наиболее характерная форма его в организме (исследуемом материале)—яйцевидная, эллипсоидная, форма дрожжевой клетки с хорошо выраженной двухконтурной оболочкой. Длина клетки З...5мкм, ширина 2...3мкм. Чаше мик-роскопируют нативный неокрашенный материал — влажный пре­парат из гноя, покрытый покровным стеклом, как придавленная капля. Естественный цвет цитоплазмы светло-сине-зеленый, .на­поминающий цвет морской воды. Внутри клетки просматривают 3...4 гранулы, зернышки: особенно они хорошо видны в препара­тах, окрашенных по Граму или по Романовскому — Гимза. В маз­ках из культуры формы дрожжевых клеток не встречаются; вне животного организма гриб развивается в мицелиальной форме. Мицелий септированный, ветвящийся, многоклеточный.

Получить первичную культуру криптококка из патологическо­го материала очень трудно. Но если удается ее вырастить (при рН 6,8...7,0), то при дальнейших пересевах сравнительно легко удается поддерживать культуры на МППА, глюкозо-глицерино-вом МПА (углеводы по 2...2,5 %). Можно использовать агар Сабу-ро. Рост колоний появляется через 1О...12сут. Сначала они мел­кие, в последующем увеличиваются и возвышаются над поверхно­стью среды, складчатые, кремового цвета, сухие. Окраска посте­пенно темнеет, становится коричневой.