Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии (стр. 52 )

Возбудитель кяавицепстоксикоза (Claviceps paspali). Поражает траву, сено. Развиваясь на поверхности кормов, формирует кони­дии, округлые желто-бурые склероции размером 1,5...3,5 мм. Вы­зывает алиментарный токсикоз у лошадей, реже — у крупного ро­гатого скота, овец, в единичных случаях — у свиней и гусей.

Возбудители аспергиллотоксикозов (Aspergillus fumigatus, A. flams, Л. niger, A. clavatus). Известны около 30 видов и разновидностей рода аспергиллус, обладающих токсическими свойствами. Различа­ют 14 токсических фракций токсинов грибов данного рода. Наибо­лее токсичны фракции Вь В2, которые обладают канцерогенным действием. Эти токсины названы афлатоксинами. Заболевание обычно возникает у птиц, а также у других видов домашних живот­ных вследствие алиментарного инфицирования пораженным кор­мом. Аспергиллотоксикоэом поражается и человек при поедании недоброкачественных продуктов как животного происхождения (мясо, молоко), так и растительного (мука, арахис и др.).

Схема микологического исследования проб корма. Микроскопирование препаратов из смывов с пораженных участков корма, посевы на специальные питательные среды с целью выделения чистой культуры с последующим ее микроскопированием и определением афлатоксинов.

Морфологические и к ультуральные свойства. Типичны для всех представителей рода Aspergillus. Отличия имеет A. flavus, колонии которого на среде Чапека учиты­вают через З...4сут. Окончательно вид определяют через 1О...12сут культивирования, когда появляются характерные органы плодо­ношения. Колонии вначале белого, затем зеленоватого или темно-бурого цвета. При микроскопировании отмечают септированный мицелий; гифы 2...3 мкм в диаметре. Конидиеносцы несептирова-ны, с головками (булавовидные утолщения), слабо-зеленого цве­та, размером до 350 мкм. На концах располагаются продолговатые стеригмы в один ряд. От стеригм отшнуровываются конидии-спо­ры также зеленого цвета.

Для выделения чистой культуры других видов грибов данного рода производят посев проб корма на следующие питательные среды: агар Сабуро, сусло-агар. Исследуют в том же порядке.

Токсичность. Определяют при подкожном введении бе­лым мышам культуральной суспензии гриба и по реакции кожной токсичности (РКТ).

Для определения афлатоксинов применяют методику тонко­слойной хроматографии. Помимо грибов рода Aspergillus микоток-сикоз может быть обусловлен также грибами рода Penicillium, Mucor (головчатая плесень) и др. Исследования проводят по обще­принятой схеме.

ПРИЛОЖЕНИЕ

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ К ПРОВЕДЕНИЮ ПРАКТИЧЕСКИХ ЗАНЯТИЙ ДЛЯ ПРЕПОДАВАТЕЛЕЙ

ОБЩИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ. Практические занятия должны быть тесно увязаны с теоретическим курсом микробиологии, ибо они не только позволяют закрепить приобретенные знания и ус­воить микробиологическую технику, но и учат правильно, точно и аккуратно обращаться с патологическим материалом, соблюдать личную гигиену и профилактические меры по предупреждению собственного заражения. Во время практических занятий необхо­димо уделять серьезное внимание буквально всем мелочам.

Сама обстановка кафедры (плакаты, муляжи, музейные культу­ры и т. п.), идеальная чистота помещения должны воспитывать у студентов чувство ответственности и повышенную требователь­ность к себе.

На первом практическом занятии или вводной лекции следует ознакомить студентов с правилами и режимом работы кафедры: входя в лабораторию, они должны надеть халат, занять свое рабо­чее место, проверить, все ли нужные предметы находятся на рабо­чем столе, исправен ли микроскоп и о замеченном беспорядке доложить преподавателю; во время выполнения практических за­даний необходимо соблюдать тишину, не переходить бесцельно с места на место; запрещено без разрешения выносить за преде­лы кафедры какие бы то ни было материалы (пробирки, краски и т. п.); личные веши (книги, портфели) оставляют на отведенном для этого столе (при себе иметь тетрадь и цветные фломастеры).

При исследовании заразного материала и работе с живыми культурами применяют только соответствующие инструменты (пинцеты, бактериологическую петлю, шпатели и др.), которые после использования обеззараживают прокаливанием на пламени, кипячением, дезинфекцией и другими способами. Все использо­ванные материалы, трупы животных, культуральный материал сжигают или обеззараживают стерилизацией под давлением 105,5 кПа. Предметы, случайно загрязненные бактерийной куль­турой или другим инфицированным материалом, должны быть сразу же тщательно продезинфицированы. В лаборатории строго воспрещается курить и принимать пищу.

По окончании занятий следует привести в порядок рабочий стол, протереть и убрать микроскоп, тщательно вымыть и продезинфицировать руки, снять халат. Староста группы следит за со­блюдением установленного порядка на кафедре.

Преподаватель должен заранее подготовить необходимый для занятия материал и следить за ходом выполнения задания, при не­обходимости оказывая помощь; если студент допускает ошибку, сразу исправляет ее, не упуская из виду ни одной мелочи.

В процессе прохождения курса целесообразны контрольные работы и терминологические диктанты. Они могут быть в виде за­дач или устного опроса студентов по выполненным работам или домашним заданиям. Студентам полезно вести терминологичес­кий словарь и записывать ответы на вопросы в отдельной тетради, что упрощает их проверку преподавателем.

Посещения практических занятий заведующим кафедрой и со­трудниками смежных кафедр с последующим обсуждением на за­седании кафедры помогают улучшить методику проведения прак­тических занятий.

Преподаватель сообщает тему следующего практического заня­тия, а также задание для внеаудиторной самостоятельной работы, указывая нужные источники литературы. Студенты в таких случа­ях проходят с готовыми конспектами, и преподаватель после кон­троля выполнения самостоятельной работы дает целевую установ­ку на занятие, демонстрирует некоторые элементы техники вы­полнения, дает задание и следит за ходом работы.

Целенаправленная организация учебного процесса заставляет студентов с первых дней работать с книгой, аккуратно посещать лекции, готовиться к каждому практическому занятию.

При изучении частной микробиологии весьма целесообразно давать студентам самостоятельные работы, обеспечивая практи­ческие занятия материалом для исследования, который собирает­ся от незаразных павших или убитых животных. Когда материал доставлен, группа оценивает, правильно ли он собран, упакован и документирован, а затем приступает к исследованию самого мате­риала.

Полезно провести 2...3 практических занятия с полным бакте­риологическим исследованием и оформлением всей лабораторной документации (заполнение журнала по экспертизе, отправка отве­та). Необходимо также практиковать экскурсии в научно-исследо­вательские учреждения, лаборатории и биокомбинаты. Все это по­полняет знания студентов по микробиологии и приближает их к конкретным практическим вопросам.

ЧАСТНЫЕ МЕТОДИКИ.

Тема 1. Цель занятия: ознакомить студентов с микробиологической лабораторией, ее основным обо­рудованием и правилами работы в ней; научить самостоятельной работе с микроскопом, в том числе с иммерсионной системой; оз­накомить с анилиновыми красками; научить самостоятельной ра­боте студентов по просмотру готовых мазков; дать задание студен­там на дом по подготовке к следующему занятию.

Оборудование и материалы: термостаты, микроанаэростаты, хо­лодильники, сушильные шкафы, автоклавы, центрифуги, вакуум­ные насосы, дистиллятор, водяные бани, потенциометр (рН-метр), фильтры, лабораторная посуда, световой, люминесцентный и электронный микроскопы, темнопольный конденсор, фазово-контрастное устройство, окуляр - и объект-микрометры, готовые препараты с бактериями, иммерсионное масло.

Тема 2. Цель занятия: ознакомить студентов с основными бак­териологическими красителями, техникой их приготовления и методом простой окраски бактериальных препаратов; со сложны­ми методами окраски, с помощью которых дифференцируют гра-циликутные, фирмикутные и кислотоустойчивые бактерии; с ме­тодами обнаружения у бактерий спор, капсул, жгутиков, цитоп-лазматических включений методом прямого флуорохромирования бактерий.

Оборудование и материалы: набор сухих бактериологических красок и их растворов, культуры бактерий на МПА и в МПБ (Е. coli, S. aureus), световые микроскопы, обезжиренные предмет­ные стекла, фуксин Пфейффера, красящие бумажки по Синеву, раствор метиленовой сини, фильтровальная бумага; смесь культур Е. coli и S. aureus, смесь Е. coli, S. aureus и микобактерий (вакцина БЦЖ); красители для окраски бактерий по методам Грама и Циля—Нильсена; световые микроскопы, бактериологические пет­ли, 96%-й этанол, фильтровальная бумага, предметные обезжи­ренные стекла, 5%-й раствор серной кислоты, дистиллированная вода; 24-часовая культура P. multocida на сывороточном МПА, культура В. cereus на МПА на стадии спорообразования; сенной настой, красители, предметные и покровные стекла, световые микроскопы.

Тема 3. Цель занятия: ознакомить студентов с особенностями морфологии и методами исследования микроскопических грибов различных таксономических групп.

Оборудование и материалы: грибные культуры родов Мисог, Penicillium, Fusarium на плотных средах в чашках Петри; суспензия дрожжей в бактериологических пробирках; предметные и покров­ные стекла, микологические крючки или препаровальные иглы, световой микроскоп.

Тема 4. Цель занятия: ознакомить студентов с назначением и основными методами стерилизации, применяемыми в микробио­логии.

Оборудование и материалы: автоклав, печь Пастера, аппарат Коха, керамические, асбестовые и мембранные фильтры, чашки Петри, бактериологические пробирки, колбы, мерные пипетки, стерилизатор, шприцы, иглы, пинцеты, вакуумный насос и др.