Практикум по ветеринарной микробиологии и иммунологии (стр. 35 )

Антигенная структура. Клетка кишечной палочки имеет три типа антигенов —О (соматический), К (оболочечный, капсульный) и Н (жгутиковый). О-антиген — термостабильный, расположен в клеточной стенке, состоит из липидо-полисахари-до-протеинового комплекса: липид определяет токсичность (эн­дотоксин), полисахарид — серологическую специфичность, про­теин — носитель антигенного свойства. К-антигены ~ поверхнос­тные, оболочечные; это кислые полисахариды, редко протеины. По своим свойствам их подразделяют на три типа: В, L, А. Тип В — термолабильный: инактивируется при 100 °С в течение 1ч. Тип L — термолабильный: инактивируется при 60 "С в течение I ч. Тип А — термостабильный, имеется у слизистых капсулообразую-щих штаммов: разрушается при 120 °С в течение 2,5 ч. Н-анти-ген — белковой природы, термолабильный, представлен несколькими десятками серологических разновидностей. Антигенное строение принято выражать формулой — за буквенным обозначе­нием каждого антигена следуют арабские цифры, отделенные дво­еточием, например 0111 : В4: Н2 или 055 : В5 : НЮ. Цифры обо­значают порядковый номер антигена в диагностической антиген­ной схеме, созданной Кауффманом с сотр. Антигеном каждого типа гипериммунизируют кролика и получают специфические аг­глютинирующие сыворотки для диагностических целей. Биологи­ческая промышленность выпускает сыворотки к О-антигенам, по­этому в лабораториях проводят серологическую типизацию серо-групп кишечной палочки. Наиболее частыми возбудителями ко-либактериоза служат бактерии серогрупп 078, 086, 015, 08, 09, 0119, 0137, 0115, 041, 0141, 0149 идр.

Патогенность. В лабораторных условиях определяют внутрибрюшинным заражением белых мышей. В большинстве случаев Е. colt, выделенные из трупа или фекалий больных коли-инфекцией животных, патогенны для мышей. Культуры Е. соН, выделенные от здоровых животных, обычно непатоген­ны. Патогенность для белых мышей зависит от вирулентности штамма, дозы вводимых бактерий, массы (возраста) мышей, метода заражения и индивидуальной иммунологической реак­тивности, условий их содержания и кормления. Белые крысы мало чувствительны к Е. colt, щенки, котята в 2...3-месячном возрасте восприимчивы при оральном заражении. Для биопро­бы можно использовать куриные эмбрионы, гибель которых наступает через 24...48 ч после заражения единичными бакте­риями Е. coli.

Одним из важных факторов вирулентности кишечной палочки является ее способность продуцировать токсины двух типов: тер­молабильный экзотоксин и термостабильный эндотоксин (поли­сахар идо-лип идо-протеиновый комплекс). Некоторые штаммы Е. coli продуцируют антибиотические вещества — колицины, по­давляющие рост отдельных штаммов кишечной палочки и не дей­ствующие на бактерии других видов. Колицины термостабильны. Могут продуцироваться как патогенными, так и непатогенными штаммами.

Помимо общепринятого микробиологического исследования существуют также дополнительные методы диагно­стики. Люминесцентно-серологтеский метод используют как ори­ентировочный для определения патогенных серотипов Е. coli при массовых вспышках желудочно-кишечных заболеваний. Этот ме­тод позволяет за короткий срок получить предварительные ре­зультаты.

Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации и реакция нейт­рализации—ускоренные методы, позволяющие обнаружить в фе­калиях больных животных возбудителя и установить его кон­центрацию.

Биопрепараты. Вакцина поливалентная гидроксидалю-миниевая формолтиомерсаловая против колибактериоза (эшери-хиоза) поросят, телят и ягнят.

Вакцина поливалентная против сальмонеллеза и колибактери­оза пушных зверей.

Колипротектан ВИЭВ.

Сыворотка поливалентная против колибактериоза (эшерихио-за) сельскохозяйственных животных.

Сыворотки О-коли агглютинирующие.

Колиадгезин-тест: антиадгезивные коли-сыворотки К 88, К 99, 987 Р, А 20, F41.

Возбудители салъмонеллезов. У животных заболевания вызыва­ют главным образом следующие виды рода сальмонелл: Salmonella enteritidis, S. choleraesuis (Suipestifer), S. typhimurium, S. pullorum, S. abortus equi, S. abortus ovis. Бактерии данного рода впервые описал Салмон (1885), в честь которого они получили родовое название Salmonella. Сальмонеллезы у молодняка разных видов животных протекают в острой септической форме: у телят в возрасте от 3...4 нед до 4...5 мес с явлениями лихорадки и профузного поноса; у поросят —до 4 мес; у овец всех возрастов (возможно внутриут­робное инфицирование); у жеребят, как правило, происходит внутриутробное инфицирование. У конематок заболевание харак­теризуется абортами. Аборты отмечают и у овцематок.

Для бактериологического диагноза направ­ляют от абортировавших овцематок и кобыл плод или плодовые оболочки, околоплодную жидкость, истечения из родовых путей, желудок плода, органы плода. В остальных случаях (при септичес­кой форме) посылают труп целиком либо трубчатую кость, долю печени с желчным пузырем, селезенку, почку, брыжеечные лим­фоузлы. Для прижизненной диагностики исследуют фекалии больных (редко прибегают к получению гемокультуры). Порядок бактериологического исследования материала от разных видов животных: все виды рода Salmonella обладают многими общими свойствами, поэтому предварительно при исследовании выделен­ной культуры проводят родовую дифференциацию, а затем — ви­довую (внутри рода).

Микроскопия. Из тканей органов готовят препараты-от­печатки и окрашивают их по Граму. Сальмонеллы — грамотрица-тельные палочки величиной 2...4 мкм; споры и капсулы не образу­ют, располагаются одиночно, иногда попарно.

Выделение чистой культуры. Из патологическо­го материала делают посевы на дифференциально-диагностичес­кие среды. Наиболее часто используют агар Эндо, среду Плоски-рева или висмут-сульфит агар (модифицированная среда Вильсо­на— Блера); оптимальный рН среды 7,2...7,4. На средах Эндо и Плоскирева сальмонеллы растут в виде бесцветных колоний; на висмут-сульфит-агаре — черных колоний. При посевах из органов трупа используют МПБ и МПА в пробирках. В МПБ рост диф­фузный, на МПА сальмонеллы формируют гладкие бесцветные прозрачные колонии с ровными краями. Сальмонеллы ферменти­руют глюкозу, не сбраживают лактозу, сахарозу, не свертывают молоко, не редуцируют метиленовую синь в молоке. Не образуют индола. Отдельные виды образуют сероводород. Реакция с метил-ротом положительная, а Фогес — Проскауэра — отрицательная.

При дифференциации видов сальмонелл внутри рода использу­ют среды Биттера и Штерна. В состав среды Биттера входят: рам-ноза — 5 г, двухосновный фосфат натрия —0,5 г, сульфат аммо­ния — 1 г, цитрат натрия (трехосновный) — 2 г, NaCt — 0,5 г пеп­тон — 0,05 г и дистиллированная вода — 1000 мл. Глицерин-фук-синовый бульон Штерна состоит из МПВ (100 мл) с насыщенным раствором основного фуксина (5...6 капель), глицерина (1 мл) и 10 %-го водного раствора сульфита натрия (2 мл). Среды стерили­зуют текучим паром 10...15мин. Положительный результат на сре­дах Биттера и Штерна проявляется покраснением; при отрица­тельном результате — желтое окрашивание.

Серологическую типизацию выделенной куль­туры проводят с культурой, выросшей на скошенном агаре с кон­денсатом. Применяют пластинчатый метод РА. У сальмонелл раз­личают соматический термостабильный О-антиген и жгутиковый термолабильный Н-антиген. Поскольку по О-антигену, общему для нескольких видов сальмонелл, последние подразделяют на группы (обозначенные заглавными буквами латинского алфави­та), то вначале исследуемую культуру проверяют с групповыми (поливалентными) сальмонеллезными агглютинирующими сыво­ротками в РА на стекле. При положительном результате с группо­вой сывороткой проводят испытание той же культуры с моноре-цепторными О-сыворотками тех рецепторов, которые входят в данную группу. Кроме того, эти культуры еще испытывают с мо-норецепторными Н-сыворотками. Если культура типична по био­химическим свойствам, но не агглютинирует с О - и Н-сыворотка­ми. следует испытать ее отношение к сальмонеллезному бактерио­фагу, чувствительность к которому свидетельствует о принадлеж­ности к роду сальмонелл.

Возбудитель сальмонеллеза телят (S. enteritidis) открыт Гертне-ром в 1888 г. Реже сальмонеллез телят может быть обусловлен S. typhimurium, по антигенной структуре входящего в группу В. Этот микроб часто вызывает сальмонеллез у водоплавающей пти­цы, а варианты S. enteritidis dublin, rostock — заболевание у человека в виде гастроэнтерита вследствие пищевой токсикоинфекции. По антигенному строению S. enteritidis (и варианты) относятся к груп­пе D. В эту же группу входит и возбудитель пуллороза (тифа кур) S. pullorum gallinarum. Пуллороз протекает остро, септически, с большой смертностью (до 100 %). В лабораторию направляют све­жий труп. Взрослая птица болеет бессимптомно, хронически. Для

выявления таких кур-бактерионосителей обследуют взрослую птицу в условиях хозяйства серологическим методом — кровяно-капельной РА с пуллорным антигеном.

Возбудители салшонеллеза поросят (S. typhisuis или S. choleraesuis) помимо заболевания у свиней могут вызвать пищевые токсикоинфекции у людей. Данная группа сальмонелл патогенна для белых мышей. По антигенной структуре принадлежит к груп­пе С. Возбудителем сальмонеллеза у свиней может быть S. typhimurium. По О-антигену относят к группе В.

Возбудитель сальмонеллезного аборта кобыл (S. abortus equi) от­крыт в 1893 г. Сбраживает маннит, глюкозу, арабинозу, дулышт; среду Штерна не изменяет. По О-антигену входит в группу В. Для бактериологической диагностики посылают абортированный плод от больного животного, остальное поголовье лошадей обследуют серологически (РА), фекалии исследуют для выявления бактерио­носителей. Показателем развития инфекционного процесса у взрослых лошадей служит титр сыворотки в РА выше 1 : 400.