Гематологія і переливання крові (стр. 28 )

Цель работы – изучить реактивность оксида азота и кислородтранспортной функции крови при гемической гипоксии, вызванной гипоплазией кроветворения.

Материал и методы исследования. Работа выполнена в эксперименте на 60 крысах линии Вистар массой (250,4 ± 6,1) г на модели апластической анемии (АА) и, соответственно, гемической гипоксии (ГГ), вызванной гипоплазией кроветворения: бензол
(0,2 мл/100 г массы животных, подкожно, через день, 5 раз); внешнее g-облучение (после бензола, в дозе 5 Гр, источник облучения – 60Со).

В условиях ГГ применяли методы целенаправленного воздействия на метаболизм NO [2]. Инвазивные манипуляции выполняли под анестезией. Проведено четыре серии опытов: І серия
(n = 20) – контроль (норма – интактные животные); ІІ (n = 20) – контроль создания модели ГГ и последующего восстановления; ІІІ (n = 10) – моделирование стимуляции образования NO в условиях ГГ с помощью введения донатора NO L-аргинина (10 мг/100 г, 2% водный раствор; внутрибрюшинно, ежедневно, 5 раз); ІV серия (n = 10) – моделирование угнетения образования NO в условиях ГГ с помощью ингибитора NO-синтазы L-w-аргинина (L-NNA) – (1 мг/100 г, 0,2% водный раствор; внутрибрюшинно, ежедневно, 5 раз). Заключительные определения показателей проводили через 1–5 дней после применения воздействий.

Контролировали гемограмму (количество эритроцитов – Эр, Т/л; лейкоцитов – Л, Г/л; тромбоцитов – Tр, Г/л; гематокритную величину – Гт, %; содержание гемоглобина – Hb, г/л и цветовой показатель – ЦП, отн. ед.), пул железа крови, клеточный состав костного мозга (миелограмму).

Состояние системы оксида азота определяли по содержанию в плазме (пл.) и эритроцитах (эр.) крови стабильных конечных метаболитов NO – нитрита аниона (NO2-) и нитрата аниона (NO3-): NO2- пл., NO2- эр. , NO3- пл., NO3- эр.; NO пл. (NO2- пл. + NO3- пл.) , NO эр. (NO2- эр. + NO3- эр.) – мкг/мл [9, 2].

Оценка гемической гипоксии включала показатели кислородтранспортной функции (КТФ) крови [5]: концентрация общего гемоглобина (Hb, г/л) и его дериватов (метгемоглобина, сульфгемоглобина и суммы дериватов – MtHb, SHb, DHb, г/л); количество эритроцитов (Эр, Т/л); концентрация в эритроцитах 2,3-дифосфоглицерата (2,3-ДФГ, ммоль/л.); показатели метаболизма железа крови (СЖ, ОЖСС, НЖСС; мкмоль/л; НТЖ,%); напряжение кислорода в артериальной и в смешанной венозной крови (РаО2, РvО2, мм рт. ст.); кислородная емкость крови (СmaxО2, об. %); содержание кислорода в артериальной и в смешанной венозной крови (СаО2, СvО2, об. %); артерио-венозное различие по кислороду (аvDО2, об. %); минутный объем крови [МОК, мл/(100г∙мин-1)]; объемная скорость транспорта кислорода артериальной и смешанной венозной кровью [VаО2, VvО2, мл/(100г∙мин-1)]; потребление кислорода тканями [VО2, мл/(100г∙мин-1)]; соотношение скорости транспорта кислорода артериальной кровью к его потреблению (VаО2/VО2) – SCR, отн. ед.; напряжение углекислого газа в артериальной и в смешанной венозной крови (РаСО2, РvСО2, мм рт. ст.); концентрация буферных оснований в крови (ВВа, BBv, ммоль/л); концентрация бикарбонатов в крови (АВа, АВv, ммоль/л); актуальная реакция крови – рНа, рНv.

Для анализов использовали артериальную и смешанную венозную кровь и материал костного мозга. Применяли стандартные методы измерений и методы математической статистики с использованием компьютерных программ [2, 5].

Результаты и их обсуждение. Полученные результаты представлены в таблицах 1–2. У интактных животных значения контрольных показателей нормы гемограммы, NO и КТФ крови соответствовали физиологическим величинам для крыс [2].

Таблица 1

Показатели NO и гемограммы в условиях модели гемической гипоксии (М ± m)

Показатель	Контроль нормы (I)	Экспериментальная ГГ (серия опытов)
ГГ-К (II)	L-арг. (III)	L-NNA (IV)
NO2- пл., мкг/мл	0,355 ± 0,058	0,182 ± 0,028*	0,238 ± 0,026*	0,157 ± 0,038*
NO2- эр., мкг/мл	0,217 ± 0,044	0,125 ± 0,020	0,151 ± 0,015	0,108 ± 0,024 *
NO3- пл., мкг/мл	4,992 ± 0,504	3,834 ± 0,320	4,229 ± 0,434	3,582 ± 0,434 *
NO3- эр., мкг/мл	2,874 ± 0,447	2,649 ± 0,338	3,375 ± 0,266	2,315 ± 0,530
NO пл., мкг/мл	5,347 ± 0,534	4,016 ± 0,346*	4,467 ± 0,459*	3,739 ± 0,469 *
NO эр., мкг/мл	3,091 ± 0,456	2,774 ± 0,357	3,526 ± 0,280	2,423 ± 0,552
Hb, г/л	144,0 ± 3,98	98,6 ± 4,94 *	123,6 ± 4,49*#	91,9 ± 4,53 *
Эр, Т/л	6,50 ± 0,26	4,08 ± 0,28 *	5,33 ± 0,35* #	3,81 ± 0,26 *
ЦП, отн. од.	0,67 ± 0,02	0,74 ± 0,05	0,71 ± 0,03	0,74 ± 0,02 *
Л, Г/л	7,44 ± 0,80	5,61 ± 0,55	6,63 ± 0,67	6,25 ± 1,07
Тр, Г/л	482,2 ± 50,7	362,1 ± 28,3 *	391,5 ± 42,4	358,4 ± 50,2
Гт,%	42,6 ± 1,60	32,9 ± 1,08 *	39,1 ± 1,23 #	31,8 ± 1,17 *

Таблица 2

Показатели кислородтранспортной функции крови в условиях модели гемической гипоксии (М ± m)

Показатель	Контроль нормы ( I )	Экспериментальная ГГ (серия опытов)
ГГ-К ( II )	L-арг. ( III )	L-NNA ( IV )
Hb, г/л	144,0 ± 3,98	98,6 ± 4,94 *	123,6 ± 4,49*#	91,9 ± 4,53 *
МtHb, г/л	1,34 ± 0,15	2,48 ± 0,31 *	1,61 ± 0,35 #	3,19 ± 0,40 *
2,3-ДФГ, ммоль/л	4,91 ± 0,27	6,25 ± 0,39 *	5,42 ± 0,31 #	7,07 ± 0,45 *
PaO2, мм рт. ст.	96,11 ± 2,38	80,23 ± 3,54 *	91,20 ± 2,85 #	73,18 ± 3,81*
PvO2, мм рт. ст.	43,99 ± 1,52	36,94 ± 3,03 *	38,46 ± 2,34	34,91 ± 2,71 *
CmaxO2, об. %	19,583 ± 0,712	13,415 ± 0,672*	16,812 ± 0,610*#	12,502 ± 0,616*
CaO2, об. %	18,85 ± 0,48	13,02 ± 0,64 *	16,35 ± 0,59*#	12,21 ± 0,59 *
CvO2, об. %	14,04 ± 0,59	7,79 ± 0,84 *	11,06 ± 0,77*#	7,42 ± 0,85 *
avDO2, об. %	4,804 ± 0,191	5,225 ± 0,281	5,292 ± 0,229*	4,785 ± 0,312
МОК, мл/(100г∙мин-1)	33,07 ± 3,81	38,14 ± 1,90	34,91 ± 3,72	26,61 ± 2,48*#
VaO2, мл/(100г∙мин-1)	7,120 ± 0,947	5,056 ± 0,501*	5,974 ± 0,877#	3,325 ± 0,426*#
VvO2, мл/(100г∙мин-1)	5,384 ± 0,823	3,098 ± 0,485*	4,089 ± 0,762	2,090 ± 0,372 *
VO2, мл/(100г∙мин-1)	1,736 ± 0,133	1,958 ± 0,083*	1,785 ± 0,122#	1,235 ± 0,090*#
SCR, отн. од.	3,994 ± 0,223	2,597 ± 0,246*	3,176 ± 0,241#	2,682 ± 0,246*
pHa	7,388 ± 0,009	7,319 ± 0,024*	7,368 ± 0,014	7,220 ± 0,031*#
pHv	7,357 ± 0,009	7,297 ± 0,024*	7,347 ± 0,013	7,195 ± 0,022*#

* – Р < 0,05 по отношению к норме (контроль).

# – Р < 0,05 по отношению к значениям при ГГ.

После применения бензола и g-облучения у животных воспроизводилась модель АА средней степени тяжести – уменьшение Эр и Hb в крови почти в два раза в сравнении с нормой, повышение концентрации железа в сыворотке крови в 1,3 раза, гемодилюция и наличие гипоплазии кроветворения. На этом фоне животным применяли воздействия на метаболизм NO; животные, которые находились в условиях спонтанного восстановления, служили контролем репрезентативности модели ГГ (серия II; ГГ-К).

На период окончания опытов сохранялась средняя степень АА: показатель Эр оставался сниженным на 37,23% в сравнении с нормой, Hb – на 31,50%, Гт – на 22,77% (Р < 0,001). Определялась характерная для апластической анемии трицитопения (Эр, Л, Тр). В костном мозге выявлены элементы раздражения, сужения и гипоплазии кроветворения. То есть модель апластической анемии и гемической гипоксии демонстрировала высокую репрезентативность.

Анемия сопровождалась системным повреждением КТФ крови: гипоксемией (уменьшение CvO2 на 44,50%), нарушением кислород-связывающих свойств Hb (увеличение содержания MtHb на 85,07%, а 2-3ДФГ – на 27,29 %), уменьшением транспорта кислорода кровью (VaO2 – на 28,99%; VvO2 – на 42,45 %; Р<0,05). МОК имел тенденцию к увеличению, наблюдалось также недостоверное увеличение avDO2 и VO2. Вcледствие неэффективности терминального окисления развивались недостаточность энергетического метаболизма и декомпенсированный метаболический ацидоз. В целом, несмотря на компенсаторные сдвиги системной гемодинамики, повреждения гемического и тканевого звеньев КТФ крови вызывали недостаточность кислородтранспортной системы – интегральный показатель SCR уменьшался в 1,54 раза (Р < 0,001). В патофизиологическом обозначении совокупность нарушений эритрона и кислородтранспортной системы в условиях созданной модели АА первоначально соответствовала гемической гипоксии, а при развитии метаболических осложнений и энергодефицита – гипоксии смешанного типа [5].